WWW.NET.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Интернет ресурсы
 

Pages:     | 1 || 3 | 4 |

«АГРОНОМИЯ. МЕЛИОРАЦИЯ МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГБОУ ВПО “Иркутская государственная сельскохозяйственная академия” ...»

-- [ Страница 2 ] --

3. Рассмотренная агротехника выращивания сеянцев лиственницы сибирской позволит сократить расход семян на 30-40%, увеличить выход стандартных сеянцев на 140-150%, снизить себестоимость выращивания сеянцев и тем самым позволит внедрить данную древесную породу в лесные культуры, улучшить водоохранное и почвозащитное значение лесов бассейна оз. Байкал.

Список литературы

1. Бобринев В.П. Ускоренное выращивание древесных пород / В.П. Бобринев – Новосибирск: Наука. – 1987. – 192 с.

References

1. Bobrinev V.P. Uskorennoe vyrawivanie drevesnyh porod [Accelerated cultivation of wood species]. Novosibirsk, 1987, 192 p.

Сведения об авторах:

Пак Лариса Николаевна – кандидат сельскохозяйственных наук, старший научный сотрудник. Институт природных ресурсов, экологии и криологии СО РАН (672000, Россия, г.

Чита, а/я 79, тел. 8(3022)206125, e-mail:pak_lar@bk.ru).

Бобринев Виктор Петрович – кандидат сельскохозяйственных наук, ведущий научный сотрудник. Институт природных ресурсов, экологии и криологии СО РАН (672000, Россия, г.

Чита, а/я79, тел. 89148013052, e-mail:pak_lar@bk.ru).

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

Information about the authors:

Pak Larisa Nikolaevna – Ph.D. in Agriculture, Senior Researcher, Institute of Natural Resources, Ecology and Cryology, SB RAS (P.O.B. 79, Chita, Russian Federation, 672000, phone.



8(3022)206125, e-mail:pak_lar@bk.ru).

Bobrinev Viktor Petrovich – Ph.D. in Agriculture, Senior Researcher, Institute of Natural Resources, Ecology and Cryology, SB RAS (P.O.B.79, Chita, Russian Federation, 672000, phone.

89148013052, e-mail:pak_lar@bk.ru).

–  –  –

В статье приведены данные влияния укрывного материала на полевую и лабораторную всхожесть семян Allium cepa, урожайность, вызреваемость, товарность и массу луковиц сорта “Однолетний Сибирский”. Исследован синтетический укрывной материал: Лутрасил 32, прозрачная полиэтиленовая плнка, чрная полиэтиленовая плнка. Изучены условия температуры и влажности почвы под укрывным материалом, выявлен среднеспелый российский сорт лука репчатого с вегетационным периодом 120 дней как для хранения, так и для посева семенами, установлена среднесуточная температура почвы на глубине 5 см в зоне расположения семян. Выявлено, что укрытие гряд плнками способствует повышению полевой всхожести семян, увеличению урожайности и повышению вызреваемости лука репчатого сорта “Однолетний Сибирский”.

Ключевые слова: лук репчатый, сорт “Однолетний Сибирский”, всхожесть семян, урожайность, вызреваемость, масса луковиц, синтетический укрывной материал, Лутрасил 32, прозрачная полиэтиленовая плнка, чрная полиэтиленовая плнка.

–  –  –

In article are provided these influences of an ukryvny material on field and laboratory viability of seeds of Allium cepa, productivity, a vyzrevayemost, marketability and mass of bulbs of a grade “Oneyear Siberian”. The material is investigated synthetic ukryvny: Lutrasil 32, transparent polyethylene film, black polyethylene film. Conditions of temperature and humidity of the soil under an ukryvny material are studied, the mid-season Russian grade of onions napiform with the vegetative period of 120 days both for storage, and for crops by seeds is revealed, the average daily temperature of the soil at a depth of 5 cm in a zone of an arrangement of seeds is established. It is revealed that the shelter of ridges films promotes increase of field viability of seeds, increase in productivity and increase of a vyzrevayemost of onions of a napiform grade “Oneyear Siberian”.





Key words: Onions napiform, grade “Oneyear Siberian”, viability of seeds, productivity, vyzrevayemost, mass of bulbs, synthetic ukryvny material, Lutrasil 32, transparent polyethylene film, black polyethylene film.

Allium cepa L. (лук репчатый) – ценное пищевое, лекарственное и витаминное растение семейства Liliaceaea. Лук репчатый обладает фитонцидными свойствами, содержит довольно большое количество сахаров и витаминов.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

Ранние посевы лука репчатого в открытом грунте страдают от суровых почвенно-климатических условий района исследования: колебания ночных и дневных температур, периодических холодных циклонов, низкой температуры почвы во время посева и др. В качестве укрывного материала можно использовать полиэтиленовую плнку, лутрасил и др. синтетические материалы. По сравнению с посевами лука в открытом грунте, посевы под синтетическими материалами позволяют повысить среднесуточную температуру почвы (на глубине до 5 см) на 7-8о под полиэтиленовой плнкой и на 2-3o под лутрасилом. Укрытие гряд с луком синтетическими материалами сокращает вегетационный период на 7-8 дней по сравнению с посевами в открытом грунте.

Цель работы – исследование влияния укрывных материалов на посевы лука репчатого сорта “Однолетний Сибирский” в условиях Предбайкалья. Задачи исследования: изучить условия температуры и влажности почвы под укрывными материалами; выявить среднеспелые российские сорта лука репчатого с вегетационным периодом в 135 дней как для хранения, так и для посева семенами;

установить среднесуточную температуру почвы на глубине 5 см в зоне расположения семян.

Объекты и методы исследования. Объектом исследования являлся сорт лука репчатого “Однолетний Сибирский”. Исследовали 3 вида синтетического укрывного материала: “Лутрасил-32”, прозрачную полиэтиленовую плнку 0.1 мм, чрную полиэтиленовую плнку.

Полевые исследования были проведены в 2007-2008 г. на территории Иркутского района. Лук высевали семенами в четырх повторностях в первой декаде мая на гряды (ширина гряд – 1 м, длина – 4 м, междурядье – 25 см), расстояние при посеве между семенами в каждом ряду – 4 см, в каждое гнездо помещали по 2 семени. Количество семян в каждой гряде – 200 шт. (1 г). После посева гряды укрывали синтетическим укрывным материалом, при поливе прозрачные и чрные плнки временно удаляли с посевов и гряды открывали.

Посевы, укрытые лутрасилом, поливали вместе с синтетическим покровом.

Укрывной материал удаляли с посевов при массовых всходах лука, через 15-20 дней после посева.

Наблюдения за температурой почвы проводили на глубине 5, 10, 20 см ежедневно в 8, 14, 20 часов суточного времени. Статистическая обработка экспериментальных данных выполнена по методике Доспехова [1].

Экспериментальная часть. Результаты исследования полевой и лабораторной всхожести семян лука репчатого приведены в таблице 1. Было выявлено, что укрытие гряд плнками способствовало ускорению появления всходов на 8-10 дней и повышению полевой всхожести семян по сравнению с открытым грунтом.

Укрытие гряд способствовало увеличению урожайности лука, повышению вызреваемости и массы луковиц (табл. 2). При этом урожайность лука на закрытых грядах составила 2300-2800 г/м2 вместо 1400 г/м2 в открытом грунте;

вызреваемость составила 48-55% вместо 44% в открытом грунте; средняя масса луковиц составила 52-58% вместо 48% в открытом грунте.

Ускоренное появление всходов позволило убирать лук не в конце, а в Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

середине сентября, то есть в более сухой и соответственно, в более благоприятный для уборки лука период.

Таблица 1 – Полевая и лабораторная всхожесть семян Allium cepa L.

–  –  –

Выводы. 1. На территории Иркутского района максимальная длина периода вегетации лука репчатого сорта “Однолетний Сибирский” составляет 120 дней и продолжается с 1 мая до 1 сентября. При этом среднесуточная температура почвы в зоне расположения семян (на глубине 5 см) в первой и во второй декаде мая достигает 12-14о с утренними колебаниями до 6-8о (при необходимой оптимальной температуре 25о).

2. Укрытие гряд плнками способствует повышению полевой всхожести семян, увеличению урожайности и повышению вызреваемости лука репчатого сорта “Однолетний Сибирский”.

Список литературы

1. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований) / Б.А. Доспехов – 5-е изд., доп. и перераб. – М.: Агропромиздат. – 1985. – 351 с.

References

1. Dospehov B.A. Metodika polevogo opyta (s osnovami statisticheskoj obrabotki rezul'tatov issledovanij) [Field sowing methods (with basic of statistic processing of research results].

Moscow, 1985, 351 p.

Сведения об авторах:

Сотникова Ирина Ивановна – аспирант кафедры ботаники, плодоводства и ландшафтной архитектуры агрономического факультета. Иркутская государственная сельскохозяйственная академия (664038, Россия, Иркутская обл., Иркутский р-он., п. Молодежный, тел. 89041532057, e-mail: elenax8@yandex.ru).

Худоногова Елена Геннадьевна – кандидат биологических наук, доцент кафедры ботаники, Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

луговодства и плодоводства агрономического факультета. Иркутская государственная сельскохозяйственная академия (664038, Россия, Иркутская обл., Иркутский р-он., п.

Молодежный, тел. 8(3952)237515, e-mail: elenax8@yandex.ru).

Information about the authors:

Sotnikova Irina Ivanovna – Ph.D. student, Department of Botany, Fruit Farming and Landscape Architecture, Faculty of Agronomy, Irkutsk State Academy of Agriculture (Molodezhnyi settlement, Irkutsk, 664038, Russia, phone. 89041532057, e-mail: elenax8@yandex.ru).

Khudonogova Elena Gennadievna – Ph.D. in Biology, assistant professor, Department of Botany, Fruit Farming and Landscape Architecture, Faculty of Agronomy, Irkutsk State Academy of

Agriculture (Molodezhnyi settlement, Irkutsk, 664038, Russia, phone. 8(3952)237515, e-mail:

elenax8@yandex.ru).

УДК 581.1:581.132.1:582.475

ОСОБЕННОСТИ ФОТОСИНТЕЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ХВОИ

PICEA AJANENSIS И PICEA SMITHIANA

М.С. Титова Горнотаежная станция им. В.Л. Комарова ДВО РАН, с. Горно-Таежное, Приморский край, Россия Исследовано содержание и соотношение фотосинтетических пигментов в хвое дальневосточного вида – ели аянской Picea ajanensis (Lindl. et Gord.) Fisch. и интродуцированной в дендрарий Горнотаежной станции – ели гималайской Picea Smithiana Boiss. Установлено, что по сумме фотосинтетических пигментов интродуцент уступает местному виду. Полученные данные расширяют представления о пигментном комплексе интродуцированных хвойных видов и могут быть использованы для диагностики состояния их фотосинтетического аппарата.

Ключевые слова: пигменты, интродукция, хлорофилл, каротиноиды, сосна.

–  –  –

The content and proportion of photosynthetic pigments in pine of Far East kind - spruce Picea ajanensis (Lindl. et Gord.) Fisch. and introduced into arboretum of mountain taiga station – spruce Picea Smithiana Boiss. It is established that according with the sum of photosynthetic pigments introduced spruce gives place to local kind. Data received expands the image about pigment complex of introduced pine trees and can be used to diagnosis the state of their photosynthetic apparatus.

Key words: pigments, introduction, chlorophyll, carotenoids, pine.

Роль интродукции растений на современном этапе ее развития достаточно многосторонняя. Это и направление развития ботанической науки, своеобразный раздел экспериментальной ботаники, практические результаты которой помогают прояснить те или иные вопросы теоретической ботаники. Это и источник экспериментального материала для многих сельскохозяйственных наук, в первую очередь для селекции растений. Это и способ удовлетворения материальных и культурных потребностей человечества, поскольку все культивируемые растения, в том числе и декоративные, являются интродуцентами. Это и один из методов Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

изучения растения вне естественных мест обитания (ex situ), которому в последнее время придается особое значение в программе сохранения разнообразия растений [1].

Выживание интродуцентов в новых местообитаниях возможно при их успешной адаптации к комплексу природно-климатических условий района интродукции [2]. Природные условия юга Приморского края определяются муссонным климатом. В таких условиях затяжная весна, пасмурное, с большим количеством туманов и осадков начало лета, суровая (сравнительно с европейской частью страны) с холодными северными ветрами зима, оказывают лимитирующее действие на нормальное развитие растений-интродуцентов.

В связи с этим большое значение при исследовании состояния растений имеет изучение пластичности фотосинтетического аппарата, его способности приспосабливаться к изменяющимся внешним условиям. Известно, что одним из показателей реакции растений на изменение факторов внешней среды, степени их адаптации к новым экологическим условиям является содержание хлорофиллов и каротиноидов – главных фоторецепторов фотосинтезирующей клетки [3].

Цель настоящего исследования – сезонная количественная оценка параметров накопления фотосинтетических пигментов в хвое Picea ajanensis (Lindl. et Gord.) Fisch. и Picea Smithiana Boiss. и выявление на биохимическом уровне адаптивных механизмов интродуцента в условиях дендрария Горнотажной станции.

Объекты и методы исследования. Объектом исследования явились хвойные породы в возрасте 45-50 лет дендрария Горнотажной станции ДВО РАН (Уссурийский район, Приморский край). Сезонную динамику содержания фотосинтетических пигментов в хвое изучали в паре “дальневосточный вид – интродуцент”, соответственно, ель аянская – ель гималайская.

В России ель аянская распространена в горах Сихотэ-Алинь, включая южные отроги (до 43.5° с. ш.), а также на Сахалине, Камчатке и Курильских островах. Ее ареал простирается на север до 57°с. ш.

Родиной ели гималайской или как ее еще называют ели Смита являются Западные Гималаи (произрастает на высоте 2000-3000 м над уровнем моря). Она требовательна к теплу и влажности воздуха и почвы; сильно страдает от засух.

Чувствительна к пыли и дыму. Выносит низкие температуры до -15-18°.

Количество хлорофиллов а, b и сумму каротиноидов определяли спектрофотометрическим методом с использованием методических разработок [4]. Образцы хвои второго года отбирали в трехкратной повторности в течение года. Далее в лабораторных условиях получали вытяжку пигментов в ацетоне.

Экстракты пигментов фильтровались вакуумным способом.

Оптические плотности пигментных вытяжек определяли с помощью однолучевого автоматизированного спектрофотометра СФ-56 (ЛОМО) по центрам поглощения:

для хлорофиллов а и b – 644 и 662 нм, для каротиноидов – 440.5 нм.

