WWW.NET.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Интернет ресурсы
 

Pages:     | 1 | 2 ||

«А.И.Зинченко, Д.А.Паруль Основы молекулярной биологии вирусов и антивирусной терапии Минск МГЭУ ББК УДК 578:615.281 Авторы: Профессор кафедры биохимии и биофизики, чл.-корр. НАНБ Зинченко ...»

-- [ Страница 3 ] --

Наиболее постоянными симптомами (помимо желтушности склер и кожных покровов) являются общая астения, лихорадка, тошнота, увеличение и болезненность печени, потемнение мочи и обесцвечивание кала.

Летальность острого гепатита В составляет 1-4%. Примерно 10% случаев переходит в хроническую форму, около 25% из которых становится непосредственной причиной смерти (от самого гепатита В, цирроза и рака печени). Причины развития хронического процесса окончательно не установлены. Считается, что, прежде всего, это связано с наличием у больного нарушений в клеточном звене иммунитета и с низкой продукцией интерферона. При этом существует общая закономерность – чем в более раннем возрасте человек инфицируется вирусом, тем больше вероятность развития хронического гепатита.

Этиотропная терапия и профилактика. Средства специфической лекарственной терапии в настоящее время находятся в стадии разработки и лечение в основном симптоматическое. Отмечен положительный эффект от применения -интерферона и противовирусных препаратов (азидотимидин, ламивудин и др.). Однако, лечение хронического гепатита В интерфероном и модифицированными нуклеозидами на сегодня недоступно подавляющему большинству больных из-за очень высокой стоимости препаратов.

К сожалению, на терапию интерфероном отвечают менее 50% пациентов. При этом такая терапия сопряжена с риском развития побочных эффектов (психозов, поражений щитовидной железы и др.).

Показано, что хронически циркулирующий ВГВ способен подавлять ламивудин – нуклеозидный аналог, применяющийся для лечения ВИЧинфицированных. В настоящее время препарат интенсивно изучается, и рассматривается возможность его комбинированного применения с интерфероном. По последним данным сочетанное применение ламивудина с интерфероном в течение 1 года вызывает высокий (93%) уровень вирусологического и биохимического ответа по окончании терапии, однако уровень устойчивого ответа (спустя год) остается пока низким – 14%.



Более впечатляющие результаты достигнуты при решении проблемы вакцинопрофилактики.

Создание вакцины против гепатита В - одно из важнейших завоеваний человечества. Основой вакцины служил поверхностный антиген вируса гепатита В, поскольку было установлено, что лица, имеющие антитела к нему, повторно не заболевают. Источником антигена являлись сыворотка или плазма крови носителей HBsAg. Антиген очищали, подвергали инактивации, адсорбировали на гидроокиси алюминия и использовали в качестве вакцинного препарата. По источнику получения антигена такие вакцины обозначали как "плазменные". Эти вакцины обладали высокой иммуногенностью и были эффективны, однако имели существенный недостаток. Несмотря на то, что не было зарегистрировано ни одного случая заражения гепатитом В от введения вакцины, существовал теоретический риск возможного попадания ВГВ в готовую серию вакцины, так как она изготавливалась из заведомо зараженного материала. Открытие ВИЧ добавило опасений, связанных и с этим вирусом. Кроме того, прогресс молекулярной биологии позволил приступить к созданию вакцин против гепатита В нового поколения - рекомбинантных. Общая схема их получения включает следующие этапы: из молекулы ДНК ВГВ выделяют ген, отвечающий только за синтез HBsAg, который вводят в клетки Saccharomyces cerevisiae. Клетки дрожжей начинают синтезировать антиген, который очищают от балластных белков и используют в качестве вакцинного препарата. Благодаря высокой иммуногенности и чрезвычайно низкой реактогенности, рекомбинантные вакцины (напр., Рекомбивакс В и Энджерикс В) широко используются во всем мире.





Сейчас разрабатываются наиболее рациональные стратегия и тактика вакцинопрофилактики. Во многих странах вакцинации подлежат новорожденные, родившиеся от матерей, инфицированных ВГВ, медицинские работники – хирурги, стоматологи, акушеры-гинекологи и др.

персонал, деятельность которого связана с кровью и различными биосубстратами. Кроме того, для профилактики используют специфический гипериммунный иммуноглобулин. Его введение показано (напр., половым партнерам) не позднее чем через 48 ч после вероятного заражения.

6.2.4. Вирусный гепатит D

Возбудитель гепатита D (ВГD) – дефектный вирус (cателлит), способный репродуцироваться в организме хозяина только при обязательном участии вируса-помощника, роль которого играет ВГВ. Поэтому ВГD выделяют только от пациентов, инфицированных ВГВ. ВГD не имеет собственной оболочки; её формирует поверхностный антиген ВГВ – HbsAg (см. рис. 6.5).

Геном ВГD представлен одноцепочечной РНК, которая кодирует синтез вирусного антигена (HDAg) и не имеет гомологии с ДНК вирусапомощника.

Геном ВГD представляет собой химерную молекулу со свойствами сателлитного вируса и вироида. Вироид напоминает ковалентно-замкнутая молекула РНК размером около 1700 нуклеотидов, палочковидной конфигурации. Около 70% нуклеотидов РНК входят в состав УотсонКриковских комплементарных пар. Геном ВГD - это самый маленький геном среди всех вирусов животных. В пределах группы вирусов V он помещен в свою собственную таксономическую ячейку (Deltavirus), где должны находиться вирусы, содержащих негативную РНК.

Инфекционная частица ВГD:

Инфекционная частица ВГВ:

40 нм оболочка + поверхностный 40 нм оболочка + поверхностный антиген ВГВ;

антиген ВГВ;

19 нм нуклеокапсид, образованный 27 нм нуклеокапсид, содержащий дельта-антигеном и содержащий обратную транскриптазу и ДНК геномную РНК ВГD.

ВГВ.

Рис. 6.5. Схематический состав вирионов ВГВ и ВГD.

ВГD довольно термоустойчив и не теряет инфекционности даже при УФ-облучении.

ВГD встречается повсюду, хотя основной ареал его распространения – Северная Америка и Северо-Запад Европы. Заподозрить гепатит D можно на основании характера клинической картины гепатита В с необычно тяжелым и затяжным течением, поскольку установлено, что суперинфекция ВГD резко утяжеляет течение и исходы гепатита В. Так, у 60-70% пациентов со смешанной инфекции наблюдается развитие цирроза печени.

Скоротечный гепатит (смертность около 80%) встречается в 10 раз чаще при смешанной инфекции по сравнению с инфицированием только ВГВ.

Механизм передачи ВГD – через кровь – аналогичен таковому для ВГВ. Иммунитет после перенесенного заболевания нестойкий.

ВГD, в отличие от ВГВ, обладает прямым цитотоксическим действием.

На протяжении всего репликативного цикла ВГD не обнаружено никаких ДНК-содержащих интермедиатов. Полагают, что РНК ВГD реплицируется при помощи хозяйской РНК-полимеразы по т.н. механизму «катящегося кольца». В результате образуются длинные катеннаты, которые для приобретения инфекционности должны быть расщеплены на куски, соответствующие по длине вирусному геному. Разрыв производится рибозимным доменом, который входит в состав самой РНК ВГD. Следует отметить, что это - единственный случай, когда рибозимной активностью обладает геном вируса животных.

Однако, в отличие от других вироидов, в репликативном цикле ВГD имеется мРНК (см. рис. 6.6), но которой синтезируется белок – дельтаантиген. Как полагают некоторые исследователи, дельта-антиген необходим для репликации РНК, а также играет какую-то роль в сборке и высвобождении вирионов из клетки.

–  –  –

Рис. 6.6. Формы вирусспецифических РНК, присутствующие в клетках, инфицированных ВГD.

Недавно идентифицирован клеточный белок, который по первичной структуре очень напоминает дельта-антиген ВГD. Эта находка позволила предположить, что ВГD произошел от вироида, который когда-то «захватил»

клеточный РНК-транскрипт.

Терапия и профилактика. Специфические методы борьбы с ВГD пока не разработаны. Однако, поскольку ВГD не способен репродуцироваться в отсутствии ВГВ, то основные лечебные и профилактические мероприятия должны быть направлены на борьбу с вирусом-помощником.

6.2.5. Вирусный гепатит С

Этиология. Вирус гепатита С (ВГС) – мелкий (30-60 нм) РНКсодержащий вирус, относящийся к сем. Flaviviridae. Геном вируса представлен однонитевой (+)РНК, которая одновременно является и мРНК. В геноме ВГС всего один ген, который кодирует структуру 9 белков. Ранее он носил название «вирус парентерально-трансмиссивного ни А, ни В гепатита». Занимая скромную роль среди других гепатитов (около 15%), ВГС обладает наиболее высокой склонностью к хронизации.

Вирус устойчив к нагреванию до 50оС, но инактивируется органическими растворителями и УФ-облучением. Во внешней среде нестоек.

К структурным белкам ВГС (рис. 6.7) относятся нуклеокапсидный белок С (core protein) и оболочечные (envelop) гликопротеиды – Е1 и Е2.

Идентифицированы и пять неструктурных белков ВГС. Белки внешней оболочки Е1 и Е2 являются гипервариабельными.

Рис. 6.7. Схема структуры ВГС.

Существуют 6 основных типов ВГС, которые на основании данных п первичной структуре РНК подразделяют на несколько подтипов. Типы 1-3 ответственны за все случаи инфекции в Европе, тип 4 превалирует в Египте и Заире, тип 5 – в Южной Африке, тип 6 – в Гон-Конге.

Эпидемиология ВГС во многом сходна с характерной для ВГВ.

Основное отличие – более низкая способность ВГС к передаче от беременной плоду и при половых контактах. Частота заболеваемости в большинстве стран колеблется от 1 до 4,9%. Чаще всего заражение ВГС происходит при переливании крови и её препаратов. От гепатита С во всем мире страдают по меньшей мере 200 млн человек. Только в США в год регистрируется от 8 до 10 тыс. смертей от последствий инфекции ВГС.

По данным ВОЗ, сегодня ВГС инфицировано в среднем 1% населения, в т.ч. в России более 1 млн. человек.

Гепатит С, подобно гепатиту В, имеет повсеместное, но не равномерное распространение. В США ежегодно регистрируется от 150 до 175 тыс. новых случаев гепатита С, в Западной Европе – 170 тыс., в Японии – более 350 тыс. заболеваний. Частота обнаружения маркеров ВГС (среди доноров крови) варьирует от 0,2% в странах Северной Европы до 1,2% в Южной Европе, 3-6% в Японии и 10-20% в странах Африканского континента. В России этот показатель составляет 1-5%.

По понятны причинам, уровень инфицированности среди медицинских работников в среднем в 3-5 раз выше, чем среди обычного населения.

В распространении гепатита С на разных территориях важная роль принадлежит экологическим факторам. Как и в отношении гепатита В, это подтверждает анализ последствий аварии на Чернобыльской АЭС. Так, в экологически неблагополучной Гомельской области Беларуси частота выявления антител к ВГС среди взрослого населения составляет 5,4%, что в 8 раз превышает аналогичный показатель среди лиц, постоянно проживающих на «чистых» территориях (0,7%).

Патогенез. Гепатит С считается наиболее коварным и опасным среди всех вирусных гепатитов. Более того, по опасности гепатит С сравним с «чумой ХХ века» СПИДом.

Значительная часть поражений протекает субклинически, однако у 80заболевших развивается хронический гепатит, что приводит к фатальным осложнениям – циррозу и карциноме печени (см. рис. 6.8).

Инкубационный период составляет от 35 до 85 дней. Острая стадия гепатита С обычно протекает легко, нередко без желтухи, в связи с чем своевременная диагностика заболевания значительно затруднена. Надежный диагноз может быть поставлен только с помощью ПЦР. Острая стадия может заканчиваться полным выздоровлением. Однако у большинства больных развивается хронический гепатит с последующей эволюцией в первичный рак печени.

После проникновения в организм человека ВГС реплицируется преимущественно в гепатоцитах. Кроме того, по современным представлениям, он может реплицироваться (как и ВГВ) в клетках периферической крови.