Основой расчета концентрации пигментов хлоропластов служили формулы

Веттштейна для 100% -ного ацетона:

Са= 9.78 х D662 – 0.99 х D644, Сb = 21.42 х D644 – 4.65 х D662, Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

Са+b =5.13 х D662 + 20.43 х D644, Скар = 4.69 х D440.5 – 0.268 (Са+ b), где С – концентрация хлорофиллов а, b и каротиноидов в мг/л, D – оптическая плотность в центрах поглощения пигментов 440.5; 644 и 662 нм.

Содержание пигментов в хвое вычислялось по формуле:

А = (С х V) / (P x 1000), где А – содержание пигмента в мг на 1 г сырой навески, С – концентрация пигмента в мг/л (после расчета по формулам 1, 2, 3, 4), V – объем вытяжки пигмента (мл), Р – навеска хвои (г).

Результаты исследований. Для оценки биологического потенциала ели гималайской с точки зрения интродукции и акклиматизации на юг Приморского края нами была исследована динамика накопления фотосинтетических пигментов в двухлетней хвое. В качестве эталона параллельно проводили сравнительное изучение работы пигментного комплекса хвои ели аянской, являющейся дальневосточным видом.

Согласно полученным данным, максимум накопления хлорофилла а у ели аянской был отмечен в январе (1.35 мг/г сырого веса), у ели гималайской зафиксированы два скачка нарастания “главного” хлорофилла – в июле (1.12 мг/г) и в октябре-ноябре (1.04 и 1.05 соответственно). Как видно из рис. 1, для местного вида наблюдается тенденция накопления данного пигмента в весенне-летние месяцы и его резкое снижение в ноябре-декабре. У интродуцента основной процесс накопления пигмента приходится на конец лета – начало осени.

–  –  –

На рис. 2 представлена динамика содержания хлорофилла b двух изучаемых видов. Как следует из представленных результатов, в среднем содержание этого Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

пигмента у дальневосточного вида больше (0.71 мг/г), чем у интродуцента (0.53 мг/г). Процесс накопления хлорофилла b у двух видов ели начинался в январе.

Снижение содержания зеленых пигментов в конце весны – начале лета связаны с началом роста хвои. К осени, когда ростовые процессы у ели замедляются, концентрация пигментов в хвое увеличивается. Именно этим фактом можно объяснить максимальные значения.

Рисунок 2 – Сезонная динамика содержания хлорофилла b в двухлетней хвое ели аянской и ели гималайской Одним из информативных показателей, характеризующих работу фотосинтетического аппарата является отношение хлорофилла а к хлорофиллу b (a/b). Это отношение связано с активностью “главного” хлорофилла а, чем оно больше, тем интенсивнее фотосинтез. В норме этот показатель должен соответствовать 2.2-3.0. В двухлетней хвое местного вида это отношение варьировало от 1.89 (апрель) до 2.51 (июль). У интродуцента ели гималайской оно изменялось в пределах от 1.65 (сентябрь) до 2.53 (июль). Наши результаты показывают, что наиболее стабильно фотосинтетический аппарат двух видов елей работал летом и в начале осени (таблица).

Среднее отношение хлорофиллов (a/b) у ели гималайской выше (2.24), чем у ели аянской (2.15). Можно предположить, что по этому показателю интродуцированный вид прошел успешную адаптацию к природным условиям дендрария Горнотаежной станции [5].

Отношение суммы хлорофиллов к каротиноидам (a+b/каротиноиды) играет не менее важную роль при характеристике работы фотосинтетического аппарата.

Это соотношение в норме стабильно и очень чутко реагирует на изменения различных факторов среды. В целом, приведенные данные (табл.) указывают, что с наступлением зимы (конец ноября-декабрь) у двух видов отмечали тенденцию к уменьшению соотношения (a+b/каротиноиды), что свидетельствует о Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

–  –  –

Важным составляющим пигментной системы хвойных являются каротиноиды. Исследование количественного содержания каротиноидов в хвое интродуцента и местного вида показало, что это довольно динамичный показатель. График накопления каротиноидов имеет вид многовершинной кривой.

Рисунок 3 – Сезонная динамика содержания каротиноидов в двухлетней хвое ели аянской и ели гималайской Как видно из рисунка 3, для двух двух видов наблюдалась общая тенденция накопления желтого пигмента с октября. Максимальные показатели содержания каротиноидов в хвое ели аянской нами были отмечены в январе (0.34 мг/г) и марте (0.33 мг/г). Согласно полученным данным, у ели гималайской наблюдаются два Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

скачка нарастания концентрации каротиноидов – в октябре-ноябре и февралемарте, максимум зафиксирован в январе – 0.32 мг/г. Относительно высокий уровень каротиноидов в позднеосеннее и зимнее время года объясняется адаптивной реакцией, направленной на повышение устойчивости фотосинтетического аппарата, предотвращение фотодинамической деструкции в холодное время года.

Выводы. 1. На основе полученных экспериментальных данных выявлены сезонные различия в содержании хлорофиллов и каротиноидов и динамике их накопления в хвое ели аянской и ели гималайской, произрастающих в дендрарии Горнотаежной станции.

2. Установлено, что фонд пигментов подвержен изменению в течение года и зависит от фазы годичного цикла, погодных условий сезона, влагообеспеченности и др. Так, общее количество пигментов у ели аянской изменяется в пределах 1.14 –

1.96 мг/г сырого веса, для интродуцента это значение варьирует от 1.35-1.87 мг/г.

3. С точки зрения пигментных показателей по уровню активности фотосинтетического аппарата у ели гималайской наблюдается стабильность в работе пигментного комплекса, но по уровню накопления пигментов этот вид уступает местному.

Список литературы

1. Карпун Ю.Н. Основы интродукции растений / Ю.Н. Карпун // Hortus botanicus. – 2004. – №2. – С. 17-32.

2. Базилевская Н.А. Теории и методы интродукции растений / Н.А. Базилевская – М.: Издво МГУ. – 1964. – 131 с.

3. Тужилкина В.В. Реакция пигментной системы хвойных на длительное аэротехногенное загрязнение / В.В. Тужилкина – М.: Экология. – 2009. №4. – С. 243-248.

4. Шлык А.А. Определение хлорофиллов и каротиноидов в экстрактах зеленых листьев / А.А. Шлык // Биохимические методы в физиологии растений. – М.: Наука. – 1971. – С. 154-170.

5. Титова М.С. Состояние фонда фотосинтетических пигментов дальневосточных и интродуцированных хвойных пород в условиях дендрария Горнотаежной станции ДВО РАН / М.С. Титова // Биологические исследования на Горнотаежной станции. Интродукция и рациональное использование растительных ресурсов Южного Приморья. – Владивосток:

Дальнаука. – 2011. – Вып.12. – С. 131-140.

References

1. Karpun Yu.N. Osnovy intriduktsii rastenii [The main problems of introduction]. Hortus botanicus, 2004, no.2, pp. 17-32.

2. Basilevskaya N.A. Teoriya i metody introduktsii rasteniy [Theory and methods of plant introduction]. Moscow, 1964, 131 p.

3. Tuzhilkina V.V. Reaktsiya pigmentnoy sistemy khvoynykh na dlitelnoe aerotekhnogennoe zagryaznenie. [Reaction of conifers’ pigment system to long aerotechnogenic pollution]. Moscow, 2009, no. 4, pp. 243-248.

4. Shlyk A.A. Opredelenie khlorofillov i karotinoidov v ekstraktaph zelenykh listev / [Determination of chlorophylls and carotinoids in green leaves extracts]. Moscow, 1971, pp. 154-170.

5. Titova M.S. Sostoyanie fonda fotosinteticheskikh pigmentov dalnevostochnykh i introdutsirovanykh khvoynykh porod v usloviyakh dendrariya Gornotaezhnoy stantsii [The state fund of photosynthetic pigments in the Far Eastern and introduced conifers in the arboretum of the MountainTaiga Station FEB RAS]. Vladivostok, 2011, pp. 131-140.

Сведения об авторе:

Титова Марина Сергеевна – кандидат биологических наук, ученый секретарь.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

Горнотаежная станция им. В.Л. Комарова ДВО РАН (692533, Россия, Приморский край, Уссурийский район, с. Горно-Таежное, ул. Солнечная, д. 26; e-mail: titovamarser@rambler.ru).

Information about the author:

Titova Marina Sergeevna – candidate of biological sciences, scientific secretary. Mountain-Taiga Station FEB of the Russian Academy of Sciences (692533, Russia, Primorye region, Ussuriisk, Mountain-Taiga Station, Solnechnaya street, 26, e-mail: titovamarser@rambler.ru).

УДК 574.32

МОЛЕКУЛЯРНЫЙ АНАЛИЗ СИБИРСКОГО СОБОЛЯ: ОБЗОР

СОВРЕМЕННЫХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

Л.И. Федорова, 2И.А. Кайгородова, 1В.О. Саловаров Иркутская государственная сельскохозяйственная академия, г.
Иркутск, Россия Лимнологический институт СО РАН, г. Иркутск, Россия В последнее время в Иркутской области увеличилась добыча зверьков со светлой окраской опушения, что ставит вопрос о выявлении причин “осветления” коренных более ценных тмных форм соболей. В решении этой проблемы могут быть полезны современные методы молекулярно-генетического анализа. Анализ литературы показал, что применяемый во многих работах участок генома не пригоден для выявления корреляции пушно-меховых качеств и уровня внутривидовой генетической изменчивости соболя, поскольку имеет недостаточный уровень генетической вариабельности.

Ключевые слова: микроэволюция, популяции, Martes zibellina, Восточная Сибирь.

MOLECULAR ANALYSIS OF SIBERIAN SABLE: MODERN METHODS OF RESEARCH

Fedorova L.I., 2Kaigorodova I.А., 1Salovarov V.О.

Irkutsk State Academy of Agriculture, Irkutsk, Russia Limnological Institute, SB of RAS, Irkutsk, Russia These days the volume of white fur sable hunting in Irkutsk region has increased which fact propones the question about “brightening” native and more valuable forms of dark sable. Solvation of this problem can introduce some modern methods of molecular and genetic analysis. The literature analysis shows that sector of genom used in many works is not suitable for educing fur quality correlation and level of intraspecific genetic changes of changes because it has insufficient level of genetic variability.

Key words: microevolution, population, Martes zibellina, Eastern Siberia.

Соболь (Martes zibellina L., 1758) является одним из наиболее важных промысловых видов, имеющих значительное экономическое, хозяйственное и эстетическое значение. При этом около 95% ресурсов соболя находятся на территории Российской Федерации. Ареал обитания этого вида простирается от Урала до Дальнего Востока, включая Камчатку. В Корее и Японии обитает сестринский вид – соболь японский Martes melampus. Обитает соболь в равнинных и горных кедровых, сосновых, елово-пихтовых, лиственничных, кедрово-стланиковых, каменно-березовых, а также в лесах смешанного типа.

Вследствие чего этот вид подвергается значительной внутривидовой географической изменчивости [2].

Анализ доступных литературных источников позволяет сделать вывод, что Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

генетическая структура популяций соболя исследована недостаточно. Популяции этих ценных пушных зверьков, обитающих на территории Иркутской области, вообще не изучались. Давно замечено, что цвет опушения соболя зависит от места его обитания и весьма изменчив: окраска ости – от светлой до почти черной, подпуши – от желтовато-рыжеватой до темно-голубой [7]. Наиболее ценен чрный соболь. Шкурки промысловых соболей, в зависимости от места добычи и пушно-меховых качеств, условно делятся на десять кряжей в порядке убывания их стоимостной ценности: баргузинский, камчатский, якутский, сахалинский, амурский, минусинский, алтайский, енисейский, тобольский и тувинский (ГОСТ 27571-87). Считается, что зверьки этих кряжей соответствуют зоологическим подвидам, хотя строгой связи между экологическими условиями районов обитания соболей и их окраской не было найдено [7]. Окраска меха соболя является наследственным признаком, зависящим от генотипа родителей и обусловленным условиями окружающей среды.

В Иркутской области заготавливаются четыре разновидности соболя:

баргузинский, якутский, енисейский и амурский. За последние два десятилетия, отмечается несколько крупных миграций соболя на территорию Иркутской области, две из которых были, предположительно, связаны с подкочвкой зверей в основном с западной енисейской популяции. После чего на территории области увеличилась заготовка шкурок соболя четвертого класса цвета. Такая тенденция продолжается и до настоящего времени. За последние пять лет количество заготовленных светлых особей возросло почти на 10%, а тмных, первого класса цвета, почти настолько же уменьшилось [4]. Однако в некоторых районах “осветления” не происходит, что объясняется благоприятными условиями обитания для данного вида [4, 5]. Выдвигаются две основные гипотезы о возможных причинах “осветления” соболей Иркутской области. Поглощение цвета в результате гибридизации разных по окраске особей или вытеснение светлыми зверьками более тмных из привычных местообитаний. Увеличение добычи зверьков светлой окраски ставит вопрос о выявлении причин “осветления” коренных, тмных форм соболей и разработке соответствующих мер их воспроизводства и охраны [4]. Ответ на поставленные вопросы может дать молекулярный анализ популяций, занимающих разные ареалы на территории области. Это позволит выявить причины осветления меха соболя и, соответственно, разработать методы возвращения животных с более тмной, а значит и более ценной окраской меха на территорию Иркутской области.

Цель работы – обзор современных методов исследования соболя и анализ полученных данных. Основное внимание мы уделили обзору работ с использованием молекулярно-генетических методов для определения внутривидовой и межвидовой вариабельности представителей рода Martes, в частности Martes zibellina L., 1758, обитающего на территории России.

Традиционно внутривидовые подразделения вида осуществлялись на основе морфологических признаков. Для выявления внутривидовой структуры соболя полагались на различия по характеру опушения, размеру особей и краниологическим признакам. В настоящее время развитие молекулярногенетических методов расширило возможности как фаунистических, так и Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

эколого-поведенческих исследований. Широко применяется молекулярный подход в решении проблем систематики, филогении и популяционной изменчивости животных. Такие исследования начали появляться как в России, так и за рубежом. Опубликована серия работ, посвящнных оценке генетических вариаций у японских представителей рода Martes – японской куницы и соболя [13, 14]. Изучением межвидовых митохондриальных интрогрессий между обыкновенной куницей, лесным хорьком и соболем занимаются в Европе [12].

Существуют попытки исследований по молекулярной идентификации промысловых видов куньих по помту [15].

В 1999 г. японские учные опубликовали первые сведения по молекулярному исследованию двух видов Martes [13]. Определив генетические расстояния между гаплотипами митохондриального гена цитохром оксидазы b (cytb), не удалось установить корреляции c географическим распределением. Повидимому, географическая изоляция является не полной или экспансия популяций на острова произошла относительно недавно.

Исследование филогеографии и популяционной истории европейских видов плотоядных животных Martes martes L., 1758 и Mustela putorius L., 1758 не выявили популяционного структурирования [12]. Тем не менее, на основе сравнения митохондриальных генов cytb удалось показать, что колонизация Европы этими животными происходила из одного из европейских рефугиумов по окончании плейстоценовых оледенений. Кроме того, генотип исследуемых животных сохранил свидетельства о межвидовой митохондриальной интрогрессии между куницей и соболем в Фенноскандии. Подобные явления гибридизации соболя с японской куницей были отмечены в работе Мураками и др. [14].

Группа российских учных опробовала возможность использования молекулярно-генетических методов для видовой идентификации куньих по продуктам жизнедеятельности [9]. Эффективность анализа при проведении исследования составила приблизительно 30%. Попытки амплификации более длинных участков – генов цитохрома b и первой субъединицы цитохром C оксидазы в этих работах были безуспешными, из-за малой концентрации ДНК, а также наличия примесей чужеродной ДНК в исследуемом материале.

Недавно российскими учеными начаты работы по исследованию генетической структуры природных популяций соболя и лесной куницы [8, 11], а также клеточных форм соболя [1, 3]. Молекулярный анализ популяций соболя, обитающих на территории Магаданской области, выявил пространственную гетереогенность популяций, обусловленную, по-видимому, историей формирования очагов интродукции камчатских и хабаровских соболей [8]. На Северном Урале также выявлен высокий уровень взаимной интрогрессии мтДНК у соболя и лесной куницы, что затрудняет отнесение каждой индивидуальной нуклеотидной последовательности к одной из этих линий, так как состав последовательностей не коррелирует с видовой принадлежностью особи, определенной по фенотипу [10, 11].

На территории России существует восемь промышленных популяций соболя.

Для решения вопросов воспроизводства особей, наследующих желательные товарные признаки, московские генетики [1, 3] разработали оценку уровня Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

генетической изменчивости клеточных соболей по митохондриальным генам.

Результаты данных исследований дали основания к заключению, что Martes zibellina L., 1758 в условиях промышленной доместикации сохранил большую часть своего аллельного состава, характерного для природных популяций. Анализ изменчивости исследованных локусов показал, что значительных различий по значениям наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготности не прослеживается. Это может быть следствием того, что скрещивание особей при клеточном содержании идет направленно и может быть следствием неслучайного скрещивания, т. е.

данный локус может быть вовлечен в отбор по селекционируемым признакам.

В совместном российско-японском исследовании внутривидовая генетическая вариабельность дальневосточного соболя и соболя с острова Хоккайдо была оценена с помощью нуклеотидных последовательностей митохондриальной NADH дегидрогеназы [16]. Показано, что популяция в южной части Приморского края на Дальнем Востоке России таит высокое генетическое разнообразие. Молекулярно-филогенетический анализ позволил рассчитать время миграции и основания популяции соболя на Хоккайдо.

Выводы. 1. Стандартный маркерный участок генома, позволяющий оценивать филогеографическое распределение популяций, не установлен.

Поэтому своей основной задачей мы видим поиск ДНК-маркера, пригодного для исследования популяций соболя на территории Иркутской области с целью выявления корреляции пушно-меховых качеств и уровня внутривидовой генетической изменчивости.

2. Исследование видового биоразнообразия, мониторинг размещения и расселения популяций животных на определенных территориях и, как следствие, разработка оптимальных условий воспроизводства и охраны этих ценных зверьков являются стимулом для поиска новых, более эффективных методов, в том числе с применением современных молекулярно-генетических подходов в решении проблем.

Список литературы

1. Андрианов Б.В. Изменение митохондриального генома доместифицированного соболя (Martes zibellina) / Б.В. Андрианов, С.Ю. Сорокина, О.Е. Лазебный, И.И. Горячева, Т.В. Горелова, С.Н. Каштанов // Генетика. – 2012. – Т.48(4). – С. 529-541.

2. Бакеев Н.Н. Соболь / Н.Н. Бакеев, Г.И. Монахов, А.А. Синицын – Вятка. – 2003 – 336 с.

3. Каштанов С.Н. Исследование генетической структуры промышленной популяции соболя (Martes zibellina L., 1758) / С.Н. Каштанов, Г.А. Рубцова, О.Е. Лазебный // Вестник ВОГиС. – 2010. – Т.14(3). – С. 426-431.

4. Кондратов А.В. Численность и пространственное распределение соболя Martes zibellina L., 1758 на территории Киренского района (Иркутская область) / А.В. Кондратов // Байкальский зоол. журн. – 2011. – №3. – С. 102-105.

5. Леонтьев Д.Ф. Ландшафтно-видовая концепция охотничьей таксации / Д.Ф. Леонтьев.

– Иркутск: ИрГСХА. – 2003. – 283 с.

6. Малярчук Б.А. Внутривидовая структура соболя (Martes zibellina L.) по данным изменчивости нуклеотидных последовательностей гена цитохрома-b митохондриальной ДНК / Б.А. Малярчук, А.В. Петровская, М.В. Деренко // Генетика. – 2010. – Т. 46(1). – С. 73–78.

7. Павлинов И.Я. Географическая изменчивость и внутривидовая систематика соболя (Martes zibellina L.) на территории СССР/ И.Я. Павлинов, О.Л. Россолимо // Сб. науч. трудов зоол. музея МГУ. – 1979. – Т. XVIII. – С. 241-255.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

8. Петровская А.В. генетическая структура популяций соболя (Martes zibellina L.) в Магаданской области по данным об изменчивости митохондриальной ДНК / А.В. Петровская // Генетика. – 2007. – Т.43(4). – С. 530-536.

9. Рожнов В.В. Использование молекулярно-генетических методов для видовой идентификации куньих по продуктам их жизнедеятельности / В.В. Рожнов, А.Л. Моргулис, М.В.

Холодова, И.Г. Мещерский // Экология. – 2008. – №1. – С. 73-76.

10. Рожнов В.В. Генетический анализ популяций соболя (Martes zibellina) и лесной куницы (M. martes) в районах совместного обитания на северном Урале / В.В. Рожнов, И.Г.

Мищерский, С.Л. Пищулина, Л.В. Симакин // Генетика. – 2010. – Т.46(4). – С. 553-557.

11. Рожнов В.В. Генетическая структура соболя (Martes zibellina L.) Евразии – анализ распределения митохондреальных линий / В.В. Рожнов, С.Л. Пищулина, И.Г. Мещерский, Л.В.

Симакин, О.Е. Лазебный, С.Н. Каштанов // Генетика. – 2013. – Т.49(2). – С. 251–258.

12. Davison A. Mitochondrial phylogeography and population history of pine martens Martes martes compared with polecats Mustela putorius / A. Davison, J.D.S. Birks, R.C. Brookes, J.E.

Messenger, H.I. Griffiths // Molecular Ecology. – 2001. – Vol. 10. – P. 2479-2488.

13. Kurose N. Intraspecific variation of mitochondrial cytochrome b gene sequences of the Japanese Marten Martes melampus and the Sable Martes zibellina (Mustelidae, Carnivora, Mammalia) in Japan / N. Kurose, R. Masuda, B. Siriaroonrat, M.C. Yoshida // Zoological science. – 1999. – Vol. 16.

– P. 693–700.

14. Murakami T. Mitochondrial DNA variation in the Japanese marten Martes malampus and Japanese sable Martes zibellina / T. Murakami, M. Asano, N. Ohtaishi // Jpn. J. Vet. Res. – 2004. – Vol.

51(3-4). P. 135-142.

15. O’Reilly C. Efficient species identification of pine marten (Martes martes) and red fox (Vulpes vulpes) scats using a 5’ nuclease real-time PCR assay / C. O’Reilly, M. Stathm, J. Mullins, D.

Turne, D. O’Mahony // Conservation Genetics. – 2007. – Vol. 9. – P. 735-738.

16. Sato J.J. Genetic diversity of the sable (Martes zibellina, Mustelidae) in Russian Far East and Hokkaido inferred from mitochondrial NADH dehydrogenase subunit 2 gene sequences / J.J. Sato, T.

Hosoda, A.P. Kryukov, I.V. Kartavtseva, H. Suzuki // Mammal Study. – 2011. – Vol. 36. – P. 209-222.

References

1. Andrianov B.V., Sorokina S.U., Labeznii O.E., Goriacheva I.I., Gorelova T.V., Kachtanov S.N. Izmenenie mitochondrealnogo genoma domestifitsirovannogo sobolya (Martes zibellina) [Mitochondrial genome change in domestication sable (Martes zibellina)]. Genetika [Genetics], 2012, vol. 48, no. 4, pp. 529-541.

2. Bakeev N.N., Monachov G.I., Sinicin A.A. Sobol [Sable]. Vyatka, 2003, 336 p.

3. Kashtanov S.N., Rubtsova G.A., Lazebnyiy O.E. Issledovanie geneticheskoy struktury promyshlennoy populyatsii sobolya (Martes zibellina L., 1758) [The study of genetic population structure of industrial sable (Martes zibellina L., 1758)]. Vestnik VOGiS [VOGiS Reporter]. 2010, vol.

14, no. 3, pp. 426-431.

4. Kondratov A.V. Chislennost i prostranstvennoe raspredelenie sobolya Martes zibellina L., 1758 na territorii Kirenskogo rayona (Irkutskaya oblast) [The abundance and spatial distribution of the sable Martes zibellina L., 1758 in Kirensk district (Irkutsk Region)]. Baykalskiy zoologicheskiy zhurnal [Baikal Zoological Journal]. 2011, no.3, pp. 102-105.

5. Leontyev D.F. Landshaftno-vidovaya kontseptsiya ohotnichey taksatsii [Landscape-species concept of taxation]. Irkutsk, 2003, 283 p.

6. Malyarchuk B.A., Petrovskaya A.V., Derenko M.V. Vnutrividovaya struktura sobolya (Martes zibellina L.) po dannyim izmenchivosti nukleotidnyih posledovatelnostey gena tsitohroma-b mitohondrialnoy DNK [Intraspecific structure of sable (Martes zibellina L.) based on nucleotide sequences of mitochondrial cytochrome-b gene variability]. Genetika 2010, vol. 46, no. 1, pp. 73-78.

7. Pavlinov I.Ya., Rossolimo O.L. Geograficheskaya izmenchivost i vnutrividovaya sistematika sobolya (Martes Zibellina L.) na territorii SSSR [Geographic variation and intraspecific systematics of sable (Martes zibellina L.) in the territory of the USSR]. Moscow, 1979, no. 18, pp. 241-255.

8. Petrovskaya A.V. Geneticheskaya struktura populyatsiy sobolya (Martes zibellina L.) v Magadanskoy oblasti po dannyim ob izmenchivosti mitohondrialnoy DNK [Genetic structure of Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

БИОЛОГИЯ. ОХРАНА ПРИРОДЫ

populations of sable (Martes zibellina L.) in the Magadan region according to the variability of mitochondrial DNA]. Genetika [Genetics], 2007, vol. 43, no. 4, pp. 530-536.

9. Rozhnov V.V., Morgulis A.L., Holodova M.V., Mecherskii I.G. Ispolzovanie molekulryanogeneticheskih metodov dlya vidovoy identifikatsii kunnih po produktam ih zhiznedeyatelnosti [The use of molecular genetic methods for species identification of mustelids by their waste products]. Экология [Ecology], 2008, no. 1, pp. 73-76.

10. Rozhnov V.V., Micherskii I.G., Pichulina S.L., Simakina L.V. Geneticheskiy analiz populyatsiy sobolya (Martes zibellina) i lesnoy kunitsyi (M. martes) v rayonah sovmestnogo obitaniya na severnom Urale Урале [Genetic analysis of Martes zibellina populations and pine marten (M.

martes) in the areas of co-habitation in the Northern Urals]. Genetika [Genetics]. 2010, vol. 46, no. 4, pp. 553-557.

11. Rozhnov V.V., Pichulina S.L., Mecherskii I.G., Simakin L.V., Labeznii O.E., Kachtanov S.N. Geneticheskaya struktura sobolya (Martes zibellina L.) Evrazii – analiz raspredeleniya mitohondrialnyh liniy [Genetic structure of the sable (Martes zibellina L.) Eurasia: distribution analysis of mitochondrial leneages]. Genetika [Genetics]. 2013, vol. 49, no. 2, pp. 251-258.

12. Davison A., Birks J.D.S., Brookes R.C., Messenger J.E., Griffiths H.I. Mitochondrial phylogeography and population history of pine martens Martes martes compared with polecats Mustela putoriu. Molecular Ecology. 2001, no. 10, pp. 2479-2488.

13. Kurose N., Masuda R., Siriaroonrat B., Yoshida M.C. Intraspecific variation of mitochondrial cytochrome b gene sequences of the Japanese marten Martes melampus and the sable Martes zibellina (Mustelidae, Carnivora, Mammalia) in Japan. Zoological science. 1999, no. 16, pp.

693-700.

14. Murakami T., Asano M., Ohtaishi N. Mitochondrial DNA variation in the Japanese marten Martes malampus and Japanese sable Martes zibellina. Jpn. J. Vet. Res. 2004, vol. 51, nos. 3-4, pp.

135-142.

15. O’Reilly C., Stathm M., Mullins J., Turne D., O’Mahony D. Efficient species identification of pine marten (Martes martes) and red fox (Vulpes vulpes) scats using a 5’ nuclease real-time PCR assay.

Conservation Genetics. 2007, no. 9, pp. 735-738.

16. Sato J.J., Hosoda T., Kryukov A.P., Kartavtseva I.V., Suzuki H. Genetic diversity of the sable (Martes zibellina, Mustelidae) in Russian Far East and Hokkaido inferred from mitochondrial NADH dehydrogenase subunit 2 gene sequences. Mammal Study. 2011, no. 36, pp. 209-222.

Сведения об авторах:

Кайгородова Ирина Александровна – кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории геносистематики. Лимнологический институт СО РАН (664033, Россия, г. Иркутск, ул. Улан-Баторская, 3, тел. 8(3952)422923; e-mail: irina@lin.irk.ru).

Саловаров Виктор Олегович – доктор биологических наук, факультет охотоведения.

Иркутская государственная сельскохозяйственная академия (664007, Россия, г. Иркутск, ул.

Тимирязева, 59, тел. 8(3952)290975; e-mail: zoothera@mail.ru).

Федорова Людмила Ивановна – магистрант кафедры прикладной экологии и туризма, факультета охотоведения. Иркутская государственная сельскохозяйственная академия (664007, Россия, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 59, тел. 89501277678; e-mail: ludiko@list.ru).