Рис. 6.8. Естественное течение гепатита С.

ВГС обладает слабой иммуногенностью, что определяет замедленный, неинтенсивный Т-клеточный и гуморальный ответ иммунной системы на инфекцию. Лишь через 2-10 недель от начала заболевания в крови больных начинают определяться антитела к ядерному антигену. Однако они обладают слабым вируснейтрализующим действием. Антитела же к неструктурным белкам ВГС в острой фазе инфекции вообще не выявляются. Зато в крови в течение острой стадии болезни (и при реактивации хронической) определяется присутствие РНК вируса. Причиной слабой иммуногенности ВГС, не приводящей к выработке неполноценного протективного иммунитета, является не имеющая прецедентов гетерогенность ВГС.

Еще раз подчеркнем, что из-за быстро меняющегося «антигенного лица», приводящего к формированию т.н. «квазивидов», антитела не узнают и соответственно не могут уничтожать вирус. В результате вирус ускользает из-под иммунного контроля и постепенно разрушает печень.

Особенностью гепатита С является тот факт, что наиболее часто это заболевание протекает практически без каких-либо ярко выраженных проявлений или с минимальными жалобами на повышенную утомляемость, слабость, снижение аппетита, чувство тяжести в правом подреберье. Не случайно ВГС называют «ласковым» убийцей.

Передача вируса возможна при нанесении татуировки, использовании общих с больным предметов личной гигиены – зубной щетки, бритвы, ножниц и т.д. У 50% инфицированных ВГС источник заражения установить не удается.

Очень часто и острый и хронический гепатит С протекают бессимптомно, из-за чего инфицированные люди вовремя не обращаются за медицинской помощью и могут заражать окружающих.

Лечение. Достижения в терапии гепатита С выглядят пока достаточно скромно.

Лечение гепатита С является одной из наиболее сложных проблем современной клинической медицины. Ежегодно во всех развитых государствах расходуются огромные средства, направленные на поиск путей повышения эффективности и разработку новых схем терапии гепатита С.

Основным действительно эффективным препаратом для терапии гепатита С долгое время являлся рекомбинантный интерферон альфа-2b. Однако, его применение (в принятых дозах - 3 млн ед.

3 раза в неделю в течение 6 мес.) связано с большим количеством проблем:

• высока стоимость препарата;

• большой процент рецидивов заболевания после отмены терапии (устойчивый ответ в лучшем случае у 20-28% больных; у пожилых людей – 10%);

• резистентность к препарату;

• выраженные побочные эффекты, в ряде случаев вызывающие необходимость его отмены;

• иньекционная форма введения, что при длительных курсах лечения создает серьезный дискомфорт для пациента.

С 1998 г., благодаря комбинации интерферона с виразолом, эффективность терапии повышена до 40%. Курс лечения предусматривает введение 3 млн ед. интерферона + 1,0 г виразола 3 раза в неделю в течение 6 мес. Такая терапия приводит к снижению содержания РНК ВГС до неопределяемого уровня спустя 6 мес. после окончания лечения.

Комбинированный препарат интерферона--2b с виразолом носит название «Ребетрон» и выпускается фирмой Schering Corporation (CША).

Следует отметить, что монотерапия виразолом также приводит лишь к временному эффекту. Таким образом, только при использовании виразола в комбинации с интерфероном можно добиться высокой частоты устойчивого ответа при лечении гепатита С.

К сожалению, этиотропная терапия гепатита С очень дорогостояща, учитывая длительность курса и высокую стоимость интерферона и виразола.

Один курс лечения обходится в 2,5 тыс. долларов США.

В последнее время исследования германских ученых показали, что интерферон, примененный на ранней стадии заболевания гепатитом С – сразу после появления первых симптомов болезни – уничтожает все следы присутствия вируса в организме, т.е. эффективность лечения приближается к 100%.

К сожалению, применять такой метод лечения удается не часто, поскольку гепатит С очень трудно идентифицировать на ранней стадии.

Однако для тех, кто все-таки начнет лечение в течение первых 2-3 месяцев после инфицирования, интерферон дает возможность вылечиться с вероятностью практически 100%.

Информации о применении индукторов интерферона для лечения гепатита С в литературе нет.

Профилактика. В отличие от гепатитов А и В специфическая профилактика гепатита С в настоящее время отсутствует. Вакцина против гепатита С пока не создана, и по прогнозам экспертов, из-за гипервариабельности структурных белков ВГС, вероятность её получения в ближайшие годы невелика.

Ситуация усугубляется тем, что ВГС не способен размножаться в культуре клеток и что отсутствуют животные модели (кроме шимпанзе) для изучения и наработки ВГС.

Кроме того, особенностью ВГС является то, что он находится в сыворотке крови в низкой концентрации. Это затрудняет его тестирование, выделение и изучение.

Однако, по предварительным данным (пока не подтвержденным в ведущих лабораториях мира) исследователям Института вирусологии им.

Д.И.Ивановского РАМН удалось найти экспериментальную модель (культуру клеток головного мозга новорожденных мышей) для репликации ВГС. Разработанная in vitro модель хронической и острой инфекции ВГС открывает широкую перспективу для скрининга эффективных антивирусных препаратов, что естественно было немыслимо проводить на больных людях.

Итак, исследователи научились получать в больших количествах инфекционный ВГС, что должно помочь в создании штаммов, которые могут стать основой для получения вакцины против ВГС.

6.3. Герпетическая инфекция (herpes simplex) Герпетическая инфекция объединяет заболевания, обусловленные вирусом простого герпеса (ВПГ), которые характеризуются поражениями кожи, слизистых оболочек, ЦНС, а иногда и других органов.

6.3.1. Характеристика возбудителя Этиология. Возбудитель относится к сем. Herpesviridae. Это семейство включает около 100 представителей, из которых только 8 (табл. 6.3) поражают человека: вирусы простого герпеса 1 и 2 типов (ВПГ-1 и ВПГ-2), вирус ветряной оспы и опоясывающего лишая (varizella-zoster), цитомегаловирус, вирус Эпштейна-Барр, вирусы герпеса человека 6-го, 7-го и 8-го типов.

–  –  –

Значительная часть герпесвирусов способна вызывать острые и латентные инфекции, а также обладает определенным онкогенным потенциалом и вызывает развитие болезней злокачественного роста у животных (напр., болезнь Марека у цыплят), а также эпидемиологически связана с образованием некоторых опухолей у человека. Среди герпесвирусов наиболее известен ВПГ, вызывающий поражения практически у каждого человека.

Герпесвирусы относительно нестабильны при комнатной температуре, термолабильны и быстро инактивируются органическими растворителями и детергентами.

Представителей герпесвирусов отличает морфологическое сходство.

Размер вириона у ВПГ (схематическое строение представлено на рис. 6.9) колеблется от 100 до 160 нм. Для него характерна сферическая форма и уникальная 4-х слойная структура, включающая сердцевину, икосаэдрический капсид, внутреннюю белковую оболочку и внешнюю липидсодержащую оболочку. Сердцевина содержит линейную двухцепочечную ДНК. В состав вириона входит около 35 гликопротеидов, 7 из которых находятся на поверхности и вызывают образование вирусспецифических антител. По крайней мере 9 гликопротеидов входят в состав капсида. Несколько десятков белков (в т.ч. тимидинкиназа) являются неструктурными и образуются в ходе жизненного цикла вируса. По антигенной структуре ВПГ подразделяют на 2 типа. Геномы вирусов 1-го и 2-го типов на 50% гомологичны. ВПГ-1 поражает преимущественно респираторные органы. С ВПГ-2 в основном связано возникновение генитального герпеса и генерализованного герпеса новорожденных.

Рис. 6.9. Схематическое изображение структуры герпесвируса.

Эпидемиология. Герпетическая инфекция широко распространена. У 80-90% взрослых обнаруживают антитела к ВПГ. Источник инфекции – человек. ВПГ-1 обычно передается воздушно-капельным путем, при поцелуях или других контактах между слизистыми, в тоже время инфекция ВПГ-2 - обычно следствие сексуального контакта.

Возможна трансплацентарная передача вируса.

Обычно заражение ВПГ-1 происходит в самые ранние месяцы жизни, а ВПГ-2 после начала половой жизни. Перинатальное заражение происходит при прохождении плода по родовым путям. Поражения появляются через 5суток после первого инфицирования. Инфицированные люди сохраняют серопозитивность пожизненно.

ВПГ не способен проникать через неповрежденную кожу, что обусловлено отсутствием рецепторов на клетках ороговевающего эпителия.

6.3.2. Патогенез

Воротами инфекции является кожа или слизистые оболочки.

Проникновение вируса в клетку-хозяина является сложным процессом и включает в себя прикрепление вириона к клеточным рецепторам с последующим слиянием оболочки с клеточной мембраной. Эндоцитоз не является обязательной, хотя и возможной, стадией.

Оказавшись в цитоплазме, капсид мигрирует через поры в ядро.

Вирионная ДНК выходит в нуклеоплазму, циклизуется и транскрибируется клеточной РНК-полимеразой по каскадному принципу: вначале синтезируются сверхранние, затем ранние и, наконец, поздние мРНК.

Образовавшиеся незрелые капсиды путем отпочковывания проникают сквозь ядерную мембрану в цитоплазму, где формируются зрелые вирусные частицы. При выходе вируса из клеток (спустя 24 ч после инфекции) клетки неминуемо погибают с образованием очагов некроза и местных воспалительных изменений в виде везикул.

Для синтеза сверхранних мРНК не требуется присутствия синтезированных de novo белков. На ранних мРНК синтезируются вирусспецифическая ДНК-полимераза и тимидинкиназа, необходимые для синтеза вирусной ДНК. Среди этих белков есть белки, индуцирующие транскрипцию поздних генов, кодирующих структурные белки.

Считается, что гликопротеиды герпесвируса, синтезирующиеся в инфицированных клетках, приводят к изменению их фенотипических свойств, т.е. к трансформации. Трансформация клеток вызывает развитие определенных иммунопатогенных реакций, направленных против собственного организма и являющихся одним из механизмов вируссиндуцированной иммуносупрессии. Таким образом, герпесвирус может приводить к развитию первичного иммунодефицита, но наиболее тяжелые клинические формы иммунодефицита наблюдаются у лиц с имунодефицитными состояниями, обусловленными другими причинами, в т.ч. ВИЧ-инфекцией.

Значительная часть герпесвирусов способна вызывать острые и латентные инфекции. При латентной инфекции возбудитель мигрирует из первичного очага в сенсорные ганглии: ВПГ-1 в тройничный, а ВПГ-2 в поясничный узлы.

Основными этапами развития герпетической инфкции являются:

первичная инфекция кожи и слизистых, колонизация и острая инфекция ганглиев с последующим установлением латентности, когда только вирусная ДНК, находящаяся в ядрах нейронов, свидетельствует о наличии инфекции.

По окончании острой фазы инфекции, свободный вирус более не обнаруживается в чувствительном ганглии. Механизмы, определяющие переход из острой фазы инфекции в латентную, пока не выяснены. Этот переход параллелен развитию иммунных факторов: иммунная реакция хозяина уменьшает размножение вируса в коже, и клетки ганглия становятся непермессивными – устанавливается латентная инфекция.

Механизмы латентной инфекции, а также механизмы, лежащие в основе реактивации вируса, неизвестны. Пусковым механизмом реактивации является избыточное УФ-облучение, переохлаждение, травма кожи или ганглия, стрессовая ситуация, а также иммуносупрессия.

В настоящее время разработаны две рабочие гипотезы, объясняющие латентную циркуляцию и увеличение риска рецидивов клинических проявлений.

• Cтатическая гипотеза предполагает циркуляцию вирусной ДНК в виде эписомы в ганглиях и (возможно) интеграцию ее в хромосомы клеток. Активация репликативного цикла происходит под действием уже указанных выше факторов. По центробежным нейронам дочерние популяции достигают нервных окончаний, откуда проникают в эпителиальные клетки и репродуцируются в них, вызывая появление везикул.

• Динамическая гипотеза подразумевает перманентное образование и выброс из ганглиев небольших количеств возбудителя, постоянно циркулирующего по нейронам и попадающих в эпителий кожи. При этом незначительное число вирусных частиц не способно вызывать видимые поражения, но их количество способно резко возрастать под действием различных факторов, стимулирующих репликативный процесс.