Information about the authors:

Kaygorodova Irina Aleksandrovna – Sc.D. in Biology, senior staff scientist, Department of Molecular Evolution. Limnological Institute (3, Ulan-Batorskaya st., Irkutsk 664033, Irkutsk, Russia;

phone. 8(3952)422923; e-mail: irina@lin.irk.ru).

Salovarov Victor Olegoviсh – Sc.D. in Biology, Professor, Department of Wild Life Management.

Irkutsk State Academy of Agriculture (59, Timiryasev St., Irkutsk 664007, Russia; phone. 8(3952) 29e-mail: zoothera@mail.ru).

Fedorova Lyudmila Ivanovna – graduate student. Department of Applied Ecology and Tourism, Faculty of Wild Life Management. Irkutsk State Academy of Agriculture (59, Timiryasev St., Irkutsk 664007, Russia; phone. 89501277678; e-mail: ludiko@list.ru).

–  –  –

Изыскание новых, эффективных средств и способов обезболивания, имеющих ряд преимуществ перед химическими средствами обезболивания, и по сей день актуально для ветеринарной практики. Целью исследований являлось определение оптимальных параметров тока для получения электроанальгезии (ЭА), используя различные конструкции электродов и места их наложения на голове у собак. Испытан импульсный ток прямоугольной формы частотой 100, 300, 500 и 700 Гц, длительностью импульсов 0.1; 0.2; 0.5; 1.0 и 2.0 мс. Рассмотрено влияние электроанальгезии на организм собак в операционном и послеоперационном периодах.

Исследованы изменения в показателях клинического статуса, морфологического и биофизического состава крови, возникающие под действием тока анальгетических параметров.

Ключевые слова: собаки, электроанальгезия, обезболивание, импульсный ток, морфологические и биофизические показатели крови.

CLINICAL LABORATORY OBJECTIVATION OF ELECTRO-ANALGESIA OF DOGS

Dashko D.V.

Irkutsk State Academy of Agriculture, Irkutsk, Russia The search of new effective ways of pain control that are privileged to chemical remedies is of great interest in veterinary. The main purpose of the research was determination of current rate optimal parameters to achieve electro-analgesia (EA) by means of different electrode constructions and place of attachment at dog’s head. Impulse current of rectangular shape at frequency of 100, 300, 500 and 700 Hz has been tested with duration of impulse at 0.1; 0.2; 0.5; 1.0 and 2.0 ms. The influence of EA on dogs organism during operation and post-operation periods has been considered.

The changes in clinic status parameters, morphological and biophysical blood composition under the action of analgesic current parameters have been studied.

Key words: dogs, electro-analgesia, pain control, impulse current, morphological and biophysical blood composition.

В течение долгого времени проблема применения новых и эффективных средств, способов и методик обезболивания затрагивает многие теоретические и практические аспекты как в медицине, так и в ветеринарии. Отечественные и зарубежные исследователи пытаются разработать и внедрить в практику новые способы обезболивания, которые по своей сущности имели бы ряд преимуществ перед химическими средствами обезболивания и обладали следующими качествами: безопасностью, точностью дозирования, легкой управляемостью, быстротой осуществления, малой степенью токсичности и не имели отрицательного последействия на организм. Таким способом обезболивания, отвечающим вышеперечисленным требованиям, является электроанальгезия (ЭА) [5].

В настоящее время, благодаря работам отечественных и зарубежных авторов, Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

накоплен богатый материал по электроанальгезии сельскохозяйственных животных [3, 5]. В основном сообщения по ЭА мелких животных, и в частности собак, носили экспериментальный характер.

Цель исследований – разработать способ электроанальгезии и выяснить его влияние на клинический статус, морфологические и биофизические показатели крови собак при проведении хирургических операций.

Для достижения цели исследования поставлены следующие задачи:

1. Разработать методику электроанальгезии собак, используя различные конструкции электродов, варианты их расположения на животном и параметры тока;

2. Определить характер клинических изменений и показателей гематологии в организме собак при разрабатываемых вариантах ЭА и на их основе выбрать наиболее оптимальный;

3. Испытать предлагаемый способ обезболивания при оперативных вмешательствах у собак.

Материал и методы исследований. Опыты по использованию ЭА у собак проводились на кафедре ветеринарной хирургии ИВМ ОмГАУ; в ООО “Питомник ЮКА” (г. Омск) и клубе служебного собаководства Омской области.

Объектами исследования служили взрослые собаки как клинически здоровые, так и с различной хирургической патологией.

Экспериментальные исследования по определению оптимальных параметров тока, конструкций электродов и мест их наложения были проведены в 19 комбинациях параметров тока при четырех вариантах наложения электродов:

“основания ушных раковин” (биаурикулярно), “глаза-затылок”, “висок-висок” (битемпорально) и “лоб-затылок”. В экспериментах был испытан импульсный ток прямоугольной формы, частотой 100, 300, 500 и 700 Гц, продолжительностью импульсов 0.1; 0.2; 0.5; 1.0 и 2.0 мс. В каждом из вариантов использовали по семь беспородных клинически здоровых собак в возрасте от двух до четырех лет, с живой массой тела до 20 кг. ЭА проводили генератором электрических импульсов “ГИ-1”.

При биаурикулярном наложении электродов на основания ушных раковин использовались фиксаторы типа “крокодильчик” (электроды-прищепки) с многослойной марлевой (фланелевой) прокладкой, смоченной физиологическим раствором. При варианте наложения электродов “висок-висок” использовали дуговые электроды собственной конструкции (рац. предложение № 385 от 26.08.2002 г., утвержденное ИВМ ОмГАУ). Дуговые электроды представляют собой фиксирующую дугу с двумя подвижными пластиковыми колодками, в которых изолированно крепится по одному пластинчатому полимерному токопроводящему электроду размером 35x20 мм. При варианте наложения электродов “глаза-затылок” использовали свинцовые пластинчатые электроды (на глаза площадью 4 см2, на затылок – 25 см2), вложенные во фланелевые чехлы, смоченные физиологическим раствором. Электроды на голове животного фиксировали при помощи универсального намордника-электрододержателя собственной конструкции (рац. предложение № 386 от 26.08.2002 г., утвержденное ИВМ ОмГАУ). В варианте расположения электродов “лобНаучно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

затылок” накладывали свинцовые пластинчатые электроды площадью 25 см2, по вышеописанной методике.

Перед началом опыта собак фиксировали на операционном столе Виноградова, на боку, предварительно изолировав от металлических конструкций стола прорезиненной тканью (кленкой). Подачу тока проводили “толчком” до задержки дыхания, с последующим уменьшением силы тока до момента его восстановления [5]. После этого за животными наблюдали не менее 30 минут.

При этом определяли температуру тела, частоту пульса и дыхания; наличие и степень беспокойства, тонус скелетной мускулатуры, уровень тактильной и болевой чувствительности в областях шеи, лопатки, надкостницы ребра, вентральной брюшной стенки. Полученные результаты оценивали по балльной шкале: максимальная реакция – 2 балла, слабая реакция – 1 балл, отсутствие – 0.

Помимо этого, учитывали наименьшую силу тока, скорость и надежность фиксации электродов, качество контакта электродов с тканями головы животного.

После выбора оптимальных параметров тока и варианта наложения электродов подбирался медикаментозный компонент с целью нивелирования нежелательных эффектов ЭА (приступ двигательного возбуждения в момент подачи тока). Для проведения опыта использовали три группы животных по семь беспородных собак в каждой. Контроль над животными осуществляли по вышеупомянутым клиническим признакам.

В первой серии опытов для премедикации применяли 0.1% раствор атропина сульфата из расчета 0.5 мг на 1 кг массы животного внутримышечно, за 20 минут до подключения тока анальгезирующих параметров.

Во второй серии опытов испытывали вариант ЭА с предварительным введением 2% раствора рометара из расчета 0.05 мл на 1 кг массы животного внутримышечно, за 10 минут до подключения тока.

В третьей серии опытов был испытан вариант с премедикацией 2.5% раствором аминазина из расчета 1.0 мг на 1 кг массы животного внутримышечно, за 30 минут до подключения тока.

Экспериментально-клинические испытания ЭА собак, как метода обездвиживания и обезболивания при хирургических операциях (овариэктомия), проводили на беспородных клинически здоровых собаках в возрасте от двух до четырех лет массой от 8 до 15 кг, в количестве 21-й головы. Перед началом оперативных вмешательств собак распределяли на три группы, по 7 голов в каждой.

Животных первой (контрольной) группы оперировали по общепринятой методике обездвиживания и обезболивания, применяемой в ветеринарной хирургии [2, 4].

Животных второй и третьей группы оперировали с применением ЭА по собственной методике: ЭА без премедикации и ЭА с предварительным введением экспериментально выбранного медикаментозного средства.

Динамику количественных показателей крови по эритроцитам, лейкоцитам, тромбоцитам, гемоглобину и лейкограмму исследовали у животных каждой группы согласно общепринятым в клинической практике методикам [1]. У животных 1-й (контрольной) группы исследования проводили до опыта, через 15 Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

минут после введения рометара, в период введения новокаина и рассечения брюшной стенки, удаления яичников, ушивания брюшной стенки, при наложении кожных швов; через 10 минут, 12 и 48 часов, 5, 7 и 11 суток после проведения операции. У животных 2-й (опытной) группы исследования проводили до опыта, через 5 минут после подключения тока, рассечения брюшной стенки, а у животных 3-й (опытной) группы исследования проводили до опыта, через 10 минут после введения рометара, в период подключения электрического тока и рассечения брюшной стенки, и далее отслеживали изменения аналогично временным периодам, принятым в контрольной группе (см. выше).

У животных всех трех групп, по вышеуказанным временным периодам, с помощью электрокоагулографа Н-334 определяли следующие биофизические показатели крови: время начала процесса свертывания, продолжительность процесса свертывания, скорость свертывания крови за первую, вторую, третью минуты; время начала процесса ретракции и фибринолиза кровяного сгустка, скорость ретракции и фибринолиза, плотность кровяного сгустка, количество выделившейся жидкости в результате ретракции и фибринолиза кровяного сгустка.

Клинические испытания ЭА при оперативном лечении собак проводились в производственных условиях. Перед оказанием лечебной помощи всех собак с хирургической патологией распределяли на пять подгрупп, в зависимости от характера и степени тяжести оперативного вмешательства, с учетом возраста животных: операции в пределах кожи и подкожной клетчатки; в пределах кожномышечной системы; в пределах мышечно-костной системы; полостные операции;

операции у старых собак (свыше 9 лет). Затем всех собак распределяли на две группы: контрольную и опытную.

Животных контрольной группы оперировали по общепринятой методике обездвиживания и обезболивания, применяемой в ветеринарии [2, 4].

Животным опытной группы с целью обезболивания проводили ЭА без премедикации и ЭА с предварительным введением экспериментально выбранного медикаментозного средства по вышеописанной методике. Выбор метода обезболивания у животных каждой группы проводили в зависимости от характера и степени тяжести оперативного вмешательства.

В операционный период учитывали общее состояние животного, температуру тела, частоту и характер пульса и дыхания, степень миорелаксации, обезболивания и обездвиживания. Визуально, по количеству свернувшейся крови и количеству использованных тампонов, определяли силу кровотечения и интенсивность свертывания крови у животных контрольной и опытной групп.

В послеоперационный период учитывали общее состояние животного, проводили ежедневный контроль за температурой тела, частотой пульса и дыхания. При ревизии послеоперационной раны регистрировали наличие местной температуры, гиперемии, болезненности, отечности, оценивали состояние швов.

Сроки заживления ран определяли по времени завершения рубцевания и эпителизации. Устанавливали время снятия швов.

Расчет денежных затрат на лекарственные препараты, которые применяли у собак с целью обезболивания и обездвиживания при выполнении оперативных Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

–  –  –

При этих параметрах тока степень беспокойства снижается на 82.1% (Р0.05), болевая чувствительность – на 96.1% (Р0.05). Незначительное беспокойство у некоторых животных проявляется при нанесении болевого раздражения в области надкостницы ребра. Тонус скелетной мускулатуры остается в пределах физиологической нормы. Достоверно уменьшается частота дыхания на 27.3% и пульса – на 24.0%, а температура тела повышается на 1.3% (Р0.05).

После выбора оптимального варианта наложения электродов и параметров тока проводили ЭА с предварительным введением атропина, рометара и аминазина. Полученные результаты сравнивали с результатами при ЭА без медикаментозного компонента (табл. 2).

Анализируя состояние животных при ЭА с предварительным введением медикаментозных средств, пришли к заключению, что лучший результат был получен при варианте с предварительным введением рометара. При этом на фоне снижения частоты пульса и глубоких дыхательных движений отмечали значительное снижение беспокойства и всех видов чувствительности с отсутствием болевой. Сила тока уменьшается, в среднем, на 24.6%.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

–  –  –

Таким образом, наилучшим вариантом наложения электродов является битемпоральное (“висок-висок”) при следующих параметрах тока: частота 300 Гц, продолжительность импульсов 0.5 мс, сила тока 29±2.77 мА, с предварительным введением рометара в дозе 0.05 мл на 1 кг массы животного.

После определения оптимальных вариантов расположения электродов, параметров тока и медикаментозного компонента провели экспериментальноклиническую апробацию предлагаемого способа обездвиживания и обезболивания при овариэктомиях у собак и клинические испытания в производственных условиях, при лечении собак с различной хирургической патологией.

В периферической крови собак при операциях с традиционным медикаментозным способом фиксации и обезболивания наблюдается недостоверное снижение количества эритроцитов и гемоглобина, в среднем, на 11.1% и 11.8%, соответственно. В послеоперационном периоде отмечается тенденция к лейкоцитопении и тромбоцитопении. К первоначальному значению показатели морфологического состава крови приближаются по истечении 5-х суток после операции.

Со стороны биофизических показателей крови собак контрольной группы наблюдались следующие изменения: время начала процесса свертывания крови в период операции недостоверно сокращается на 36.4-38.9%, а продолжительность процесса свертывания – уменьшается, в среднем, на 27.4% (Р0.05). Скорость свертывания крови наиболее высока в период операциии колеблется в пределах 50.3-85.3% (Р0.05). Процесс ретракции и фибринолиза кровяного сгустка начинается раньше в период операции и в первые часы послеоперационного периода.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

В периферической крови собак в период ЭА отмечалось повышение количества эритроцитов, в среднем, на 15.7%. В послеоперационный период колебания в повышении количества эритроцитов составляли от 10.0 до 20.1%, при тенденции к снижению количества гемоглобина на 7.0-9.0% (Р0.05), повышении лейкоцитов на 49.1-65.8% (Р0.05) и тромбоцитов в 1.6 раза. В лейкоцитарной формуле наблюдается нейтрофильный лейкоцитоз с простым регенеративным сдвигом ядра влево и эозинопения.

Со стороны биофизических показателей крови собак опытных групп как в период действия тока, так и в послеоперационный период наблюдались следующие изменения: укорочение времени начала процесса свертывания крови, в среднем, 49.4% (Р0.05) и продолжительности свертывания крови на 33.1-35.3% (Р0.05); повышение скорости свертывания крови в 2.8 раза; время начала процесса ретракции и фибринолиза кровяного сгустка укорачивается на 65.7% (Р0.05); скорость ретракции и фибринолиза кровяного сгустка ускоряется в 1.8 раза с тенденцией к последующему снижению; плотность кровяного сгустка повышается в 3.2 раза через 48 часов после операции.

Показатели гематокрита у животных в трех группах незначительно колебались в пределах физиологической нормы.

Анализируя результаты экспериментально-клинических испытаний, можно провести некоторую аналогию динамики физиологического состояния по временным периодам у собак второй и третьей опытных групп. Но следует отметить более сглаженную реакцию со стороны крови собак, оперированных под ЭА с премедикацией.

Животные, оперированные с применением ЭА, легче переносили хирургическое вмешательство. У них наблюдалась меньшая кровоточивость тканей, лучшая степень обездвиживания и обезболивания, хорошая миорелаксация. У оперированных животных раны заполнялись полноценной грануляционной тканью, процессы заживления ран протекали быстрее (в среднем на 2-3 дня), осложнений не отмечалось, что позволяло сэкономить перевязочные материалы (в 2 раза) и значительно сократить денежные затраты на лекарственные препараты.

Выводы. 1. ЭА собак прямоугольным импульсным током является безопасным, легко управляемым и экологически чистым способом.

2. ЭА в значительной степени активизирует систему гемостаза и фибринолиза у собак.

3. ЭА не вызывает клинически заметного периода депрессии, уменьшает кровопотери при операциях, улучшает течение послеоперационного периода, что проявляется острым воспалением, сокращением времени заживления ран и сроков лечения, профилактики послеоперационных осложнений и значительно позволяет сократить затраты на лекарственные препараты и перевязочные материалы.

4. Все возникающие изменения в организме собак под действием тока носят временный и обратимый характер.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

Список литературы

1. Кондрахин И.П. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии / И.П.

Кондрахин, Н.В. Курилов, А.Г. Малахов – М.: Агропромиздат, 1985. – 287 с.

2. Магда И.И. Оперативная хирургия / И.И. Магда, И.Н. Воронин, Б.З. Иткин – М.:

Агропромиздат, 1990. – 333 с.

3. Начатов Н.Я. Теория и практика транскраниальных электрообезболивания и электростимуляции животных / Н.Я. Начатов – Омск: изд-во ИВМ ОмГАУ, 2004. – 152 с.

4. Субботин В.М. Современные лекарственные средства в ветеринарии / В.М. Субботин, С.Г. Субботина, И.Д. Александров – Ростов-на-Дону: Феникс, 2000. – 592 с.

5. Сундуков П.П. Электрообезболивание животных / П.П. Сундуков, Н.Я. Начатов – Киев:

изд-во УСХА, 1991. – 136 с.

References

1. Kondrahin I.P., Kurilov N.V., Malahov A.G. Klinicheskaja laboratornaja diagnostika v veterinarii [Clinic laboratory diagnostics in veterinary]. Moscow, 1985, 287 p.

2. Magda I.I., Voronin I.N., Itkin B.Z. Operativnaja hirurgija [Operative surgery]. Moscow, 1990, 333 p.

3. Nachatov N.Ya. Teorija i praktika transkranial'nyh jelektroobezbolivanija i jelektrostimuljacii zhivotnyh [Theory and practice of trans-cranial electro-analgesia and elctro-stimulation of animals].

Omsk, 2004, 152 p.

4. Subbotin V.M., Subbotina S.G., Alexandrov I.D. Sovremennye lekarstvennye sredstva v veterinarii [Modern remedies in veterinary]. Rostov-on-Don, 2000, 592 p.

5. Sundukov P.P., Nachatov N.Ya. Jelektroobezbolivanie zhivotnyh [Electro-analgesia of animals]. Kiev, 1991, 136 p.

Сведения об авторе:

Дашко Денис Владимирович – кандидат ветеринарных наук, старший преподаватель кафедры специальных ветеринарных дисциплин факультета биотехнологии и ветеринарной медицины.

Иркутская государственная сельскохозяйственная академия (664038, Россия, Иркутская область, Иркутский район, пос. Молодежный, тел. 89149545080, e-mail: den120577@bk.ru).

Information about the author:

Dashko Denis Vladimirovich – Senior Lecturer, Department of Special veterinary sciences, Faculty of Biotechnology and Veterinary Medicine. Irkutsk State Academy of Agriculture (Molodezhny

Settlement, Irkutsk district, Irkutsk region, Russia, 664038, phone. 89149545080, e-mail:

den120577@bk.ru).

УДК: 611.3636.4-053.81

ИЗМЕНЕНИЯ БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ ПОРОСЯТОТЪЕМЫШЕЙ ПРИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОМ ГАСТРОЭНТЕРИТЕ ДО И

ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ Е.В. Курятова, 2Е.А. Карлова, 2О.П. Ильина Дальневосточный аграрный университет, г. Благовещенск, Россия Иркутская государственная сельскохозяйственная академия, г. Иркутск, Россия При применении пробиотических препаратов происходят восстановительные процессы в печени и поджелудочной железе, на что указывает снижение количества щелочной фосфатазы,

-амилазы, нормализация коэффициента Де Ритиса (АСТ/АЛТ) в сыворотке крови, а также снижение количества билирубиновых фракций и глюкозы до физиологических пределов.

Ключевые слова: гастроэнтерит, биохимические показатели крови.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

CHANGES OF BLOOD BIOCHEMICAL PARAMETERS OF WEANED PIGLETS AT

NONSPECIFIC GASTROENTERITIS BEFORE AND AFTER TREATMENT

Kuryatova E.V., 2Charles E.A., 2Ilina O.P.

Far Eastern Agricultural University, Blagoveshchensk, Russia Irkutsk State Academy of Agricultural, Irkutsk, Russia In the application of probiotics occur restorative processes in the liver and pancreas, as indicated by the decrease in the number of alkaline phosphatase, -amylase, the normalization factor De Ritis (AST / ALT) levels in the blood serum, as well as reducing the amount of bilirubin fractions and glucose to physiological limits.

Keywords: gastroenteritis, blood biochemistry.

Эффективность ведения свиноводства зависит от ветеринарного благополучия свиноводческих хозяйств. Заболевания молодняка свиней продолжают оставаться одной из серьезнейших причин, сдерживающих развитие свиноводства и наносящих ему значительный ущерб [4].

Согласно данным ежегодной статистической отчетности, представленной Департаментом ветеринарии МСХ РФ, в общей структуре заболеваний подсосных поросят болезни органов пищеварения составляют до 75%, из них до 20% занимают диспепсии, 26-35% – гастроэнтериты. Заболевания в раннем постнатальном периоде жизни животных распространены повсеместно, развиваются в первые часы жизни, сопровождаются тяжелыми токсическими явлениями, характеризуются высокой смертностью [3]. Гибель поросят от желудочно-кишечных болезней достигает 40-50% [1]. На этом фоне профилактика и лечение гастроэнтеритов приобретает социальную значимость.

Цель данных исследований – изучить биохимическую картину крови поросят, больных неспецифическим гастроэнтеритом до и после лечения пробиотическими препаратами.

Материал и методики. Исследования проводили в период с 2006 по 2010 гг.

в лаборатории кафедры физиологии и незаразных болезней животных, института ветеринарной медицины и зоотехнии Дальневосточного государственного аграрного университета, а также в ФГУСП “Поляное”, села Крестовоздвиженки Константиновского района Амурской области.

Объектом исследования были поросята-отъемыши, живой массой 10-13 кг, в возрасте 35-40 дней. Поросята содержались в маточниках. Животных кормили 5 раз в день, в одно и то же время суток. Рацион состоял из комбикорма СПК-3 для поросят-отъемышей и овсяной каши. Поение осуществлялось при помощи автоматической поилки.

Для проведения опыта среди поросят-отъемышей отбирались животные с явной клинической картиной гастроэнтерита, из которых были сформированы четыре группы по 10 голов в каждой. Схема лечения представлена в таблице 1.

Одна группа – контрольная, три – опытных. В контрольной группе лечение проводилось по схеме, принятой в хозяйстве. В опытной 1 – применяли препарат ”Стрептобифит” на фоне лечения предприятия, в опытной 2 – “Ветом 3”, в опытной 3 – применяли “Интестевит” на фоне лечения, принятого в хозяйстве.

Отбор крови для биохимических исследований осуществляли из ушной вены до лечения и после выздоровления.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

–  –  –

Общий белок определяли рефрактометрическим способом (A.M.Ахмедов, 1968), резервную щелочность – по А.П. Неводову, глюкозу – по Сомоджи (И.Ф.

Храбустовский и соавт., 1974).

Содержание билирубина в сыворотке крови определяли по методу Ван ден Берга, аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) – колориметрическим методом, предложенным Райтманом и Френкелем (1957).

Определяли коэффициент Де Ритиса (отношение АЛТ к АСТ) (1972). Количество щелочной фосфатазы (ЩФ) в плазме крови определяли “по конечной точке” методом Бессея-Лоури-Брока.

Обсуждение результатов. При биохимических исследованиях крови больных животных (табл. 2) отмечалось увеличение общего белка крови на 26.2%, снижение резервной щелочности в 2 раза. Количество глюкозы по сравнению со здоровыми животными увеличилось на 48.1%. В данной группе общий билирубин возрастал в 2.6 раза в основном, за счет увеличения непрямого билирубина в 2.9 раза, при этом количество прямого билирубина увеличилось в 2.3 раза.

Отмечалось увеличение количества ферментов переаминирования в сыворотке крови. Резко увеличилось содержание аланинаминотрансферазы (АЛТ) в 6.8 раза по сравнению со здоровыми животными. Также наблюдалось повышение количества аспартатаминотрансферазы (АСТ) в 5.3 раза. На этом фоне снижался коэффициент Де Ритиса и составлял 0.6±0.03, что говорит о поражениях паренхимы печени у больных поросят.

Щелочная фосфатаза (ЩФ) увеличилась по сравнению со здоровыми животными в 2.1 раза, что свидетельствует о внутрипеченочном холестазе и также указывает на дисфункцию печени. Увеличение -амилазы у больных животных в 5 раз свидетельствует о функциональных нарушениях поджелудочной железы.

Таким образом, результаты клинического и биохимического анализа крови свидетельствуют о нарастании аутоинтоксикации с вовлечением панкриобилиарной системы, что подтверждается не только нарастающим ацидозом, лейкоцитозом и увеличением количества общего белка, но и увеличением количества прямого и непрямого билирубина. Увеличение числа Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

–  –  –

Коэффициент Де Ритиса (АСТ/АЛТ) снизился в первой и во второй опытной группах в два раза, в третьей – в 2.1 раза по сравнению с контролем.

Следовательно, под влиянием препаратов стрептобифид, ветом 3 и интествит печени поросят происходит нормализация репаративных процессов.

Количество щелочной фосфатазы снизилась в первой опытной группе на 53.5%, во второй и третьей – на 44.6 и 65.6% соответственно, однако оставалась высокой в контрольной группе.

После проведенной терапии было отмечено восстановление ферментативной активности поджелудочной железы. В группе, где применяли стрептобифид, показатели -амилазы снизились в 2.5 раза, там, где использовали ветом 3 – в 2.4 раза. Однако наибольшим коррекционным действием активности поджелудочной железы обладало применение интестевита. Так, показатель -амилазы в третьей опытной группе достоверно снизился в 3 раза (p0.05) в сравнении с контролем.

О восстановительных процессах в печени и поджелудочной железе и стимуляции их функций при применении пробиотических препаратов в большей степени говорит снижение количества щелочной фосфатазы, -амилазы, нормализация коэффициента Де Ритиса (АСТ/АЛТ) в сыворотке крови, а также снижение количества билирубиновых фракций и глюкозы до физиологических пределов.

Список литературы

1. Клименко В.В. Применение пробиотиков в ветеринарии / В.В.Клименко // Матер. III-IV Междунар. науч. семинаров // М.: ЭКСПРЕСС. – 2002. – С. 32-34.

2. Леляк А. Пробиотики и функциональное питание / А. Леляк // Матер.VI междунар. конф.

“Современные технологии восстановительной медицины” // М.: ЭКСПРЕСС. – 2001. – С. 21-23.

3. Сидоров А.М. Основы профилактики желудочно-кишечных заболеваний новорожденных животных / А.М. Сидоров, В.В. Субботин // Ветеринария. – 1998. – №1. – С. 37.

4. Шахов А.Г. Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях / А.Г.

Шахов // Вет. патология. – 2003. – № 2. – С. 6-7.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

References

1. Klimenko V.V. Primenenie probiotikov v veterinarii [The use of probiotics in veterinary].

Moscow, 2002, pp. 32-34.

2. Leljak A. Probiotiki i funkcional'noe pitanie [Probiotics and functional foods]. Moscow, 2001, pp. 21-23.

3. Sidorov A.M. Osnovy profilaktiki zheludochno-kishechnyh zabolevanij novorozh-dennyh zhivotnyh [Framework for prevention of gastrointestinal diseases newborn animals]. Veterinarija [Veterinary]. 1998, no. 1, pp. 37.

4. Shahov A.G. Aktual'nye problemy boleznej molodnjaka v sovremennyh uslovijah [Actual problems of disease in young contemporary conditions]. Vet. patologija [Vet. pathology]. 2003, no. 2, pp. 6-7.

Сведения об авторах:

Ильина Ольга Петровна – доктор ветеринарных наук, профессор кафедры анатомии и ветеринарно-санитарной экспертизы факультета биотехнологии и ветеринарной медицины.

Иркутская государственная сельскохозяйственная академия (664007, Россия, Иркутск, ул.

Тимирязева, 59, тел. 89025602197, e-mail: rector@igsha.ru).

Курятова Елена Вячеславовна – кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры патологии, морфологии и физиологии факультета ветеринарной медицины и зоотехнии. Дальневосточный государственный аграрный университет (6775009, Россия, Благовещенск, ул. Театральная, 65/82, тел. 89246723732, e-mail: korol2702@mail.ru).

Карлова Елена Александровна – старший преподаватель кафедры специальных ветеринарных дисциплин факультета биотехнологии и ветеринарной медицины. Иркутская государственная сельскохозяйственная академия (664007, Россия, Иркутск, ул. Тимирязева, 59, тел. 89025662484, e-mail: rector@igsha.ru).