Следует отметить, что помимо нейрогенного пути распространения герпетической инфекции, большое значение имеет и гематогенный путь её распространения.

Клинические проявления. Инкубационный период при герпетической инфекции продолжается от 2 до 12 дней.

Оба вируса вызывают аналогичные поражения, однако их локализация имеет некоторую специфичность (табл. 6.4).

Лабиальный герпес. Локализованная герпетическая инфекция обычно сопровождает какое-либо другое заболевание (ОРЗ, пневмония и др.).

Инфекция развивается в разгар основного заболевания или уже в период выздоровления. Общие симптомы маскируются проявлениями основного заболевания. Герпетическая сыпь локализуется обычно вокруг рта и на губах.

На месте высыпания больные ощущают жар, жжение или зуд кожи. На коже появляются мелкие пузырьки, заполненные прозрачным содержимым.

Пузырьки вскрываются, образуя эрозии, или подсыхают и превращаются в корочки. Возможно наслоение вторичной бактериальной инфекции. При рецидивах герпес поражает, как правило, одни и те же участки кожи.

Генитальный герпес. Первичная инфекция характеризуется умеренным повышением температуры тела, недомоганием, мышечными болями, болями в нижних отделах живота, увеличением и болезненностью паховых лимфатических узлов. Поражения обычно исчезают через 10-12 дней, но часто рецидивируют. Генитальный герпес представляет особую опасность у беременных, т.к. может вызывать тяжелую генерализованную инфекцию новорожденных. Может также способствовать возникновению рака шейки матки.

–  –  –

Герпетические поражения глаз. Такие поражения чаще наблюдаются у мужчин в возрасте 20-40 лет. Различают поверхностные и глубокие поражения. Они могут быть первичными и рецидивирующими. Последние способны приводить к необратимой потере зрения.

Герпетические энцефалиты. Чаще заболевают лица в возрасте от 5 до 30 лет и старше 50. В 95% случаев заболевание вызывается вирусом типа 1. В большинстве случаев вначале появляются признаки герпетического поражения кожи и слизистых оболочек и потом развиваются симптомы энцефалита. Клиническими проявлениями являются быстрое повышение температуры тела, общая интоксикация, наличие психических, а затем и неврологических нарушений. Патогенез вызывает прогрессирующую демиелинизацию нервных волокон. Течение болезни тяжелое. Летальность достигает 30%. После перенесенного энцефалита могут быть стойкие нарушения психики.

Герпетический менингит обычно протекает стерто. Развивается чаще у лиц с первичным генитальным герпесом. Повышается температура тела, появляются головные боли, светобоязнь. Через неделю больные выздоравливают без существенных осложнений.

Герпес новорожденных возникает в результате внутриутробного инфицирования (а также при родах) преимущественно вирусом типа 2. Это тяжелое генерализованное поражение многих органов и систем. В большинстве случаев в процесс вовлекается головной мозг. Летальность равна 65%.

Диссеминированный герпес чаще наблюдается у лиц с врожденными или приобретенными иммунодефицитами (больные лимфогрануломатозом, новообразованиями, получающие химиотерапию, больные гематологическими заболеваниями, лица, длительно получающие кортикостероиды, иммунодепрессанты, а также ВИЧ-инфицированные).

Характерны распространенные поражения кожи и слизистых оболочек, развитие энцефалита и менингита, гепатита, пневмонии. Заболевание без использования современных противовирусных препаратов обычно заканчивается летальным исходом.

6.3.3. Профилактика и лечение герпетической инфекции

Разработаны инактивированные вакцины для профилактики рецидивов герпетической инфекции, однако их эффективность еще недостаточно изучена.

Иногда для предотвращения инфекции или в качестве дополнения к химиотерапии используется пассивная иммунизация иммунной или гипериммунной сывороткой, включая моноклональные антитела.

Большинство используемых в клинике противогерпетичексих препаратов (см. табл. 6.5) – это аналоги нуклеозидов, селективно ингибирующих вирусную ДНК-полимеразу, а именно: ацикловир, ИДУ, БВДУ, видарабин. При этом действие некоторых из этих препаратов (ацикловир, идоксуридин, БВДУ) является зависимым от вирусной тимидинкиназы.

Как следует из табл. 6.5, основным препаратом, назначаемым при химиотерапии большинства форм герпетической инфекции, является ацикловир. Препарат назначают внутрь не позже 72 ч после появления первых признаков заболевания. Также возможно его наружное применение в составе специальных мазей и кремов.

Таблица 6.5.

Химиотерапия герпетической инфекции Диагноз Препараты выбора Герпетический кератит Трифлуридин или идоксуридин Генитальный герпес Ацикловир Герпетический энцефалит Ацикловир или видарабин Герпес новорожденных Ацикловир Герпес кожи и слизистых Ацикловир Кроме представленных в табл. 6.5, применяются и некоторые другие препараты. Так, при плохой переносимости ацикловира можно использовать фамцикловир, который дает меньше побочных эффектов. Для лечения кожного и генитального герпеса, обусловленных штаммами, устойчивыми к ацикловиру, рекомендуется препарат ВИРА-МП (5’-монофосфат видарабина).

При терапии кератитов хорошо зарекомендовали себя интерферон и его индуктор – полудан.

Отдельного упоминания заслуживает БВДУ. Этот модифицированный нуклеозид проявляет активность против ВПГ-1 и ВПГ-2, причем по активности против ВПГ-1 он намного превосходит все другие антигерпетические препараты, включая самый популярный в настоящее время – ацикловир.

Одной из главных проблем, возникающих в процессе применения химиопрепаратов, является появление вариантов герпесвирусов, резистентных к используемым лекарствам. В первую очередь это касается людей, подвергшихся длительному лечению противогерпетическими препаратами и имеющих нарушения в иммунной системе: больные, страдающие иммунодефицитами, с подавленной иммунной системой после операций по трансплантации органов и основная группа – это больные СПИДом.

Устойчивость к ацикловиру проявляется в основном за счет мутаций в гене тимидинкиназы, приводящих к потере (полной или частичной) тимидинкиназной активности. В редких случаях устойчивость возникает в результате мутации в гене ДНК-полимеразы.

В заключение следует отметить, что в настоящее время отсутствуют противогерпетические препараты, удовлетворяющие требованием, предъявляемым к «идеальному химиотерапевтическому средству», поэтому постоянно ведется поиск новых препаратов с более широким спектром противовирусной активности, с улучшенными фармакокинетическими свойствами. Направленный поиск новых препаратов ведется в нескольких направлениях: скрининг препаратов с высоким ХТИ, действующих на разных стадиях репродукции вирусов в клетках или вызывающих специфическое ингибирование «ключевых» ферментов. Наконец, регулярно проводится поиск комбинированных препаратов с различным механизмом действия, что обеспечивает синергидный эффект в отношении подавления репродукции вирусов в клетках и уменьшение вероятности возникновения резистентных вариантов вирусов к используемым препаратам. Весьма перспективным сочетанием считается комбинация -интерферона с противовирусными нуклеозидами.

В качестве возможных препаратов против герпесвирусов рассматриваются антисмысловые олигонуклеотиды, 2’-5’-олигоаденилаты и большой спектр других соединений, которые находятся на различных стадиях противовирусных испытаний.

6.4. ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ/СПИД 6.4.1. Общие вопросы Этиология. ВИЧ-инфекция – заболевание, возникающее вследствие заражения вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ; английская аббревиатура – HIV), поражающего иммунную систему, в результате чего развиваются различные оппортунистические инфекции и опухоли. ВИЧинфекция имеет ряд стадий. Последнюю из них, сопровождающуюся т.н.

СПИД-индикаторными болезнями, обозначают термином синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД). Главная опасность ВИЧинфекции – неизбежная гибель инфицированных пациентов, наступающая при отсутствии лечения в среднем через 10-11 лет после заражения.

ВИЧ – это РНК-содержащий вирус, который относят к сем. Retroviridae (подсем. лентивирусов). В настоящее время выделено 2 типа ВИЧ: ВИЧ-1 – это основной возбудитель ВИЧ-инфекции; места его распространения – Северная и Южная Америка, Европа и Азия. ВИЧ-2 – эволюционно родственный, но менее вирулентный вариант ВИЧ-1, распространен не так широко; редко вызывает типичные проявления СПИДа. Место его распространения – Западная Африка.

Кроме того, обнаружен вирус иммунодефицита обезьян (ВИО). ВИЧ-2 по иммунологическим свойствам занимает промежуточное положение между ВИЧ-1 и ВИО. Возможно, что они произошли от общего предка, а затем эволюционировали самостоятельно.

Помимо ВИЧ 1-го и 2-го типов и ВИО, к лентивирусам относятся вирусы иммунодефицита кошек и крупного рогатого скота, а также инфекционной анемии лошадей, прогрессирующей пневмонии овец и некоторых др. заболеваний животных. Поражение клеток иммунной системы и высокая антигенная вариабельность являются общими характерными особенностями лентивирусов, с которыми связаны основные трудности специфической профилактики и лечения лентивирусных инфекций.

ВИЧ размножается с высокой продуктивностью в Т-хелперных лимфоцитах, несущих на поверхности дифференцировочный антиген CD4 (CD – аббревиатура от английского claster of differentiation), что приводит к быстрому разрушению клеток данной популяции.

Исследования показали, что для ВИЧ характерна очень высокая степень изменчивости – в 5-40 раз превышающая изменчивость вируса гриппа.

Морфология ВИЧ. Зрелые вирионы (см. рис. 2.7) имеют шаровидную форму диаметром 100-140 нм. ВИЧ относится к сложным вирусам, т.к. его капсид окружен дополнительной двухслойной липидной оболочкой. Эта оболочка имеет клеточное происхождение. Она захватывается вирусом, когда он «протаранивает» клеточную мембрану, выходя из клетки-хозяина.

Главными вирусными белками, ассоциированными с оболочкой и формирующими морфологически различимые «шипы», являются гликопротеиды gp120 и gp41. Белок gp41 заякорен в липидном бислое, а белок gp120 (этот белок функционирует в качестве вирусного антирецептора) находится на внешней поверхности и нековалентно соединен с gp41.

Гликопротеид gp120 – высокоиммуногенный белок, содержащий консервативный и гипервариабельный участки, а также область, связывающую молекулу CD4 Т-лимфоцитов. Установлено, что 95% антител, вырабатываемых в организме к ВИЧ, вырабатывается к этому гипервариабельному участку из 35 аминокислот. Кроме того подсчитано, что ни один из вирионов-потомков не является точной антигенной копией родительского вириона.

Под внешней оболочкой расположена прослойка из матриксного белка (р17). Еще глубже расположен капсид, имеющий форму усеченного цилиндра, образованный из множества идентичных копий белка р24. Внутри капсида находится геном вируса, представленный двумя идентичными не фрагментированными цепями (+)РНК.

Геномная РНК связана с т.н. нуклеокапсидными белками. Такие белки обычно положительно заряжены с тем, чтобы нейтрализовать отрицательно заряженную нуклеиновую кислоту и, таким образом, облегчить упаковку ее в капсид. Нуклеопротеиновый тяж обладает спиральной симметрией.

В состав вируса входят следующие ферменты: обратная транскриптаза, интеграза и протеаза. Обратная транскриптаза состоит из трех доменов, обладающих соответственно активностью РНК-зависимой ДНК-полимеразы, РНКазы-Н и РНК-зависимой ДНК-полимеразы.

ВИЧ не стоек во внешней среде. Он инактивируется при нагревании при 54оС в течение 30 мин. Кипячение убивает вирус за 1-5 мин. ВИЧ быстро погибает под воздействием любых дезинфектантов в концентрациях, обычно применяемых в лабораторной практике.

История открытия ВИЧ. В 1981 г. в ряде крупных городов США была зарегистрирована вспышка инфекционного заболевания, вызываемого грибком, который при нормальном состоянии иммунитета не вызывает заболеваний. В ходе проверки выяснилось, что заболевание распространяется только среди лиц, имевших интимные контакты с тем или иным инфицированным индивидуумом. В основе доселе неизвестного заболевания лежало резкое ослабление иммунитета, что и приводило к развитию инфекции. Неизвестную ранее форму подавления работы иммунной системы стали обозначать как синдром приобретенного иммунодефицита.