Information about the authors:

Ilina Olga Petrovna – Sc.D. in Veterinary, professor, Department of Anatomy and Veterinary-Sanitary Expertise, Faculty of Biotechnology and Veterinary, Far Eastern State University of Agriculture (59, Timiryazeva st., Irkutsk, 664007, Russia, phone. 89025602197, e-mail: rector@igsha.ru).

Kuryatova Elena Vyacheslavovna – Ph.D. in Veterinary, assistant professor, Department of Pathology, Morphology and Physiology, Faculty of Veterinary and Zootechnics, Irkutsk State Academy of Agriculture (65/82, Teatralnaya st., Blagoveshchensk, 6775009, Russia, phone. 89246723732, email: korol2702@mail.ru).

Karlova Elena Aleksandrovna – senior teacher, Department of Special Veterinary Disciplines, Faculty of Biotechnology and Veterinary, Irkutsk State Academy of Agriculture (59, Timiryazeva st., Irkutsk, 664007, Russia, phone. 89025662484, e-mail: rector@igsha.ru).

УДК 636.2:611.77

ВОЗРАСТНЫЕ И СЕЗОННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ САЛЬНЫХ ЖЕЛЕЗ

КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

В.Ч. Содномов Бурятская ГСХА имени В. Р. Филиппова, г. Улан-Удэ, Россия Представлена динамика изменения морфометрических показателей сальных желез (глубина залегания, длина, ширина) крупного рогатого скота на разных топографических участках кожи (шеи, холки, крупа, живота, внутренней поверхности бедра), в зависимости от возраста и сезона года. Исследования показали, что железы кожи области живота имеют наибольшие морфометрические показатели, а железы области внутренней поверхности бедра

– наименьшие. В летний период морфофункциональная активность сальных желез выше, чем зимой. Отмечено, что более интенсивно железы увеличиваются в размерах до 18-месячного Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

возраста животных.

Ключевые слова: кожа, сальные железы, морфометрические показатели, динамика изменений.

AGE-SPECIFIC AND SEASONAL CHANGES OF CATTLE SEBACEOUS GLAND

Sodnomov V.Ch.

Buryat State Academy of Agriculture n.a. V.R. Filippov, Ulan-Ude, Russia The dynamics of morphological indexes of cattle sebaceous gland (depth of formation, length, width) on different topographical areas of skin (neck, withers, crupper, stomach, inner femur) depending on age and season of the year is shown. The research has shown that stomach glands have the highest morphological indexes and inner femur glands have the lowest. In summer period morphofunctional activity of sebaceous glands is higher than in winter. It is noticed that the biggest growth of glands occurs before the age of 18 months.

Key words: skin, sebaceous gland, morphological indexes, dynamics of changes.

Сальные железы имеют определенное физиологическое значение для жизнедеятельности организма и тесно связаны с волосяными фолликулами. Они имеют одинаковую клеточную структуру,относятся к альвеолярным железам и секретируют по голокриновому типу. Продуктом является кожное сало, которое служит жировой смазкой как для кожи, так и для волос, предохраняя их от высыхания, излишней влажности, проникновения микроорганизмов и т.д. [1].

Степень развития железистой ткани положительно коррелирует с показателем удойности и жирномолочности у продуктивных животных [2, 5]. Кроме этого, исследования сальных желез козлов [3] показали, что к периоду полового созревания они увеличиваются в размерах и продуцируют вещества, обуславливающие специфический запах.

Поскольку кожа подвержена значительным воздействиям сезонных изменений окружающей среды [4], целью наших исследований явилось изучение динамики гистологических и морфометрических (глубина залегания, длина и ширина) показателей сальных желез крупного рогатого скота в связи с возрастом и сезоном года.

Материал и методы исследований. Материалом исследований служила кожа крупного рогатого скота разных возрастных групп (новорожденные, 6, 12, 18, 24, 30 и 36-месячные), взятые от животных учхоза “Байкал” Бурятской ГСХА им. В.Р. Филиппова и пригородных фермерских хозяйств.

Кусочки кожи брались из 5 топографических участков тела: средней трети шеи, холки, крупа, живота и внутренней поверхности бедра. Полученный материал фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. После проводки гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином и по ван Гизон.

Замеры проводились с использованием морфометрического программного обеспечения “MicromedImages”, а статистическая обработка – с использованием программы “MicromedStatistica”.

Собственные исследования. У крупного рогатого скота волосяной фолликул сопровождается двумя сальными железами. Альвеолы чаще имеют грушевидную или мешковидную форму, их выводные протоки, ампуловидно расширяясь, открываются в верхней трети волосяного влагалища.

В таблице 1 представлены данные глубины залегания сальных желез в связи Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

–  –  –

По данным таблицы 1, у новорожденных животных наибольшая глубина залегания сальных желез отмечается в области живота, несколько меньше – в области крупа и холки. Более поверхностно располагаются железы области шеи и внутренней поверхности бедра. В 6-месячном возрасте железы области холки по глубине залегания незначительно превосходят таковые области живота. В области шеи и крупа этот показатель имеет примерно одинаковое значение.

Такая последовательность глубины залегания по участкам кожи отмечается и у взрослых животных.

Изменение глубины залегания сальных желез по сезонам года представлено на рисунке 1.

Рисунок 1 – Динамика изменения глубины залегания сальных желез по сезонам года Из данных рисунка 1 следует, что в течение указанного периода развития животных наибольшее увеличение глубины залегания сальных желез отмечается в летнее время.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

–  –  –

По данным таблиц 2 и 3 наиболее крупными железами во всех возрастных группах характеризуется область живота, альвеолы которых имеют округлоовальную форму. Наименьшие показатели отмечаются в области внутренней поверхности бедра. В области холки железы представлены крупными альвеолами грушевидной формы. В области шеи, крупа и внутренней поверхности бедра более вытянутой формы.

В возрасте от 12 до 18 месяцев у животных отмечается наиболее интенсивное увеличение желез в размерах. Так, например, в области шеи за этот период они увеличивается на 35.51 мкм, в то время как от 18 до 36 месяцев – на 37.28 мкм.

Ширина желез, соответственно, на 25.81 мкм и 53.51 мкм. Такие же изменения отмечаются и на других участках.

Изменение длины и ширины сальных желез по сезонам года изображено на рисунках 2 и 3.

Из данных рисунков 2 и 3 видно, что в летнее время, во всех возрастных группах, происходит значительное увеличение сальных желез в размерах. На исследованных участках кожи эти показатели более чем в два раза превосходят таковое по сравнению с зимним периодом.

–  –  –

Рисунок 2 – Динамика изменения сальных желез по сезонам года Рисунок 3 – Динамика изменения ширины сальных желез по сезонам года Выводы. 1. Кожа области живота характеризуется наибольшими морфометрическими показателями желез, а кожа области внутренней поверхности бедра- наименьшими.

2. Наиболее интенсивное увеличение желез отмечается в период от новорожденности до физиологической зрелости (16-18 месяцев).

3. Морфофункциональные показатели сальных желез в летний период выше, чем в зимнее время.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

Список литературы

1. Агабейли А. Особенности строения кожи и их значение в оценке продуктивности буйволиц / А. Агабейли, С. Кулиев // Социалистическое сельское хозяйство Азербайджана. – 1958. – № 11. – С. 35-38.

2. Ермаков В.Е. Особенности гистоморфологических показателей кожно-волосяного покрова и железистого аппарата кожи симментальского и черно-пестрого скота / Е.В. Ермаков, Р.Я. Казаченко // Скотоводство в Забайкалье и Амурской области. – 1984. – С. 116-121.

3. Соколов А.Л. Изменение кожно-волосяного покрова ремонтных телок при адаптации их к свободно-выгульному содержанию / А.Л. Соколов, О.В. Соболева, В.Ф. Позднякова, Е.В.

Воронова // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. – С-Пб. – 2010. – № 2. – С. 37-39.

4. Техвер Ю.Т. Гистология кожного покрова домашних животных / Ю.Т. Техвер – Тарту. – 1971. – 112 с.

5. Dreier J.H. Some observations on the skin histology and fibre characteristics of the angora goat / J.H.Dreier, G. Marinowits / S. Afr. J. Agric. Sci. – 1967. – № 10. – P. 477-500.

References

1. Agabeyli A., Kuliev S. Osobennosti stroeniya kozhi i ikh znachenie v otsenke produktivnosti buivolits [Skin structure features and their importance in assessing the productivity of buffalo].

Sotsialnoe selkhozkoe khozyaistvo Azerbaidzhana [Social agriculture of Azerbaijan]. 1958, no.11, pp.35 - 38.

2. Ermakov V.E., Kazachenko R.Ya. Osobennosti gistomorphologicheskikh pokazatelei kozhnovolosaynogo pokrova I zhelezistogo apparata kozhi simmentalskogo I cherno-pestrogo skota [Features of histomorphological parameters of skin-hair and skin glandular apparatus of Simmental and black and white cattle]. Skotovodstvo v Zabaikalie i Amurskoi oblasti [Cattle breeding in the Trans-Baikal and the Amur region]. 1984, pp. 116 - 121.

3. Sokolov A.L., Sobolev O.V., Pozdnyakova V.F., Raven E.V. Izmenenie kozhno-volosyanogo pokrova remontnykh telok pri adaptatsii ikh k svobodno-vygulnomu soderzhaniu [Changing the skinhair replacement heifers during their adaptation to free-range]. Voprosy normativno-pravovogo regulirovaniya v veterinarii [Problems of legal regulation in veterinary medicine]. Sankt-Petersburg, 2010, no. 2, pp.37-39.

4. Tehver Y.T. [Histology of the skin Pets]. Tartu, 1971,112 p.

5. Dreier J.H., Marinowits G. Some observations on the skin histology and fibre characteristics of the angora goat. S. Afr. J. Agric. Sci., 1967, no.10, pp. 477-500.

Сведения об авторе:

Содномов Валерий Чимитович – кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры анатомии, гистологии и патоморфологии. Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова (670010, Россия, г. Улан-Удэ, ул. Пушкина 8, тел.

89149805510, е-mail:

walsod@mail.ru).

Information about the author:

Sodnomov Valerii Chimitov – Ph.D. in Veterinary, assistant professor, Buryat State Agricultural Academy n.a. V.R. Filippov (8, Pushkina st., Ulan-Ude, 670010, Russia, phone. 89149805510, email: walsod@mail.ru)

–  –  –

Представлены данные количественного определения серебра в периферической крови и фекалиях коров, инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) после внутривенного и внутримышечного введения нового серебросодержащего соединения “Аргобиоцина-2S”, обладающего противовирусной активностью, с помощью метода массспектрометрии (ICP-MS).Показано, что пробоподготовка цельной крови путем 100-кратного разбавления смесью, состоящей из 0.1% TritonХ 100, 0.1% HNO3и внутреннего стандарта индия, может служить альтернативным способом подготовки данного биологического материала. Полученные сведения о накоплении и сроках выведения серебра из организма позволяют судить об уровне и длительности циркуляции металла в организме после использования “Аргобиоцина-2S” (более 72 ч), оценить биологическую доступность препарата, подобрать эффективные дозу и курс лечения животных.

Ключевые слова: аналитические методы, метод масс-спектрометрии, пробоподготовка, cубстраты, ВЛКРС, “Аргобиоцин-2S”.

–  –  –

Submitted the quantitative determination of silver in peripheral blood and feces of cows infected with bovine leukemia virus (BLV) after intravenous and intramuscular injection of new introduction with the content of silver “Argobiocine-2S” having antiviral activity, using massspectrometry (ICP-MS). It is shown a sample preparation in blood by 100-fold the dilution mixture consisting of 0.1% Triton x 100, 0.1% HNO3 and internal standard of India as an alternative method of preparing this substrate for mass spectrometry method. The information on the accumulation and the timing of breeding of silver from the body allows judging about the level and duration of circulation of metal in the organism after injection “Argobiocine-2S” (over 72 h) and allows you to adapt the effective dose and course of treatment of animals.

Key words: analytical methods, mass-spectrometry methods, preparation of tests, substrates, ВLV, “Argobiocine-2S”.

Биологические свойства серебра и способы лечения инфекционных болезней у человека и животных с его помощью известны с древних времен. В медицинской практике препараты серебра продолжают использовать в качестве антибактериального, фунгицидного или противовирусного средства, так как серебро обладает низкой токсичностью и значительной дезинфицирующей активностью уже в минимальных дозах [7].

Вместе с тем вопросы фармакокинетики серебра в организме млекопитающих до настоящего времени раскрыты недостаточно, и прежде всего Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

по причине отсутствии простых и легко исполнимых методов его определения в биологических объектах.

В научной литературе имеются сведения о распределении и времени выведения серебра из организма после наружного использования его препаратов с лечебной целью у человека [4] и перорального применения с водой или после внутривенного введения его препаратов лабораторным животным [5]. При этом количественные исследования серебра в биологических субстратах от крупного рогатого скота, инфицированного вирусом лейкоза (ВЛКРС), после внутримышечного или внутривенного введения его водорастворимых соединений, в доступной литературе нами не обнаружены или такие исследования носят единичный характер.

Из современных аналитических методов выявления металлов (включая серебро) в биологических объектах млекопитающих в основном получили распространение различные модификации атомно-абсорбционной спектрофотометрии [9]. Однако одни из них сложны методикой пробоподготовки, другие мало приемлемы для исследований, связанных с оценкой здоровья животных после лечения, третьи дают значительную погрешность измерения.

Поэтому все чаще для оценки биологической и токсикологической роли тяжелых металлов во внешней среде, в организме человека и животных с целью индикации остаточных их количеств стал использоваться метод масс-спектрометрии (ICPMS), к преимуществам которого относят кратковременность анализа, низкие пределы обнаружения и высокую точность измерения [6].

Цель настоящей работы состоит в определении концентрации серебра в крови и фекалиях коров, инфицированных ВЛКРС, методом ICP-MSпосле инъекции “Аргобиоцина-2S”, обладающего противовирусной активностью.

Материалы и методы. Объектами для исследования являлись образцы цельной крови и фекалии от коров, инфицированных ВЛКРС, полученные после однократного внутривенного или внутримышечного введения “Аргобиоцина-2S”.

Это экспериментальное лекарственное соединение, представляющее собой химический комплекс серебра (40%) с природной аминокислотой цистином [3].

В фармакологическом опыте были использованы 6 коров в возрасте 4-7 лет.

Диагноз на лейкоз устанавливали с помощью серологического теста, основанного на выявления специфических антител к ВЛКРС в сыворотке крови с использованием реакции иммунодиффузии в агаровом геле. Животным под № 1, 2, 3 “Аргобиоцин-2S”вводили внутривенно однократно в дозе 0.5 мг/кг живого веса в 10 мл бидистиллированной воды, а животным под № 4, 5, 6 раствор данного соединения инъецировали внутримышечно в той же дозе.

Периферическую кровь и фекалии для исследования собирали соответственно в пластиковые пробирки и целлофановые пакеты до и через 3, 6, 12, 24, 48, 72 ч после введения экспериментального соединения. Кровь стабилизировалась добавлением динатриевой соли ЭДТА. Полученные биоматериалы до исследования хранили в замороженном состоянии (-20С).

Для прямого определения серебра в крови использовали квадрупольный масс-спектрометр Agilent 7500ce (США) с концентрическим кварцевым распылителем проб (400 мкг/мин), кварцевой распылительной камерой Скотта, Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

кварцевой горелкой с системой SheldTorch с перистальтической подачей растворов [9]. Калибровка масс-спектрометра проводилась смешанными стандартными растворами фирмы HIGH-PURITYSTANDARTS (CharlestonUSA) марки ICP-MS-68A-A (Al, As, B, Ba, Be, Bi, Ca, Cd, Ce, Co, Cr, Cs, Cu, Dy, Er, Eu, Fe, Ga, Gd, Ho, In, K, La, Li, Lu, Mg, Mn, Na, Nd, Ni, P, Pb, Pr, Rb, Re, Sc,Se, Sm, Sr, Tb, Th, Tl, Tm, U, V, Y, Yb, Zn – 9,88 ppb) и ICP-MS-68A-B (Ag, Ge, Hf, Mo, Nb, Sb, Si, Sn, Ta, Te, Ti, W, Zr – 9,91 ppb).

В виду того, что добавление к крови концентрированных кислот образуется осадок, и есть вероятность неполного извлечения серебра. Для частичного исключения этого подготовку крови для исследования мы проводили после ее разморозки, тщательного перемешивания и отбора точно измеренной кратной части объемом 50 мкл, помещали ее в 15 мл в пластиковые пробирки и разбавляли смесью, содержащей 0.1% раствор TritonX 100 (используется для гомогенизации биологических образцовпоскольку вызывает лизис клеток), 0.1% раствор HNO3и внутренний стандарт – индий (In-11.36 ppb) до объема 5 мл, после чего пробирки взвешивали, рассчитывали коэффициент разбавления (~100) [8]. Для выборочного контроля параллельно подготовку некоторых проб крови проводили универсальным методом мокрого озоления с использованием кислотных реагентов (концентрированной азотной кислотой с перекисью водорода) [1].

Образцы фекалий после размораживания, высушивания и измельчения взвешивали по 20 мг, помещали в пропиленовые пробирки объемом 15 мл, в которые вносили расчетное количество 70%-ной HNO3, так чтобы азотная кислота была в трехкратном избытке относительно количества навески. Затем для полного диспергирования твердых частиц и более полной экстракции металла пробирки устанавливали в стакан с кипятком и обрабатывали ультразвуком (ультразвуковая ванна BANDELINelectronicSONOREXRK 100) в течение 15 мин. Далее в эти пробирки вносили по 100 мкл 30%-ной перекиси водорода и проводили повторную обработку ультразвуком (15 мин). После охлаждения содержимое пробирок доводили до 14 мл дистиллированной водой и взвешивали, центрифугировали 10 минут при 4000 об/мин. К отобранным из надосадочного раствора вытяжкам (1.8 мл) добавляли рассчитанное количество 3%-ной HNO3 с внутренним стандартом индия, чтобы концентрация In составляла 10 ppb.

Аналогичным путем готовили пробы крови и фекалии от коровы, не участвующей в опыте (холостые проба), с последующим добавлением аттестованных растворов AgNO3 в диапазоне 0.5-300 ppb. По данным измерений на приборе строили калибровочные графики.

Результаты и обсуждение. В процессе подготовки крови методом разбавления тритоном, образования белкового осадка, как это происходило при использовании концентрированной азотной кислоты, не наблюдалось.

Построение калибровочных графиков, необходимых для количественной оценки серебра в крови и фекалиях, проводили по данным исследования на массспектрометре “холостых” проб материала с добавлением нитрата серебра в широком диапазоне концентраций. В результате были получены практически ровные калибровочные линии (R2~1). Для примера приводим калибровочный график, построенный на основе крови, который свидетельствует о Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

–  –  –

Вывод об отсутствии матричного эффекта крови не был изначально очевиден, поскольку известно, что серебро легко образует трудно растворимую соль AgCl, которая может выпасть в осадок. Вероятно серебро в крови коров, подготовленной методом разбавления тритоном, было каким-то образом стабилизировано, ибо при текущей концентрации хлорид-ионов в крови (0.9% NaCl), в случае водных растворов, осаждение AgСl началось бы с его концентрации 0.1 ppb (ПР AgCl = 1.78*10-10) [2], чего мы не отмечали. Это не наблюдалось и при подготовке образцов крови от экспериментальных животных после аппликации им “Аргобиоцина-2S”, в которой содержание исследуемого металла обнаруживалось на уровне сотен ppb (табл.). Вероятно серебро в составе “Аргобиоцина-2S”, которое химически связано с природной аминокислотой цистином, при введении в кровяное русло ведет себя иначе, чем обычно. Или возникающая связь серебряного комплекса с плазменными белками является обратимой, что можно отнести к положительным свойствам “Аргобиоцина-2S”, поскольку противовирусная эффективность препарата может находиться в зависимости от количества несвязанного серебра.

Расчт содержания серебра в биосубстратах от опытных животных был проведен по калибровочным графикам с учтом диапазонов величин аналитических сигналов в ppb. При формировании таблицы был осуществлен перевод значений ppb в мкг/л или мкг/кг, так как массовая доля 1 ppb равна 1 мкг/кг.

Результаты количественного исследования серебра в зависимости от Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

времени с момента обработки животных “Аргобиоцином-2S” являются усредненными величинами, исчислены по трем животным, значения которых в цельной крови и фекалиях представлены в приведенной ниже таблице.

–  –  –

Как следует из таблицы, в образцах крови, полученных от некоторых опытных животных до применения серебросодержащего соединения (фон), обнаружено серебро в следовых количествах (0.1 мкг/л), вероятно поступившее в организм с питьевой водой и кормом.

Максимальная концентрация подвижного серебра в крови коров после внутривенной инфузии “Аргобиоцина-2S” в дозе 0.5 мг/кг живого веса (oпыт 1) обнаруживалась при первом исследовании (через 3 ч) после введения препарата (240±20). Дальнейший анализ крови, полученной в промежутке от 6 до 72 ч после применения “Аргобиоцина-2S”, показывает постепенное уменьшение концентрации серебра в кровяном русле животных с 200±40 до 35±6 мкг/л.

Состояние подвижного серебра в крови после внутримышечного введения экспериментального препарата (oпыт 2) характеризовалось более медленной динамикой накопления его в кровотоке, чем после внутривенного введения.

Максимальное его значение приходилось на образец крови, полученной через 6 ч после инъекции “Аргобиоцина-2S”, и равнялось 46±8 мкг/л. С течением времени наблюдалось постепенное снижение концентрации серебра в крови за счет его элиминации и метаболизма. Исключением является кровь, полученная через 72 ч клинического опыта, в которой концентрация серебра составляла 16±4 мкг/л и была более чем в 2 раза выше концентрации в крови, взятой через 24 ч (6.9±1.5 мкг/л). В клинической фармакологии данное явление отмечается довольно часто и объясняется частым депонированием комплексных препаратов в тканях животного в месте инъекции и неравномерным высвобождением из депо.

В процессе выборочно-сравнительного исследования отдельных образцов Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

крови (1/3, 1/48 и 2/6 ч), подготовленных для определения серебра двумя методами, результаты по содержанию серебра в пробах при использовании концентрированных кислот,как и предполагалось, были несколько ниже (на 6.5В целом же, имея в виду известную относительную погрешность определения, они сопоставимы с данными исследования крови, подготовленной методом разбавления тритоном.

По данным таблицы, в фекалиях животных (oпыт 1) порядок распределения серебра соответствует его состоянию в крови. Максимальный его уровень наблюдался в первые часы после введения “Аргобиоцина-2S” (130±23 мкг/кг) и далее равномерно снижался до минимальной концентрации в течение трех суток (23.4±4 мкг/кг). В период между 12 и 24 ч отмечалось устойчивое количественное равновесие, когда серебро в фекалиях в течение полусуток определялась примерно на одинаковом уровне (63 и 60 мкг/кг). При этом концентрация металла, в сравнении с его долей в крови, за аналогичный период времени (oпыт 1), была на 35-45% меньше.

Определение серебра в фекальных массах коров, подвергавшихся внутримышечному введению “Аргобиоцина-2S” (oпыт 2), проводили аналогично предыдущему. Как следует из результатов исследования, накопление и истощение серебра в просвете кишечника проходило от минимального значения (2.4 мкг/кг), определенного через 3 ч после введения препарата, через максимальный уровень равный 10.2±4.5 мкг/кг, приходившийся на 12 ч, с постепенным снижением до значения 6.8±8 мкг/кг по истечении 72 ч.

Сопоставление данных обнаружения серебра, полученных в ходе фармакологического эксперимента, указывает на то, что до 50%находящегося в крови металла, за период наблюдения, может элиминироваться из организма коров через кишечный тракт. Кроме того, данные о циркуляции частиц серебра в крови и количестве выводимого металла с фекалиями из организма коров указывают на более низкую биологическую доступность “Аргобиоцина-2S”, вводимого внутримышечным путем, чем при внутривенном его использовании (в 4-5 раз). Вместе с тем, поступившее в организм в составе новой лекарственной формы количество серебра, в числе прочего, может быть достаточным для проявления противовирусного действия [3].

Выводы.1. При проведении ICP-MS анализа пробоподготовка крови методом прямого 100-кратного разбавления раствором 0.1% TritonX 100 + 0.1% HNO3 облегчает выявление серебра и дает более точные результаты.

2. Исследование биологических субстратов методом масс-спектрометрии показало, что циркуляция свободного серебра в организме крупного рогатого скота после применения “Аргобиоцина-2S” длится более на 72 ч в концентрациях, достаточных для проявления противовирусного действия.

3. Биологическая доступность “Аргобиоцина-2S” при внутривенном введении выше в 4-5 раз, чем после внутримышечного использования.

Мы благодарим сотрудников лаборатории элементного анализа Лимнологического института СО РАН к.х.н. Е.П. Чебыкина и инженера К. Рахматуллину за методическую и аналитическую помощь.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

Список литературы

1. Бок Р. Методы разложения в аналитической химии / Р. Бок – М.: Химия. – 1984. – 428 с.

2. Лурье Ю.Ю. Справочник по аналитической химии / Ю.Ю. Лурье – М.: Химия. – 1971. – 454 с.

3. ПатентRU 2277908.

4. Andersen K. Determination of silver in biological samples using graphite furnace atomic absorption spectrometry based on Zeeman effect background correction and matrix modification / K.J.

Andersen, A.Wikshaland, A. Utheim, K. Julshamn, H. Vik// Clinical Biochemistry, 1986. – Iss. 3. – P.

166-170.

5. Ernst E. Ultra structural localization of silver in testis and organ distribution of radioactive silver in the rat / E. Ernst, J. Rungby, E. Baatrup// J. Appl. Toxicol. – 1991. – Vol. 11(5). – P. 317-321.

6. Forrer R. Simultaneous Measurementof the Trace Elements Al, As, B,Be, Cd, Co, Cu, Fe, Li, Mn, Mo,Ni, Rb, Se, Sr, and Zn in HumanSerum and Their ReferenceRanges by ICP-MS / R. Forrer, K.

Gautschi, H. Lutz // Biological Trace Element Research. – 2001. – Vol. 80. – P. 77-93.

7.Loeschner K. Distribution of silver in rats following 28 days ofrepeated oral exposure to silver nanoparticles orsilver acetate /K. Loeschner, N. Hadrup, K. Qvortrup, A. Larsen, X. Gao, U. Vogel, A.

Mortensen, H.L. Lam, E.H. Larsen // Particle and Fibre Toxicology. – 2011. – 8:18.

8.Roberts F.J.A preliminary clinical investigation into the potential of blood lead levels to measure bone resorption in patients with skeletal metastases, using ICP-MS / F.J. Roberts, L. Ebdon, S.J. Hill // J. Trace Elem. Med. Biol. – 2000. – Jun, 14(2). – P. 108-115.

9.Wan A., Conyers R., Coombs C., Masterton J. Determination of Silver in Blood, Urine, and Tissues of Volunteers and Burn Patients / A. Wan, R. Conyers, C. Coombs, J. Masterton // Clin. Chem.

–1991. – Vоl. 37/10. – P. 1683-1687.

References

1. BokР.Metodyrazloghenia v analiticheskoyhimii [Methods of decomposition in analytical chemistry]. Moscow, 1984, 428 p.

2. Lurye U.U. Spravochnikpoanaliticheskoyhimii [The directory in analytical chemistry].

Moscow, 1971, 454 p.

3. Patent RU2277908.

4. Andersen K.J., Wikshaland A., Utheim A., Julshamn K., Vik H. Determination of silver in biological samples using graphite furnace atomic absorption spectrometry based on Zeeman effect background correction and matrix modification. Clinical Biochemistry, 1986, Iss. 3, pp. 166-170.

5. Ernst E., Rungby J., Baatrup. E. Ultra structural localization of silver in testis and organ distribution of radioactive silver in the rat. J. Appl. Toxicol., 1991, vol. 11(5), pp. 317-321.

6. Forrer R., Gautschi K., Lutz H. Simultaneous Measurement of the Trace Elements Al, As, B, Be, Cd, Co, Cu, Fe, Li, Mn, Mo, Ni, Rb, Se, Sr, and Zn in Human Serum and Their Reference Ranges by ICP-MS. Biological Trace Element Research, 2001, vol. 80, pp. 77-93.

7.Loeschner K., Hadrup N., Qvortrup K., Larsen A., Gao X., Vogel U., Mortensen A., Lam H.L., Larsen E.H. Distribution of silver in rats following 28 days of repeated oral exposure to silver nanoparticles or silver acetate.Particle and Fibre Toxicology, 2011, 8:18.

8.Roberts F.J., Ebdon L., Hill S.J. A preliminary clinical investigation into the potential of blood lead levels to measure bone resorption in patients with skeletal metastases, using ICP-MS. J Trace Elem Med Biol., 2000, Jun. 14(2), pp. 108-115.

9.Wan A., Conyers R., Coombs C., Masterton J.Determination of Silver in Blood, Urine, and Tissues of Volunteers and Burn Patients.Clin. Chem., 1991, vol. 37/10, pp. 1683-1687.