ВИЧ 1-го типа был открыт в 1983 г. французским исследователем Л.Монтанье и его американским коллегой Р.Галло. В 1986 г. Л.Монтанье выделил у жителей Западной Африки ВИЧ-2. Мишени для вирусов обоих типов одинаковы: Т-лимфоциты и др. клетки иммунной системы.

Ретроспективный анализ сывороток, хранящихся в Национальном Центре контроля за инфекционными заболеваниями, показал, что первые случаи СПИДа у человека относятся к 50-м годам прошлого столетия, и, что заболевание возникло в Африке, а затем распространилось на территории Европы и США.

Есть предположение о том, что ВИЧ «перепрыгнул» с шимпанзе на человека в период между 1675 и 1700 гг. и с тех пор не проявлял себя до 1930 г. Исследователи, конечно, не располагают образцами крови, датированными 1675 г. Самые старые образцы ее датированы только 1959 г. Поэтому вывод о возрасте ВИЧ сделан с помощью т.н. методики «молекулярных часов», основанной на расчетной оценке скорости изменения генома вируса. По общепринятому мнению, выход вируса из «тени» произошел благодаря сексуальной революции и появлению новых способов (инструментальной) передачи возбудителя от человека к человеку.

6.4.2. Эпидемиология

Источником ВИЧ-инфекции является только человек – больной или вирусоноситель. У этих людей вирус содержится в крови, сперме, грудном молоке.

Основным путем заражения считают половые контакты. Вторым по значимости фактором передачи считается использование одних и тех же игл и шприцев наркоманами, стоматологический инструмент. Несколько меньшее значение имеет трансплацентарная передача от матери к ребенку.

Известны случаи заражения людей путем переливания ВИЧ-инфицированной крови. Теоретически (достоверных фактов мало) возможна передача возбудителя также при трансплантации органов и с материнским молоком.

Следует особо подчеркнуть, что до сих пор не известны случаи передачи ВИЧ путем поцелуев, укусов насекомых, а также через пищевые продукты или рукопожатия.

По данным ВОЗ, с конца 70-х годов и к началу 1999 г. ВИЧ-инфекция унесла жизни более 13,9 млн. жителей Земли. Еще около 34 млн. человек к этому времени были инфицированы. Инфекция за последние 20 лет постепенно проникла из первоначальных очагов – США и Центральной Африки – на все континенты и во все страны мира. Считается, что каждый сотый взрослый житель планеты уже заражен ВИЧ. В ряде стран Африки заражено ВИЧ до 20% населения. ВИЧ-инфекция не редкость в странах Западной Европы, где ею заражено до 0,5% всех взрослых.

Эпидемия ВИЧ-инфекции в РФ и странах бывшего Советского Союза началась поздно, однако темпы ее развития из-за низкой культуры быта превосходят таковые, характерные для Европы.

В России в 1999 г. официально зарегистрировано 11 тыс. ВИЧинфицированных, в то время как оценочное общее число инфицированных составляло не менее 50 тыс. человек.

Согласно статистическим данным, которыми располагает Минздрав РФ, всего за период с 1 января 1987 по 1 октября 2000 г. зарегистрировано 83249 ВИЧ-инфицированных граждан России. Умерло 634 ВИЧинфицированных. За 9 месяцев 2000 г. зарегистрировано 32140 новых случаев ВИЧ-инфекции. В 2000 г. было выявлено больше случаев заболевания, чем за весь предыдущий период тринадцатилетний период. В общей структуре ВИЧ-инфицированных преобладают (около 80%) мужчины.

Пораженность населения РФ ВИЧ-инфекцией достигла к 1 октября 2000 г. 43 на 100 тыс. населения. 1 января 1996 г. этот показатель был равен только лишь 0,6. По расчетным данным в конце 2000 г. в РФ проживало 600 тыс.

ВИЧ-инфицированных. Динамика выявления ВИЧ-инфицированных граждан

России по годам:

1987 – 23 1988 – 47 1989 – 265 1990 – 103 1991 – 84 1992 – 88 1993 – 107 1994 – 161 1995 – 196 1996 – 1511 1997 – 4353 1998 – 4034 1999 – 18218 2000 – 32140 (9 месяцев).

Первый ВИЧ-инфицированный в Республике Беларусь был обнаружен в ноябре 1986 г. Им оказался прибывший из Бурунди студент одного из ВУЗов РБ. Не прошло и года, как была выявлена первая инфицированная из числа коренных жителей республики.

Если в РБ в начальном периоде преобладал гетеросексуальный путь трансмиссии, то в настоящее время ведущую роль играют инфицированные шприцы и иглы наркоманов.

Вплоть до 1996 г. эпидемическую ситуацию в РБ можно было характеризовать как относительно благополучную (по сравнению со странами Америки и Европы). В тот период преобладал гетеросексуальный путь передачи инфекции. Как правило, удавалось установить сексуальную связь инфицированного партнера-иностранца с нашими соотечественницами.

Начиная с 1990 г., положение существенно изменилось. ВИЧ-инфекция стала выявляться в основном у мужчин (что как раз было характерно для начального периода развития эпидпроцесса на Западе). Исследователи объясняют такой характер развития ситуации следствием изменившегося в последние годы уклада жизни населения. Основным резервуаром ВИЧинфекции теперь являются не студенты-иностранцы, а соотечественники – сексуально активные мужчины, юношеского и подросткового возраста, преимущественно употребляющие наркотические вещества.

Итак, в 1996 г. начался новый период в развитии эпидпроцесса в РБ – период эпидемического неблагополучия. В ряде областей (например, в Гомельской) показатель инфицированности достиг в 1998 г. более 1000 на 1 млн. жителей и вплотную приблизился к уровню наиболее пораженных стран Европы. Иными словами, начавшаяся в середине 80-х годов прошлого века в РБ эпидемия СПИДа достигла в последние годы небывало высокого уровня.

По состоянию на 1 июня 2001 г. в Республике Беларусь зарегистрировано 3587 случаев ВИЧ-инфекции, что составляет 37 случаев на 100 тыс. населения. Особую озабоченность вызывает тот факт, что подавляющее число ВИЧ-инфицрованных, а именно – 80% от общего числа, составляют молодые люди репродуктивного возраста.

6.4.3. Патогенез

На ранней вирусемической стадии инфекции вирус реплицируется очень слабо. Только к 20 суткам после заражения в крови появляются специфические антитела. На фоне выработки и увеличения количества антител к вирусу клинически выраженные симптомы этой стадии (лихорадка, боли в горле, мышцах, головная боль), за исключением увеличения лимфоузлов, исчезают.

В течение 10-15 лет у ВИЧ-инфицированных можно не обнаружить никаких симптомов болезни. При этом в организме неуклонно снижается количество CD4-лимфоцитов и нарастают другие иммунные сдвиги. Они приводят больного к стойкой нетрудоспособности и, в конечном счете, к гибели. При уровне CD4-лимфоцитов ниже 500 в 1 мл крови могут наблюдаться бактериальная пневмония, легочный туберкулез, опоясывающий лишай, кандидоз полости рта и пищевода. Из неинфекционных проявлений наиболее часто отмечается саркома Капоши, рак шейки матки, В-клеточная лимфома, анемия.

Обычно, для того чтобы инфицировать клетку человека, гликопротеиды gp120 на поверхности ВИЧ (см. рис. 6.10) должны провзаимодействовать с двумя молекулами на поверхности восприимчивых клеток – молекулой CD4 (играющей роль рецептора) и рецептором хемокинов (выступающим здесь в роли корецептора). Корецептор CCR5 находится на поверхности макрофагов, корецептор CXR4 – на поверхности Т4-лимфоцитов. Напомним, что хемокины – полипептиды, вызывающие движение клеток в том или ином направлении.

Популяция клеток, обладающих молекулами CD4, включает Тлимфоциты – хелперы (их еще также называют Т4-клетками, CD4+-клетками, Т-хелперами), моноциты, макрофаги и родственные клетки (промиелоциты, мегакариоциты, дентритические клетки лимфоузлов, глиальные клетки мозга, астроциты, клетки Лангерганса и ряд других). Все эти клетки становятся доступными ВИЧ только при его проникновении через поврежденные внешние покровы, что и ограничивает пути передачи инфекции.

–  –  –

После прикрепления к клетке антирецепторы gp120 отодвигаются, а гидрофобные концы белка gp41 проникают сквозь мембрану клетки и оболочка вируса и мембрана клетки сливаются (см рис. 3.5). В результате слияния мембран вируса и клетки геном вируса оказывается в цитоплазме.

Иногда вирус проникает в клетку путем эндоцитоза. Затем оболочка вируса сливается с мембраной эндосомы, в результате чего вирусный геном попадает в цитоплазму. На пути к ядру капсид разрушается, высвобождая геномную РНК с ассоциированными с ней белками. РНК с ферментами проникает в ядро. Используя ревертазу, ВИЧ синтезирует ДНК-копию с РНК-генома (имеет место транскрибирование РНК в ДНК). После завершения этого процесса РНКаза-Н деградирует вирусную РНК. Далее с помощью РНК-зависимой ДНК-полимеразы синтезируется вторая цепь ДНК, в результате чего образуется двухцепочечный интермедиат вирусной ДНК.

Двухцепочечная вирусная ДНК встраивается в хромосому клетки с образованием провируса. Этот процесс протекает под действием вирусной интегразы. После интеграции провирусная ДНК ВИЧ может находиться как в латентном состоянии, так и в активном (продуктивном) состоянии. Большая часть (93-95%) вирусной ДНК интегрирует в хромосому Т4-лимфоцитов.

Причем эти клетки продуцируют вирус. Однако существует малый процент ВИЧ-инфицированных клеток, где провирус годами находится в латентном состоянии. Эти клетки (наряду с инфицированными моноцитами, макрофагами, дентритными клетками и клетками Лангерганса) играют роль стабильного резервуара ВИЧ, который избегает ответа организма-хозяина и антиретровирусной химиотерапии.

Пребывание в неактивном состоянии может длиться 10 и более лет. С момента активации вируса начинается сама болезнь. ДНК провируса транскрибируется с образованием геномной РНК и мРНК. Последние с помощью клеточной белоксинтезирующей машинерии транслируются в полипротеины различной длины. Специфическая протеаза разрезает полипротеины на структурные белки и ферменты. Белки gp120 и gp41 встраиваются в цитоплазматическую мембрану клетки-хозяина.

Вокруг вирусной РНК-потомства собирается капсид, который выпячивается из клетки, обволакиваясь ее цитоплазматической мембраной.

Как правило инфицированные Т4-хелперный лимфоциты при репликации вируса погибают. В то же время инфицированные моноциты, макрофаги и некоторые клетки обычно остаются жизнеспособными. Покинувшие клеткухозяина вирионы-потомства способны инфицировать новые чувствительные клетки.

На основании четкой связи прогрессирования заболевания со снижением у больного количества клеток, несущих рецептор CD4, было показано, что уменьшение количества этих клеток является главной особенностью патогенеза заболевания, а динамика этого уменьшения полностью коррелирует с клиническим прогрессированием заболевания. В результате иммунных сдвигов у заразившихся снижается сопротивляемость к некоторым инфекциям и опухолям, т.е. у больного развивается СПИД.

6.4.4. Химиотерапия ВИЧ-инфекции В настоящее время медицина пока не располагает средством, которое бы позволили полностью излечить человека от СПИДа. Однако разработаны схемы лечения, которые могут существенно задержать развитие заболевания.

Ингибиторы обратной транскрипции. Исследователи предлагают несколько возможностей воздействия на вирус. Однако пока наиболее достоверный клинический эффект был получен путем блокирования важнейшего этапа жизненного цикла ВИЧ, а именно процесса синтеза провирусной ДНК, при помощи ревертазы. Большинство ингибиторов обратной транскрипции являются нуклеозидными аналогами (см. рис. 5.5).