Сведения оба вторах:

Тихонов Валерий Лаврентьевич – кандидат ветеринарных наук, директор. Иркутский филиал Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока

Россельхозакадемии (664005, Россия, г. Иркутск, ул. Боткина, 4; тел. 8(3952)394913, e-mail:

nivstvl@rambler.ru).

Тихонов Дмитрий Валерьевич – младший научный сотрудник. Иркутский филиал Института Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии (664005, Россия, г. Иркутск, ул. Боткина, 4; тел. 8(3952)394913, e-mail: nivstvl@rambler.ru).

Information about the authors:

Tikhonov Valery Lavrentievich – Ph.D. in Veterinary Sciences, director. Irkutsk filiation “Institute of Experimental Veterinary of Siberia and Far East” Russian Academy of Agriculture (4, Botkin str., Irkutsk, Russia, 664005, phone. 8(3952)394913, e-mail: nivstvl@rambler.ru).

Tikhonov Dmitry Valerievich – senior researcher, Irkutsk filiation. “Institute of Experimental Veterinary of Siberia and Far East” Russian Academy of Agriculture (4, Botkin str., Irkutsk, Russia, 664005, phone. 8(3952)394913, e-mail: nivstvl@rambler.ru).

УДК 619:616.33/34

АНТИМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА ТРАМЕТИН В

ОТНОШЕНИИ ИЗОЛЯТОВ ЭНТЕРОГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ

КИШЕЧНОЙ ПАЛОЧКИ СЕРОТИПА О157:Н7 В.А. Чхенкели, А.Е. Калинович Иркутская государственная сельскохозяйственная академия, г. Иркутск, Россия В работе представлены данные мониторинговых исследований по диагностике энтерогеморрагической кишечной палочки (ЭГКП) серотипа О157:Н7 у крупного рогатого скота в хозяйствах Иркутской области. Впервые авторами использовался иммунохроматографический метод исследования с применением тест-систем “E. coli О157:Н7 Тест” производства Novated Ltd (Израиль). Установлено, что штаммы ЭГКП, выделенные от больных телят, обладают множественной резистентностью к современным лекарственным средствам, используемым для лечения колибактериоза в хозяйствах региона.

Экспериментально in vitro впервые показано, что 62.9% штаммов являются чувствительными к новому ветеринарному препарату траметин, получаемому с использованием методов биотехнологии на основе гриба – ксилотрофа Trametes pubescens (Shumach.:Fr.) Pilat.

Ключевые слова: энтерогеморрагическая кишечная палочка, антимикробная активность, чувствительность, устойчивость.

ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF TRAMETIN AGENT IN RESPECT OF ISLOATED

CPMPOUNDS ENTEROHEMORRGIC ESCHRICHIA COLI OF О157:Н7 SEROTYPE

Chkhenkeli V.А., Kalinovich А.Е.

Irkutsk State Academy of Agriculture, Irkutsk, Russia The article represents data of monitoring research on enterohemorrgic eschrichia coli of O157:H7 serotype (EES) diagnosis among cattle in major housholds of Irkutsk region. For the first time the authors used immune-chromatographic research method with appliance of test-system “E.

coli O157:H7 Test” produced by Novated Ltd (Israel). It is found that EES strain extracted from sick calves obtains multiple resistances to modern medicine used for colibacillosis treatment in households of the region. During the experiment it was shown that 62.9% of stains are sensitive to new veterinary agent trametin which is produced with a usage of biotechnological methods with a bottom of xylotroph fungus Trametes pubescens (Shumach.:Fr.) Pilat.

Key words: enterohemorrgic eschrichia coli, antibacterial activity, sensitiveness, stability.

Острые желудочно-кишечные заболевания новорожденных телят наносят большой экономический ущерб в хозяйствах России, в том числе и в Иркутской Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

области [11, 15, 17]. Этиология этих заболеваний в различных хозяйствах неоднозначна. Задача усложняется тем, что наряду с хорошо изученными возбудителями получили распространение энтерогеморрагические серотипы эшерихий, выявление и диагностика которых в настоящее время в ветеринарии не получила широкого распространения, как в медицине [13]. Наиболее распространенным и значимым для здравоохранения серологическим вариантом ЭГКП является серовар О157:Н7.

Цель работы – в проведении мониторинговых исследований по диагностике ЭГКП серотипа О157:Н7 у крупного рогатого скота в хозяйствах Иркутской области, изучении возможности использования ветеринарного препарата траметин, получаемого методом жидкофазной ферментации на основе грибаксилотрофа T. pubescens (штамм 0663), в системе борьбы с колибактериозом, этиологическим фактором которого является ЭГКП серотипа O157:H7.

Материалы и методы. Объектами исследования являлись животные различных возрастных групп: 93 животных с молочно-товарной фермы производственного отдела НИИСХ Россельхозакадемии, 105 животных с МТФ СХ ОАО “Белореченское”. Для проведения мониторинговых исследований для экспресс-оценки антигена ЭГКП О157:Н7 в фекалиях крупного рогатого скота разного возраста на молочно – товарных фермах производственного отдела НИИСХ Россельхозакадемии и СХ ОАО “Белореченское” использовали тестсистемы “E. coli О157:Н7 Тест” производства Novated Ltd (Израиль) [10].

Определение чувствительности/устойчивости выделенных культур ЭГКП к антимикробным препаратам проводили общепринятым методом диффузии в агар с использованием наборов для определения чувствительности/устойчивости энтеробактерий к антимикробным препаратам производства НИЦФ (г. С.Петербург). В эксперименте определяли также чувствительность/устойчивость выделенных штаммов к препарату траметин, разработанному в Иркутском филиале Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии в лаборатории биотехнологии и болезней молодняка (зав.

лаб. – д.б.н. В.А. Чхенкели).

Результаты и обсуждение. Предлагаемые сегодня молекулярногенетические методы исследования (ПЦР), метод ИФА являются современными и высокоточными для выявления ЭГКП [1-5]. Однако могут использоваться весьма ограниченно: в крупных диагностических центрах ветеринарного профиля. Эти методы исследования используются для ветеринарных исследований в регионе только в ФГБУ ”Иркутская межобластная ветеринарная лаборатория”.

Анализ литературы и собственные экспериментальные данные позволили констатировать, что наиболее приемлемым в ветеринарной практике является усовершенствованный метод выделения и идентификации E. coli O157:H7 из биологического материала от сельскохозяйственных, домашних животных и птицы, предложенный И.С. Онищенко с соавт. [13]. Предложенная схема выделения и идентификация E. coli О157:H7 из биологического материала позволяет в течение 56 ч исследовать биологический и патологический материал от животных-бактерионосителей E. coli О157:H7. Однако такие сроки исследования представляются длительными.

Научно-практический журнал “Вестник ИрГСХА”. Выпуск 57

ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНА. ЗООТЕХНИЯ

В медицине для выделения и идентификации ЭГКП серотипа O157:H7 используется метод, разработанный Федеральным центром Госсанэпиднадзора Минздрава России [12], cущность которого заключается в использовании особенностей биохимических свойств данного микроорганизма. Основным недостатком данного метода, затрудняющим его применение в ветеринарии, является различие микробного состава нормофлоры кишечника животных и человека, что не позволяет в качестве первичной среды использовать сорбитолагар.

Сегодня альтернативой ИФА является использование быстрых иммунохроматографических тестов. Их чувствительность и специфичность близки к соответствующим показателям наборов для ИФА. При этом экспресстесты выполняются быстро (как правило, не более чем за 15 мин.). Проведение анализа и интерпретация результата очень просты. Для проведения анализа не требуется специальное оборудование. Очень важно, что анализ может быть проведен непосредственно в очаге инфекции, что позволяет избежать потери времени на транспортировку образца в лабораторию. В результате проведнных нами исследований было выделено 35 штаммов ЭГКП О157:Н7.



Pages:     | 1 || 3 | 4 |
Похожие работы:

«МОЛОТОВСКИЙ ОБЛАСТНОЙ ОТДЕЛ ИСКУССТВ УРОЖАЕМ— ПО ВРАГУ О Г ИЗ МОЛОТОВСКОЕ ОБЛАСТНОЕ ИЗДАТЕЛЬСТВО МОЛОТОВСКИЙ ОБЛАСТНОЙ ОТДЕЛ ИСКУССТВ УРОЖАЕМ— ПО ВРАГУ! urviacгная' Библиотека имени Мак. имл Горьяогэ Ч 3 5 5.54Z,№ 13А Ab‘ Zrр. i -zok. t ОГИ3 МОЛОТОВСКОЕ ОБЛАСТНОЕ ИЗД...»

«БОГОСЛОВСКИЕ ТРУДЫ, XI ПУБЛИКАЦИИ В ПОХВАЛУ ПРЕПОДОБНОМУ СЕРГИЮ, ИГУМЕНУ РАДОНЕЖСКОМУ, ВСЕЯ РОССИИ ЧУДОТВОРЦУ (В связи с 550-летием прославления, 1422—1972) Славится Русская земля своими святыми угодниками, и среди них особое место занимает Преподоб...»

«Электронное научное издание Альманах Пространство и Время. Т. 4. Вып. 1 • 2013 Специальный выпуск СИСТЕМА ПЛАНЕТА ЗЕМЛЯ Electronic Scientific Edition Almanac Space and Time vol. 4, issue 1 Special issue 'The Earth Planet System' Elektronische wissenschaftliche Auflage Almabtrieb ‘Raum und Zei...»

«85 УДК 582.998.2 ПРОДУКТИВНОСТЬ SOLIDAGO CANADENSIS L. (ASTERACEAE) В УСЛОВИЯХ СТАВРОПОЛЬСКОЙ ВОЗВЫШЕННОСТИ Е. В. Пещанская Государственное научное учреждение "Ставропольский ботанический сад им. В. В. Скрипчинского" СНИИСХ Россельхозакадемии г. Ставропо...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РФ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "КУБАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" ФАКУЛЬТЕТ ВОДОСНАБЖЕНИЯ И ВОДООТВЕДЕНИЯ Рабочая пр...»

«П.Ба КГБПОУ "Балахтинский аграрный техникум" лахта РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ ПО ОБЩЕСТВОЗНАНИЮ для студентов II курса Раздел I. Человек и общество Преподаватель: Матвиенко Антонина Сергеевна СТУДЕНТ_ Группа П.Балахта2017 Обществознание как учебный курс 1.Общ...»

«Чайкин Константин Олегович СЕМЕНОВОДСТВО ГИБРИДОВ F1 КАБАЧКА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЭТРЕЛА В УСЛОВИЯХ КРАСНОДАРСКОГО КРАЯ Специальность: 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени канди...»

«Ревокатова Анастасия Петровна КРАТКОСРОЧНЫЙ ПРОГНОЗ КОНЦЕНТРАЦИИ УГАРНОГО ГАЗА В АТМОСФЕРЕ МОСКОВСКОЙ АГЛОМЕРАЦИИ 25.00.30 – метеорология, климатология, агрометеорология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата географических наук МОСКВА 2013 Работа выполнена на кафедре...»

«Проект Республика Крым Красноперекопский район Администрация Орловского сельского поселения ПОСТАНОВЛЕНИЕ от 2015 г. с. Орловское № _ Об утверждении Правил землепользования и застройки Орловского сельского поселения Красноперекопского района Республики Крым...»

«ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "ЮЖНЫЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" И.К. ЦЫБРИЙ ОСНОВЫ АВТОМАТИЧЕСКОГО УПРАВЛЕНИЯ (учебное пособие) Ростов-на-Дону Рецензенты: профессор, д. ф.-м. н Селезнев М....»

«О.В. Новоселова Тверская государственная сельскохозяйственная академия, г. Тверь ФУНКЦИОНАЛЬНО-СЕМАНТИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ КОММУНИКАТИВНОЙ СПРАВЕДЛИВОСТИ / НЕСПРАВЕДЛИВОСТИ МЕНАСИВНЫХ ВЫСКАЗЫВАНИЙ FUNCTIONAL AND SEMANTIC CRITERIA OF...»

«РОЛЬ БЕЛОРУССКОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ БИБЛИОТЕКИ В ИНФОРМАЦИОННОМ ОБЕСПЕЧЕНИИ АГРАРНОГО ОБРАЗОВАНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ О.А. Сивурова, магистр гуманитарных наук, заведующая отделом Центр ФАО Белорусской сельскохозяйственной библиотеки им. И.С. Лупиновича В 1848 г. в Российской империи, в соста...»

«Маргарита Борисовна Нерода Декоративные кролики Издательство: Вече, 2008 г. ISBN 978-5-9533-3115-9 Введение Интерес к кроликам не только как к источнику ценного меха и мяса, но и как к домашним питомцам возник не вчера. В сельскохозяйственных журналах – таки...»

«Эйлер и теория чисел А. А. Карацуба Здесь излагается расширенное содержание доклада, прочитанного автором на конференции, посвященной 300-летию со дня рождения Л. Эйлера (Математический институт им. В. А. Стеклова, 17 мая 200...»

«SPOECZESTWO I EDUKACJA Midzynarodowe Studia Humanistyczne Nr 2/2012 [s. 313-327] Р.А. Смирнова Концепция устойчивого развития села: в поисках новой парадигмы The concept of sustainable development of rural areas: in search of a new paradigm Keywords: sustainable rural development, Belarus Беларусь осуществила в процесс...»

«ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "ОРЕНБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" Кафедра "Физика" Методические рекомендации для самостоятельной работы обучающихся по дисциплине Современна...»

«РЕСПУБЛИКА КРЫМ ЛЕНИНСКИЙ МУНИЦИПАЛЬНЫЙ РАЙОН СЕЛЬСКИЙ СОВЕТ КАЛИНОВСКОГО СЕЛЬСКОГО ПОСЕЛЕНИЯ 16 заседание 1 созыва РЕШЕНИЕ № 126 22 октября 2015 г с.Калиновка Об утверждении

«УДК 636.4:519.6:59 соляник в.в. РУП "Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси по животноводству", г. Жодино, Республика Беларусь соляник с.в. УО "Гродненский государственный аграрный университет", г. Гродно, Республика Беларусь компьютерНое моделироваНие измеНеНия морфо-биохимических показателей кр...»

«Сефербеков Р.И., Караханов С.С. УДК 93/94 Р.И. Сефербеков, С.С. Караханов Мифологические персонажи лезгин Карчагской долины: синкретизм традиционных верований и ислама1 ФГБУН "Дагес...»

«Материалы конференции, посвященной 95-летию со дня рождения академика А.А. Никонова консультационных служб, оказывающих услуги для предприятий и организаций АПК, используя при этом потенциал аграрных образовательных учр...»








 
2017 www.net.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные матриалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.