Эти соединения в клетке трансформируются в нуклеозид-5’-трифосфаты, которые по химической структуре напоминают обычные нуклеотиды – блоки строительства ДНК. Далее эти трифосфаты с помощью ревертазы включаются в растущую полинуклеотидную цепочку, после чего дальнейшее ее удлинение прекращается. Причина такой терминации – отсутствие у молекулы аналога при С’-3 атоме гидроксильной группы, которая абсолютно необходима для продолжения роста цепи.

Первым препаратом из этой группы лекарств был азидотимидин (AZT), выпускаемый за рубежом под названиями ретровир, зидовудин и т.д., а в России – как тимазид. В настоящее время в клинике применяются или проходят испытание до десятка препаратов этой группы. Они отличаются друг от друга видом азотистого основания и модифицированного углеводного фрагмента, присоединенного к нему. Так AZT представляет собой тимидин с азидной группой, присоединенной к С3-атому дезоксирибозы. К этой же группе ингибиторов обратной транскрипции принадлежит диданозин (ddI) – аналог дезоксиаденозина, зальцитабин (ddC) и ламивудин (3ТС) – аналоги дезоксицитидина, ставудин (d4T) – аналог тимидина и некоторые др. препараты, находящиеся в процессе клинического изучения.

В нашей стране успешно прошел клинические испытания препарат под названием замицит – отечественный аналог зальцитабина. Оригинальную технологию синтеза этого препарата разработали исследователи Института биоорганической химии НАН Беларуси.

Другая группа ингибиторов обратной транскрипции – игибиторы ненуклеозидной природы. Они не встраиваются в ДНК вируса, подобно нуклеотидам, а связываются с аллостерическим участком ревертазы и инактивируют ее. Это также приводит к прекращению образования провирусной ДНК. В клинической практике нашли применение препараты невирапин (см. раздел 5.3.2.3), делавирдин и эфаверенц.

Ингибиторы протеазы ВИЧ. Достаточно удачными оказались поиски агентов, угнетающих процесс сборки вирусных частиц, в котором участвует вирусный фермент протеаза. Этот фермент расщепляет полипротеины с образованием функционально активных ферментов, структурных и регуляторных белков (рис. 6.11). Ингибиторы протезы связываются с активным центром протеазы и выводят ее из строя. В результате стадия созревания ВИЧ блокируется, и образование новых инфекционных вирионов не происходит. Поскольку протеаза ВИЧ (аспартатпротеаза) отличается от протеазы человека, ингибиторы вирусной протеазы действуют избирательно, не блокируя функцию фермента клеток человека.

К концу 1999 г. в клиническую практику уже прочно вошли препараты группы ингибиторов протеазы ВИЧ: саквинавир, индинавир, ритонавир, нельфинавир. По химической природе эти препараты представляют собой пептидные аналоги. К сожалению, в последнее время выявился общий нежелательный эффект ингибиторов протеазы – нарушение обмена липидов, липодистрофия. Клинически это проявляется перераспределением жировой ткани: она исчезает на лице, голенях, но в избытке откладывается на животе и груди. В результате некоторые пациенты отказываются от лечения.

Следует подчеркнуть, что в каждом больном имеются в наличии миллионы мутантных форм вируса, поэтому исследователи понимают, что лечение одним препаратом – бесполезно, поскольку среди такого чудовищного разнообразия мутантов быстро происходит отбор устойчивых форм. Только тщательно подобранные комбинации лекарств замедляют течение инфекции и ограничивает появление новых устойчивых штаммов вируса.

Сейчас в стадии разработки находится множество клинических схем применения различных комбинаций этих препаратов. Лучшие на сегодняшний день результаты достигнуты при использовании ингибитора протеазы в комбинации с одним или двумя ингибиторами ревертазы.

Рис. 6.11. Механизм действия препаратов на основе ингибирования протеазы ВИЧ.

Проблема усугубляется тем, что стоимость лечения коктейлем из трех лекарств составляет 8-10 тыс. дол. США в год. Многие пациенты не способны оплатить такое лечение. Особенно если учесть, что 90% ВИЧинфицированных проживает в развивающихся странах.

Следует подчеркнуть, что ни один из существующих анти-ВИЧагентов не убивает и не элиминирует вирус, они только ингибируют его репликацию и снижают тяжесть протекания болезни, продлевая на несколько лет жизнь. Практика показала, что у пациентов, регулярно принимающих препараты «тритерапии», отмечаются уменьшение количества вируса в крови вплоть до неопределяемого современными методами уровня, возрастание количества CD-клеток, исчезновение сопутствующих инфекций.

В России и Беларуси внедрение комбинированной терапии пока существенно затруднено из-за финансовых проблем.

Основной научной проблемой терапии ВИЧ-инфекции стала борьба с развитием резистентности вируса к применяемым препаратам. Исследования и наблюдения показали, что у ВИЧ довольно быстро возникают мутации, обеспечивающие устойчивость к применяемым противоретровирусным препаратам. Если пациенты, у которых возникли резистентные штаммы ВИЧ, будут вести половую жизнь, то это приведет к массовому распространению устойчивых к лечению штаммов. Отсюда возникает необходимость в замене одной комбинации лекарств на другую.

К сожалению, все лекарства довольно токсичны. Самый известный – AZT –сильный яд для ЦНС и костного мозга. По вине других препаратов развивается диабет, страдают почки и печень. Кроме того, все эти лекарства довольно дороги. Поэтому постоянно проводится поиск более эффективных и менее дорогостоящих лекарств.

6.4.5. Перспективы борьбы с ВИЧ-инфекцией

Итак, спустя 20 лет после своего официального появления на свет, СПИД считается абсолютно смертельным заболеванием. А ведь только в США на решение проблемы СПИДа тратят ежегодно больше бюджетных денег, чем на национальную космическую программу. Но защиты от ВИЧ так и нет.

ВИЧ-носители заболевают в среднем через 10 лет после заражения.

Половина больных умирает в течение первого года, еще через два года в живых остается лишь 10% заболевших, а через 5 лет – 2%. Случаев излечения пока не зафиксировано.

Что мешает справиться с этой болезнью? Чем отличается ВИЧ от других известных науке инфекций?

ВИЧ оказался абсолютным чемпионом биологического мира по изменчивости. Со времени появления вируса возникло огромное количество его вариаций. Именно с этим и связаны главные трудности создания лекарства против СПИДа.

Существующие лекарства бессильны против вируса, интегрированного в геном. Поэтому многие врачи основные надежды сегодня возлагают на создание эффективной вакцины.

Иммунопрофилактика. Долгое время создание вакцины против ВИЧ представлялось неразрешимой задачей по причине слишком высокой изменчивости вируса. Однако, сегодня, благодаря титаническим усилиям многих исследователей, в мире уже созданы и испытываются десятки вариантов такой вакцины. Тем не менее, следует признать, что проблема вакцинотерапии и профилактики СПИДа еще не решена.

Перспектива применения живых, хотя и ослабленных или дефектных штаммов ВИЧ в целях иммунизации встречается со скептицизмом. Дело в том, что никто не может исключить риск интеграции вирусной ДНК в геном хозяина (что может вызвать рак) или реверсии вируса в вирулентную форму (что воспроизведено на обезьянах).

Инактивированный ВИЧ, из-за низкой иммуногенности и не способности индуцировать выраженный клеточный иммунитет, не может быть основой эффективной вакцины. К тому же сама процедура инактивации трудно осуществима без разрушения структуры внешних белков, ответственных за антигенность. Кроме того, потенциальный риск, связанный с недостаточной инактивацией вируса, заставляет многих отказаться от иммунизации такими вакцинами.

Субъединичные вакцины представляют собой очищенные фрагменты вириона. Техника рекомбинантных ДНК позволяет наработать их в достаточных количествах. Главным недостатком субъединичных вакцин является то, что они не индуцируют полноценного клеточноопосредованного иммунного ответа. В этой связи следует особо отметить, что показана возможность перехода вируса из зараженных клеток в другие, минуя стадию отпочковывания – контактным путем. Тем самым доказана возможность распространения возбудителя в организме в присутствии значительного количества антител к ВИЧ.

Идеальная протекция против вирусной инфекции достигается сочетанием гуморального и клеточного иммунного ответа. Для индукции обоих типов ответа разрабатываются новые методы, основанные на вакцинации синтетическими пептидами. Этот подход использует пептидный антиген, взятый из вариабельного домена гликопротеида gp120 ВИЧ, который содержит нейтрализующие, Т-хелперные и Т-цитотоксические эпитопы. Такой подход кажется очень перспективным, но он еще очень далек от широкого применения. Более насущная задача сегодня – повысить иммуногенность и эффективность рекомбинантных субъединичных вакцин.

Итак, успехи в создании традиционных вакцин против ВИЧ очень скромны. В настоящее время нет достоверных данных, которые бы свидетельствовали о значительных успехах в этой области. Причина тому – значительная генетическая вариабельность вируса, особенно тех участков генома, где кодируются антигены, подвергающиеся иммунным атакам.

ДНК-вакцинация. Это направление многие ученые называют революцией в вакцинологии. ДНК-вакцинация предусматривает доставку генов, кодирующих вирусные иммуногенные белки, в организм человека, что приводит к синтезу в нем соответствующих белков. Обычно иньекцию ДНК проводят в скелетные мышцы или обстреливают эпителий частицами золота, покрытыми ДНК, при помощи т.н. «генной пушки». Механизм ответственные за усвоение ДНК и последующую презентацию вирусных антигенов, пока не ясны. Известно только, что ДНК-вакцинация вызывает индукцию не только гуморального, но и клеточного иммунитета.

Генная вакцинация имеет громадное преимущество перед обычными имунологическими методами – она не способна сама по себе вызвать инфекцию. По мере усовершенствования техники рекомбинантных ДНК вакцины могут нарабатываться быстро и в большом количестве. Они хорошо хранятся, легко транспортируются и сравнительно дешевы.

Полученные к настоящему времени данные испытаний ДНК-вакцин против ВИЧ на здоровых добровольцах свидетельствуют о их безопасности и хорошей иммунногенности.

Генотерапия. Генотерапия – метод контроля экспрессии вирусных генов посредством использования синтетических олигонуклеотидов. Имеется два подхода, приводящих к ингибированию репликации вируса. В первом используются олигонуклеотиды, которые, взаимодействуя с регуляторными вирусными белками, инактивируют их. Второй подход предусматривает применение т.н. антисмысловых олигонуклеотидов (АСОНов), которые связываются с комплементарными участками вирусных нуклеиновых кислот.

Большинство АСОНов связываются с вирусными мРНК и блокируют тем самым синтез вирусных белков. Следует отметить, что препараты для генотерапии очень дороги и сложны в применении, что пока ограничивает использование их терапевтического потенциала.

Так есть ли надежда на спасение от СПИДа? При обследовании одной из групп высокого риска было установлено, что некоторые индивидуумы, которые неоднократно имели возможность заразиться, тем не менее не были носителями ВИЧ. Оказалось, что все они гомозиготны по аллелю, несущему делецию в гене, кодирующем хемокиновый рецептор, т.е.

корецептор ВИЧ. В связи с этим, исследователи предлагают несколько вариантов использования полученных результатов для борьбы с инфекцией ВИЧ: 1) генно-терапевтическое подавление экспрессии гена корецептора ВИЧ; 2) введение делеции в этот ген с помощью сайт-направленного мутагенеза.

Интересно, что частота указанной мутации (данным разных авторов) колеблется у представителей европеоидной популяции от 11 до 17%, а у африканцев – от 0 до 1,7%.

Обсуждается идея ликвидации в организме больного всех Т4лимфоцитов с последующей пересадкой собственных, законсервированных ранее (и еще не инфицированных) лимфоцитов.

Еще одним многообещающим подходом является создание химиотерапевтических препаратов, препятствующих инфицированию клеток ВИЧ. Теоретическая основа этого подхода возникла в результате серии работ, показавшей, что ВИЧ начинает реплицироваться еще до проникновения в клетки – в крови за счет присутствия в ней небольших концентраций 2’-дезоксинуклеозид-5’-трифосфатов. И если эту репликацию подавить, инфекционность вируса по отношению к лимфоцитам резко падает. Известно, что большинство ингибиторов репродукции ВИЧ относится к группе модифицированных 2’-дезоксинуклеозид-5’трифосфатов. Поэтому, если создать достаточно стабильные в крови модифицированные 2’-дезоксинуклеозид-5’-трифосфаты, способные селективно ингибировать обратную транскриптазу ВИЧ, можно надеяться, что основная инфицируемая ВИЧ популяция клеток крови окажется защищенной.

Рекомендуемая литература

Основная

Змушко Е.И., Белозеров Е.С. ВИЧ-инфекция: руководство для врачей.

СПб.: Питер, 2000. 320 с.

Исаков В.А., Борисова В.В., Исаков Д.В. Герпес: патогенез и лабораторная диагностика. Руководство для врачей. СПб.: Лань, 1999. 192 с.

Ключарева А.А. Диагностика и лечение хронических вирусных гепатитов // Мед. новости. 1997. № 4. С. 21-26.

Коломиец А.Г., Савицкая Т.В., Матвеев В.А. и др. Изучение эпидемиологии герпетических вирусных инфекций в Республике Беларусь // Ж. микробиол. эпидемиол. и иммунол. 1997. № 3. С. 24-29.

Львов Д.К. Многоликий гепатит // Медицина для всех. 1996. № 1. С. 2-3.

Львов Д.К., Слепушкин А.Н., Ямникова С.С., Бурцева Е.И. Грипп остается непредсказуемой инфекцией // Вопр. вирусол. 1997. Т. 42, № 3. С.

141-144.

Сергеев О.В. Современный подход к созданию анти-ВИЧ-вакцины // Вопр. вирусол. 1997. Т. 42, № 2. С. 50-53.

Свердлов Е.Д. Надежда на спасение от СПИДа? // Биоорган. химия.

1997. Т. 23, № 2. С. 159-160.

Справочник по инфекционным болезням / Под ред. Ю.Ф.Лобзина, А.П.Казанцева. СПб.: Феникс, 1997. 736 с.

Шмид Д. Гепатит В – болезнь, передаваемая половым путем, которой мы пренебрегали // Вестн. дерматол. и венерол. 2000. № 6. С. 56-59.

Ackermann M., Engels M., Fraefel C., Metzler A., Schwyzer M., Suter M., Tobler K. Herpesviruses: balance in power and powers imbalanced // Vet.

Microbiol. 2002. V. 86, № 1-2. Р. 175-181.

Johnston S.L. Anti-influenza therapies // Virus Res. 2002. V. 82, N 1-2. P.

147-152.

Padgett D.A., Sheridan J.F., Dorne J. et al. Social stress and reactivation of latent herpes simplex virus type 1 // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1998. V. 95, № 12.

P. 7231-7235.

Pommier Y., Marchand C., Neamati N. Retroviral integrase inhibitors year 2000: update and perspectives // Antiviral Res. 200. V. 47, No 2. P. 139-148.

Shi S.T., Lai M.M. Hepatitis C viral RNA: challenges and promises // Cell.

Mol. Life Sci. 2001. V. 58, N 9. P. 1276-1295.

Дополнительная

Галегов Г.А. Синтетические ингибиторы протеиназы ВИЧ и новые возможности лекарственной терапии ВИЧ-инфекции и СПИДа // Вопр.

вирусол. 1997. Т. 42, № 6. С. 284-286.

Зубрицкий П.К., Себут Н.С., Голуб В.С. Вирусные гепатиты в Республике Беларусь: состояние проблемы и тенденции // Вирусные гепатиты с парентеральным механизмом передачи возбудителей и их исходы. Киев, 2001. С. 35-38.

Коломиец А.Г., Лозинский В.П., Коломиец Н.Д. Этиологическая структура вирусных заболеваний респираторного тракта и современные возможности их этиопатогенетической терапии // Мед. новости. 1997. № 2.

С. 3-11.

Майер К.П. Гепатит и последствия гепатита. М.: ГЕОТАР Медицина, 1999. 423 с.

Новиков П.Л. Генерализованная герпетическая инфекция // Медицина.

1997. № 2. С. 24-27.

Шкарин В.В., Соринсон С.Н. ВИЧ/СПИД-инфекция. Двадцать лет спустя после начала пандемии.-Н.Новгород: Изд-во НГМА, 1999. 145 с.

DiBisceglie A.M., Bacon B.R. The unment challenges of hepatitis C // Sci.

Amer. 1999. V. 281, № 4. P. 58-63.

Gubareva L.V., Kaiser L., Hayden F.G. Influenza virus neuraminidase inhibitors // Lancet. 2000. V. 355, № 5. P. 827-835.

Mary C. Virus et hepatitis // Biofutur. 1996. № 156. Р. 17-28.

Raulin J. Human immunodeficiency virus and host cell lipids. Interesting pathways in research for a new HIV therapy // Progr. Lipid Res. 2002. V. 41, № 1.

P. 27-65.

Shortridge K.F. The influenza conundrum // J. Med. Microbiol. 1997. V. 46, № 10. Р. 813-815.

Справочник основных терминов Абортивная инфекция – инициация инфекции без завершения инфекционного цикла и, отсюда, без продукции инфекционных частиц.

Агглютинация – склеивание и выпадение в осадок из однородной взвеси бактерий, эритроцитов и др. клеток.

Адсорбция – первый этап вирусной инфекции, сопровождающийся взаимодействием между вирусной частицей и рецепторной молекулой восприимчивой клетки.

Адьювант – субстанция, которая, будучи одновременно введенной в организм со специфическим антигеном, повышает иммунный ответ на этот антиген. Такие соединения, напр., сульфат алюминия, эмульсия микобактерий (т.н. адьювант Фройнда) обычно входят в состав убитых вирусных вакцин или субклеточных вакцин.

Амантадин – химиопрепарат, который используется для профилактики гриппозных заболеваний. В отечественной практике распространен его аналог – ремантадин.

Антиген (Аг) – вещество, несущее признаки генетически чужеродной информации и вызывающее в организме развитие специфических иммунологических реакций. В случае вирусов, антигенами являются вирионы, белки внешней оболочки, капсид и неструктурные белки.

Нуклеиновые кислоты антигенной активностью не обладают.

Антигенный дрейф – незначительные изменения в структуре поверхностных антигенов (гемагглютенина и нейраминидазы), вызванные точечными мутациями в генах, которые их кодируют.

Антигенный шифт – изменения, которые серьезно затрагивают антигенную структуру гемагглютенина, а реже и нейраминидазы.

Антирецепторы вирусные – вирионные белки (напр., гемагглютенин вируса гриппа), которые связываются с рецепторами восприимчивой клетки.

Антитело (Ат) – иммуноглобулин, появляющийся в сыворотке крови и жидкостях организма в результате антигенной стимуляции и специфически взаимодействующий со своим антигеном. Противовирусные антитела вызывают агрегацию и распад вирионов, экранируют антирецепторы, совместно с комплементом оказывают цитотоксическое действие на клетки, инфицированные вирусом. На вегетативный вирус не действуют.

Аттенуация – искусственное снижение вирулентности инфекционного агента.

Ацикловир – ациклический аналог гуанозина. Структура напоминает молекулу гуанозина, лишенную части углеводного цикла. Применяют ацикловир при простом герпесе и опоясывающем лишае.

Бактериофаг (фаг) – вирус, репродуцирующийся в бактериальных клетках.

Бляшка – видимая невооруженным глазом зона массовой гибели клеток на газоне или монослое восприимчивых клеток в области инокуляции.

Подсчет бляшек - бляшкообразующих единиц (БОЕ) – используют для выражения дозы или степени цитопатогенности вируса.

Вакцина – препарат, содержащий Аг или смесь Аг и предназначенный для формирования иммунного ответа. Противовирусные вакцины подразделяют на три основные типа: 1) инактивированные, 2) живые и 3) субъединичные вакцины. Последние состоят из фрагментов вириона или вирусных Аг, которые продуцируют микроорганизмы, измененные генноинженерными методами.

Видарабин (аденинарабинозид; ара-А) – антивирусный препарат, применяемый против инфекций, вызванных герпесвирусами.

Виразол (рибавирин; 1--D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3карбокс-амид) – полусинтетический противовирусный нуклеозид - аналог инозина или гуанозина, обладающий широким спектром противовирусной активности.

Вирион – элементарная вирусная частица, представляющая собой внеклеточную (покоящуюся) форму вируса. Размеры различных вирионов колеблются от 20 до 300 нм. Вирионы простых вирусов (напр., аденовирусы, пикнавирусы) состоят из сердцевины (нуклеоид), содержащей ДНК либо РНК, и белковой оболочки (капсид). У сложных вирусов (герпесвирусы, миксовирусы) капсид заключен в дополнительную липопротеиновую оболочку, на поверхности которой часто локализуются т.н. «шипы».

Вирогения – длительное сосуществование вируса с клеткой-хозяином, при котором геном вируса интегрирован с геномом клетки. В случае бактериофагов, такое явление носит название «лизогения».

Вироид – облигатный внутриклеточный паразит, представляющий собой мелкую (200-400 нуклеотидов) кольцевую одноцепочечную РНК с характерной палочкообразной вторичной структурой. Вироиды не обладают оболочкой и не кодируют каких-либо белковых продуктов.

Виропексис – процесс пенетрации (проникновния) вируса в клеткухозяина путем пиноцитоза, включающего инвагинацию клеточной стенки с рецепторами, на которых адсорбируется вирус.

Вирулентность – степень патогенности; способность данного вируса вызывать заболевание у определенного хозяина.

Вирулицидность – способность физических и химических факторов уничтожать вирусные частицы.

Вирус – ДНК- или РНК-содержащий микроорганизм, репродуцирующийся только в живых клетках, заставляя их синтезировать вирионы, которые содержат геном вируса и способны перемещать его в другие клетки.

Вирусоид (сателлит) – вироид-подобная молекула РНК (около 1000 нуклеотидов), которая зависит от присутствия в клетке другого реплицирующегося вируса (помощник), поставляющего сателлиту свой капсид для упаковки РНК. Все изученные к настоящему времени вирусоидные РНК обладают рибозимной активностью.

Вирус-помощник – вирус, геном которого содержит информацию, необходимую для размножения вирусоида (сателлита).

Восприимчивость (чувствительность) – способность клетки или многоклеточного организма заражаться тем или иным вирусом.

Ганцикловир – производное ацикловира, которое токсичнее последнего, но проявляет высокую активность по отношению к цитомегаловирусу.

Гель-фильтрация – метод очистки вирусов, основанный на различной скорости перемещения в геле частиц, имеющих разные размеры.

Гемагглютенация – явление склеивания эритроцитов вирусами, которые имеют на своей поверхности гемагглютенины.

Гемагглютенин – белок (гликопротеид), формирующий «шипы» на поверхности некоторых вирионов. Выполняет функцию антирецептора.

Обеспечивает адгезию вируса к мерцательному эпителию дыхательных путей и склеивание (агглютенацию) эритроцитов.

Генная инженерия – раздел биотехнологии, который разрабатывает методы создания искусственных рекомбинантных ДНК, используемые для получения организмов со смешанными геномами.

Геном (вирусный) – совокупность генетической информации, которая закодирована в ДНК, либо в РНК вируса. Геном может быть монолитным (представлен одной молекулой нуклеиновой кислоты), фрагментированным (состоит из нескольких сегментов, которые несут одинаковую или различную информацию).

Одноцепочечные РНК-геномы имеют две полярности:

позитивную (+), если последовательность нуклеотидов представлена нуклеотидными триплетами, кодирующими последовательность аминокислот в белках, и негативную (–), которая комплементарна (+)РНК.

Дезоксирибонуклеаза – фермент, который гидролизует молекулы ДНК. Препараты дезоксирибонуклеазы используют для лечения герпетического стоматита (в форме полоскания), герперических и аденооовирусных кератитов (в виде капель).

Дидезоксинуклеозиды (дидезоксиинозин - ddI; дидезоксиаденозин – ddA; дидезоксицитидин – ddC, замицит) – препараты на основе модифицированных нуклеозидов, используемые для терапии СПИДа.

Зидовудин (азидотимидин; AZT) – противовирусный препарат, структура которого напоминает тимидин. Используется для комплексной терапии СПИДа.

Иммуноглобулины (Ig)- белковая фракция крови, содержащая Ат. По составу иммуноглобулинов можно судить о присутствии в организме того или иного возбудителя, а также о том, какой срок прошёл после его внедрения. Обычно иммуноглобулины класса М (IgМ) вырабатываются организмом вскоре после вторжения возбудителя, но они и рано исчезают из крови, поэтому IgМ считают маркерами острой инфекции (либо признаком обострения хронической инфекции). Иммуноглобулины класса G (IgG) начинают синтезироваться организмом значительно позже, но и вырабатываются очень долго (именно они отвечают за долговременный иммунитет). Обнаружение специфических для какого-либо возбудителя IgG считают признаком того, что организм с данной инфекцией уже встречался.

Соответственно, одновременное обнаружение IgG и IgМ - признак обострения хронической инфекции.

Интеграция – процесс включения ДНК вируса в хромосомную ДНК клетки-хозяина. Характерна для ретровирусов, умеренных (лизогенных) фагов, вируса гепатита В Интерферон – гормоноподобный белок, вырабатываемый клетками позвоночных в ответ на вирусную инфекцию или воздействие различных индукторов.

Выделяют три типа интерферонов:

-, или лейкоцитарный (продуцируется лейкоцитами); -, или фибробластный (продуцируется фибробластами); и -, или иммунный (продуцируется естественными киллерами и Т-лимфоцитами).

Интерфероноген (индуктор интерферона) – фактор, который индуцирует образование интерферона клетками позвоночных. Из природных факторов таким свойством обладают вирусы и некоторые другие микроорганизмы, нуклеиновые кислоты, полисахариды, полифенолы. Из синтетических соединений интерферон индуцируют полифосфаты, основные красители, поликарбоксилаты. Самым мощными индукторами интерферона являются двухцепочечные вирусные РНК.

Инфекция (вирусная) – процесс взаимодействия вирусов и чувствительных к ним клеток. Выделяют острую и хроническую продуктивную (литическую) инфекцию, которая завершается образованием нового поколения вирионов и (часто) гибелью клетки; абортивную инфекцию и вирогению (интегральную инфекцию), при которой геном вируса встраивается в геном клетки-хозяина.

Капсид – белковая оболочка вириона. Состоит из капсомеров с использованием спирального или икосаэдрического типа симметрии.

Стабилизирует геном и защищает его от неблагоприятных внешних воздействия. Кроме того (у простых вирусов) выполняет антирецепторную и ферментативную функции.

Капсомер – морфологическая единица капсида.

Кеп – (буквально, шапочка, колпачок) – нуклеотидная структура на 5’концах мРНК многих эукариотических клеток и некоторых вирусов; состоит из N7-метилгуанозина, 5’-гидроксил которого соединен через трифосфатную группировку с 5’-гидроксилом последнего нуклеозида.

Керецид (йоддезоксиуридин, ИДУ) – модифицированный аналог тимидина, угнетающий репродукцию ДНК-содержащих вирусов.

Используется наружно для терапии герпетических кератитов.

Константа седиментации – частное от деления скорости осаждения частиц (v) в гравитационном поле на центробежное ускорение (c). Обычно выражают в единицах Сведберга (S), равных скорости седиментации в воде при 20оС при бесконечном разведении под влиянием единицы центробежной силы. Используют для идентификации вирусов и анализа чистоты вирусных препаратов.

Ламивудин (2’,3’-дидезокси-3’-тиоцитидин; ЗТС) – противовирусный препарат. Аналог зидовудина, проявляющий с ним синергическое действие, т.к. сочетанное применение обусловливает лучший эффект у больных СПИДом.

Латентная инфекция – инфекция, при которой вирус находится в организме хозяина в скрытой форме; он выделяется при этом из организма с перерывами, обычно связанными с рецидивами болезни.

Латентный период – период времени от начала инфекции клетки до первого появления вне ее новых вирусных частиц.

Лизогения – сосуществование генома бактерии и умеренного фага в виде единой хромосомы, которая наследуется дочерними клетками, с возможностью высвобождения фагового генома, развития и размножения фага с последующим лизисом бактерии.

Лизоцим (КФ 3.2.1.17) – фермент (гидролаза), разрушающий клеточные стенки некоторых бактерий. Фермент типа лизоцима находится на конце отростка, через который фаг инъецирует нуклеиновую кислоту в бактериальную клетку.

Медленная (вирусная) инфекция – инфекция, характеризующаяся очень длительным инкубационным периодом, который может измеряться месяцами и годами.

Нейраминидаза – фермент, который отщепляет Nацетилнейраминовую кислоту от гликопротеидов в составе оболочек клеток животных, тем самым нарушая их проницаемость. Находится в составе некоторых вирусов (напр., вируса гриппа) и способствует выходу зрелых вирионов из клетки-хозяина.

Нуклеоид – генетический аппарат вирусов. Представлен одной целой или фрагментированной молекулой одноцепочечной или двухцепочечной РНК либо ДНК. У некоторых вирусов имеются два идентичных генома.

Нуклеиновая кислота в составе нуклеоида часто связана с положительно заряженным внутренним белком.

Нуклеокапсид – упорядоченный комплекс генома вируса с капсидом.

Обратная транскриптаза (ревертаза) – фермент (РНК-зависимая ДНК-полимераза), который осуществляет синтез копии ДНК на РНК.

Встречается у некоторых РНК-содержащих вирусов, которые имеют одноцепочечный негативный геном. Обеспечивает возможность интеграции генетического материала таких вирусов в хромосомную ДНК клеткихозяина.

Онкогенность - способность вызывать злокачественное перерождение, рак.

Пандемия – эпидемия, охватывающая значительную часть населения страны, группы стран, континента.

Паразитизм вирусов – вирусы являются облигатными внутриклеточными паразитами, что обусловлено отсутствием у них систем синтеза белка и генерации энергии.

Парентеральный - механизм передачи инфекции, когда она внедряется в организм, минуя желудочно-кишечный тракт, т.е. через кровь (в том числе при многоразовом использовании шприца).

Пенетрация (проникновение) – ранняя стадия вирусного репликационного цикла, на котором вирион (или вирусный геном) проникает в клетку-хозяина.

Пермиссивная клетка – клетка, способная обеспечить продуктивную инфекцию вируса.

Персистентная инфекция – инфекция, при которой инфекционный вирус выделяется из организма-хозяина в течение значительно большего, чем при обычной инфекции, периода.

Плазмида – необязательный экстрахромосомальный генетический элемент клетки, способный к автономной (независимо от хромосомы) репликации.

Полипротеин – крупный, функционально неактивный белок, который расчленяется специфическими протеазами с образованием нескольких более мелких (функционально активных) белков.

Прион – молекула белка (PrPSc), способная через взаимодействие с другой белковой молекулой передавать последней свое конформационное состояние. Считается, что прионы ответственны за ряд нейродегенеративных инфекций у людей и животных.

Провирус – геном ДНК-содержащего вируса или ДНК-копия РНКсодержащего вируса, которые интегрированы в хромосомную ДНК клеткихозяина. Возникновение провирусов характерно для умеренных фагов, онкогенных и некоторых вирулентных вирусов (напр., ВИЧ, вирус гепатита В).

ПЦР - полимеразная цепная реакция. Молекулярно-биологический метод, выявляющий наличие специфических участков ДНК и РНК.

Представляет собой циклический процесс увеличения в геометрической прогрессии числа копий ограниченного синтетическими олигонуклеотидами (праймерами) определенного фрагмента ДНК, протекающий под воздействием ДНК-полимеразы. Используется, в частности, для обнаружения возбудителей различных заболеваний. Отличается исключительно высокой чувствительностью и специфичностью. Оказалась настолько значимой для медицины и биологии, что в 1993 г. за разработку этого метода Кэри Б.

Мюллис был удостоен Нобелевской премии.

Раздевание (вируса) – стадия вирусной инфекции, которая следует за проникновением вируса в клетку-хозяина и состоит в распаде вириона на составные части под действием хозяйских протеаз.

Рекомбинантный - созданный методами генной инженерии.

Ремантадин – противовирусный препарат близкий по химической структуре к амантадину. Активен в отношении вируса гриппа А.

Рецептор – белок поверхности клетки, который специфически связывается с вирусным антирецептором, после чего происходит проникновение вируса в клетку.

Сборка (вируса) – поздняя стадия вирусной инфекции, во время которой все компоненты, необходимые для образования зрелого вируса, собираются в определенном месте клетки, формируя вирусную частицу.

Сегментированный геном – геном, который состоит из нескольких молекул вирионной нуклеиновой кислоты.

Серотип - подвид какого-либо микроорганизма, отличающийся от других представителей своего вида особыми антигенными свойствами.

Скрининг (screening - просеивание) – первичный отбор. Иными словами, массовое предварительное обследование, использующее относительно недорогие и нетрудоёмкие технологии. Обычно не отличается высокой точностью и для достоверности результата данные, полученные при скрининге, проверяются более сложными и дорогостоящими методами.

Созревание (вируса) – фаза вирусной инфекции (между фазой эклипса и выходом вирионов из клетки), во время которой в клетке нарастает титр инфекционных вирусных частиц.

Ставудин (d4T; 2’,3’-дидегидро-2’,3’-дидезокситимидин) – антивирусный препарат, аналог тимидина. Механизм действия подобен таковому у AZT, но переносится больными легче, из-за меньшей токсичности.

Тип симметрии – способ упаковки капсомеров в капсиде. При этом различают спиральный, икосаэдрический и смешанный типы симметрии.

При спиральном типе капсомеры укладываются вдоль линейно вытянутой молекулы нуклеиновой кислоты. При икосаэдрическом – они формируют многогранник типа икосаэдра. При смешанном типе симметрии (напр., фаги) капсид формируется с использованием обоих указанных выше типов симметрии.

Трансдукция – опосредуемый бактериофагами перенос генетического материала бактерий от одной клетки к другой.

Транскрипция – процесс переноса генетической информации с генома на мРНК. Осуществляется ДНК-зависимой РНК-полимеразой (у ДНКсодержащих вирусов) и РНК-зависимой РНК-полимеразой (у (-)РНКгеномных вирусов. У (+)РНК-геномных вирусов геномная РНК сама выполняет функции мРНК.

Трансляция – процесс формирования полипептидной цепочки на ассоциированной с рибосомами мРНК.

Трифтортимидин (ТФТ) – противовирусный препарата, аналог тимидина с высокой степенью селективного воздействия на ДНКсодержащие вирусы (герпеса, аденовирусов, оспы).

Тропизм вируса – спектр клеток-хозяев данного вируса. Может быть представлен каким-либо одним (монотропизм) или несколькими (пантропизм) типами клеток. Обусловлен тем, что для первого (и обязательного) этапа в цикле размножения вируса – прикрепления к клеточной мембране – необходима комплементарность рецептора клетки с антирецептором вируса.

Ультрафильтрация (вирусов) – фильтрование вирусной суспензии через мелкопористые мембранные фильтры. Используется для концентрирования, очистки и определения размеров вирионов, а также для освобождения вирусной субстанции от бактерий и более крупных частиц.

Ультрацентрифугирование – центрифугирование при центробежных скоростях порядка 100 тыс. g выше. Используется для очистки вирусов, определения константы седиментации и плавучей плотности вирионов.

Фаза выхода – поздняя фаза вирусной инфекции, во время которой вновь синтезированные вирионы покидают клетку-хозяина.

Фекально-оральный - механизм проникновения возбудителя из кишечника больного (через грязную почву, немытые руки, воду и продукты питания) через рот в организм другого человека.

Химиотерапия (вирусных инфекций) – самостоятельный раздел вирусологи, основной задачей которого является поиск, испытания и отбор новых противовирусных лекарственных средств синтетического или природного происхождения.

Цитоплазма - всё внутреннее содержимое клетки, за исключением ядра. В цитоплазме содержатся органеллы и включения.

Штамм – клоновая (из одной клетки) по происхождению культура микроорганизма, генетическая однородность которого по какому-либо признаку поддерживается искусственным путем.

Эклипс-фаза – период времени от проникновения вируса в клеткухозяина до появления в ней зрелых вирусных частиц нового поколения.

Экспрессия (гена) - проявление, реализация заключённой в нём генетической информации. Чаще всего осуществляется посредством синтеза специфических белков, состав которых закодирован в гене.

Эпидемия – массовое распространение инфекционного заболевания человека в какой-либо местности, стране, значительно превышающее обычный уровень заболеваемости.

Предметный указатель А Абортивная инфекция, 38, 157, 160 Агглютинация, 42, 157 Адсорбция (прикрепление) вируса, 23, 27, 41, 42, 157 Адьювант, 78, 157 Азидотимидин (зидовудин), 104, 105, 106, 149, 152, 159, 163 Амантадин, 97, 116, 117, 118, 157 Антиген(ы), 67, 78, 79, 81, 112, 113, 114, 117, 119, 120, 121, 125, 128, 129, 131, 134, 137, 143, 144, 153, 157 антигенный дрейф, 120, 157 антигенный шифт, 120, 157 Антирецептор, 36, 41, 43, 56, 94, 95, 96, 127, 144, 148, 157, 159, 160, 162, 163 Антитело, 56, 79, 80, 81, 82, 83, 88, 96, 116, 122, 124, 125, 133, 137, 144, 147, 153, 157 Аттенуация, 157 аттенуированные вакцины, 6, 78, 80 аттенуированные вирусы, 77 Ацикловир, 103, 108, 110, 142, 157, 159 Б Бактериофаг (фаг), 6, 7, 14, 26, 32, 36, 38, 40, 65, 157, 158, 163 БВДУ, 5, 102, 103, 141, 142 Бляшка (негативная колония), 88, 89, 157 В Вакцина, 79, 81, 82, 110, 135, 158 живая аттенуированная, 80 живая рекомбинантная, 81 против бешенства, 6, 80 против гепатита А против гепатита В, 79, 81, 82 против кори, 79, 80 против краснухи, 80 против полиомиелита, 80 против свинки, 80 субклеточная, 78 убитая (инактивированная), 80 Вакцинный штамм, 6, 76 Вакцины, 75, 78, 79, 80 Видарабин, 100, 158 Виразол (рибавирин), 84, 99, 107, 108, 118, 135 Вирион(ы), 11, 12, 31, 35, 40, 50, 56, 112, 115, 120, 125, 138, 158, 162 архитектоника, 2, 32 измерение плотности, 20, 25 очистка, 20, 21, 159 свойства, 20 Вирогения, 158 Вироид, 7, 65, 66, 67, 68, 129, 158 Виропексис, 158 Вирулентность, 158 Вирулицидные препараты, 93 госсипол, 93, 94 оксолин, 93, 110, 118 теброфен, 93 Вирус простого герпеса (ВПГ), 5, 16, 98, 100, 101, 102, 103, 104, 136, 137, 138, 139, 140, 142 геном, 137 Вирус табачной мозаики (ВТМ), 5, 7, 8, 22, 29, 33, 35, 38 Вирусные гепатиты, 122, 155 гепатит D (ВГD), 5, 67, 129, 130, 131 гепатит А (ВГА), 5, 122, 123, 124 гепатит В (ВГВ), 5, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133 гепатит С (ВГС), 5, 131, 132, 133, 134, 135, 136 Вирусоид, 7, 158 Вирусы, 3, 11, 13, 15, 17, 18, 22, 23, 38, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 64, 113, 119 классификация и номенклатура, 17, 19 открытие, 6 природа, 11 происхождение, 12 ВИЧ-инфекция, 143, 145, 147, 155 морфология, 144 патогенез, 147 химиотерапия, 149 ингибиторы ревертазы, 149 эпидемиология, 145 этиология, 143 Восприимчивость, 124, 159 Выделение и очистка вирусов (методы), 20 гель-фильтрация, 26 гомогенизация клеток, 21 дифференциальное центрифугирование, 23 ионообменная хроматография, 27 лизис клеток, 38 обработка клеток ультразвуком, 21 осаждение спиртами, 22 ультрафильтрация, 23, 163 центрифугирование в градиенте плотности, 24 Г Ганцикловир, 104, 159 Гель-фильтрация, 20, 26, 159 Гемагглютинин, 42, 112, 159 Генная инженерия, 11, 78, 79, 158, 159, 162 Геном (вирусный), 51, 66, 120, 126, 129, 131, 159 сегментированный, 48, 50, 54, 159, 163 Генотерапия, 153 Герпесвирусы, 17, 40, 41, 44, 55, 94, 136, 137, 138, 158 классификация, 112, 136 репликация, 46 структура, 137 экспрессия генов, 55 Герпетичесая инфекция, 136 Герпетическая инфекция, 136, 138 менингит, 140, 141 офтальмогерпес (кератиты), 85, 140 патогенез, 138 профилактика и лечение, 141 энцефалиты, 140 эпидемиология, 138 этиология, 136 Грипп, 4, 17, 26, 27, 41, 42, 62, 79, 81, 82, 85, 93, 96, 97, 112, 113, 114, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 144, 155, 157, 161, 162 лечение и профилактика, 116 патогенез, 114 характеристика возбудителя, 112 вирус гриппа А, 113 вирус гриппа В, 113 вирус гриппа С, 113 система кодирования, 113 структура вириона, 112 Группы Балтимора, 16, 31, 46 Д Дезоксирибонуклеаза, 97 Дидезоксинуклеозиды, 159 дидезоксиинозин, 106, 159 ДНК-вакцина, 79, 153 ДНК-содержащий вирусы, 13, 17, 38, 59, 89, 101, 126, 130, 160, 163 классификация, 17 Ж Живые вирусные вакцины, 77 аттенуированные, 76 рекомбинантные, 78 З Зидовудин (азидотимидин AZT), 99, 104, 149, 159, 161 И Икосаэдрический капсид, 33 число триангуляции, 36 Иммунизация, 82, 83 нормальным иммуноглобулином, 82 пассивная, 82 специфическим иммуноглобулином, 83 Иммуноглобулин G, 5, 159 Иммуноглобулин M, 5, 62, 159 Иммуноглобулин А, 5 Интеграция, 160 Интерферон, 58, 59, 60, 75, 160 индукция, 57 механизм действия, 60, 118 продукция, 57, 58 типы, 58 эффекты, 134 Инфекции (вирусные) абортивные, 157, 160 иммунопрофилактика, 152 иммунотерапия, 75 латентные, 136, 139 медленные, 39 персистентные, 38 продуктивные, 42, 160, 162 химиотерапия, 74, 91 К Капсид, 31, 36, 122, 160 икосаэдрический, 137, 163 спиральный, 35, 163 Капсомер, 31 Керецид (йоддезоксиуридин ИДУ), 160 Классификация (вирусов), 15, 17 группы Балтимора, 46, 123 Константа седиментации, 23, 24, 160 Л Ламивудин (2’,3’-дидезокси-3’ тиоцитиидин 3ТС), 106, 128, 150, 161 Латентная инфекция, 38, 139, 161 Латентный период, 39, 161 Лизогения, 38, 158, 161 Лизоцим, 44, 161 Литическая (продуктивная) инфекция, 38, 160 стадии цикла, 39 М Матриксный белок, 36 Медленные инфекции, 39 Мишени для антивирусных препаратов, 145 мРНК, 9, 31, 45, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 58, 60, 107, 109, 115, 122, 131, 138, 149, 154, 160, 163 Н Невирапин, 106 Нейраминидаза, 42, 112, 161 Нуклеиновые кислоты (вирусов), 7, 9, 10, 17, 22, 29, 31, 32, 36, 55, 59, 66, 68, 69, 78, 89, 91, 97, 99, 157, 159, 160, 163 Нуклеоид, 7, 158, 161 Нуклеокапсид, 112, 161 Нуклеопротеин, 36, 144 Нуклеотиды, 58, 85, 143, 154 О Обратная транскриптаза (ревертаза), 51, 106, 144, 161 Онкогенные вирусы, 17 Ортомиксовирусы, 17 П Пандемия, 114, 119, 120, 121, 156, 161 Паразитизм (вирусов), 11, 67, 161 Парентеральный механизм передачи инфекции, 162 Пассивная иммунизация, 82 Пенетрация (проникновение вируса в клетку), 162 слияние мембран, 44 Пермиссивность, 41, 162 Персистентная инфекция, 162 Полипротеин, 46, 49, 123, 162 Прион, 7, 67, 68, 70, 72, 74, 162 Провирус, 52, 148, 149, 162 Р Раздевание (вируса), 45, 60, 94, 162 Ребетрон, 84, 135 Ревертаза (обратная транскриптаза), 53, 144 Рекомбинантные интерфероны, 83 Ремантадин, 97, 118, 162 Репликативный цикл (вируса) адсорбция, 27, 41, 157 раздевание, 45, 60, 94 репликация генома, 109 сборка, 55, 56 созревание, 52, 56, 109 экспрессия генов, 45 Рецепторы, 41, 42, 94, 127 вирусов, 157 хемокинов, 147 Рибавирин (виразол), 99, 107, 118, 158 РНК (вирусные), 5, 7, 8, 9, 11, 17, 18, 29, 31, 35, 36, 41, 45, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 59, 60, 62, 63, 65, 66, 67, 78, 85, 89, 91, 97, 98, 99, 106, 107, 112, 113, 115, 120, 122, 124, 126, 129, 130, 131, 132, 134, 135, 138, 143, 144, 148, 149, 158, 159, 160, 161, 162, 163 двухспиральные, 63 РНКаза-L, 60 РНКаза-Н, 51, 144, 148 РНК-содержащие вирусы, 9, 11, 17, 31, 89, 97, 120, 131, 143, 158, 161, 162 классификация, 17 репликация, 41, 46, 109 С Сборка (вирионов), 55 Седиментация константа седиментации, 23, 24 созревание (вирусов), 52, 56, 109 Т Терапия вирусных инфекций, 131 Транскрипция, 47, 163 каскадная, 47 Трансляция, 163 Трансмембранные гликопротеин, 36, 159 Трансмиссивные спонгиоформные энцефалиты, 67 животных, 67 человека, 67 Трифтортимидин (ТФТ), 101, 163 Тропизм (вирусов), 163 У Ультрафильтрация, 23, 163 Ультрацентрифугирование, 24, 164 в градиентах плотности, 24 дифференциальное, 20 Х Химиотерапевтический индекс, 87 Химиотерапия (вирусных инфекций), 86, 91, 142, 149, 164 Ш Штамм, 8, 9, 70, 72, 76, 80, 81, 95, 103, 108, 109, 112, 118, 120, 136, 150, 151, 152, 164 вакцинный, 76 Э Эволюция вирусов, 13 Эклипс-фаза, 164 Экспрессия генов, 54 Эндоцитоз, 138 Эпидемия, 119, 146, 164

ОГЛАВЛЕНИЕ

ПРЕДИСЛОВИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ГЛАВА 1.

ВВЕДЕНИЕ. НАУКА ВИРУСОЛОГИЯ.

ОБЩИЕ ВОПРОСЫ

1.1. Зачем необходимо изучать вирусы

1.2. Природа вирусов

1.3. Происхождение вирусов

1.4. Эволюция вирусов

1.5. Классификация и номенклатура вирусов

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

ГЛАВА 2.

СВОЙСТВА ВИРИОНОВ

2.1. Выделение и очистка вирусов

2.1.1. Выделение вирусов из зараженных клеток

2.1.2. Концентрирование и очистка вирусов

2.1.3. Критерии чистоты вирусных препаратов

2.2. Структурно-функциональная организация вирионов

2.2.1. Химический состав вирусов

2.2.2. Принципы вирусной архитектоники

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

ГЛАВА 3.

ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ВИРУСА

С КЛЕТКОЙ-ХОЗЯИНОМ

3.1. Типы взаимодействия вируса с клеткой

3.2. Общая характеристика продуктивного процесса

3.3. Этапы взаимодействия вируса с клеткой-хозяином

3.3.1. Прикрепление вируса к клетке

3.3.2. Проникновение вируса в клетку

3.3.3. Раздевание вируса

3.3.4. Стратегия репликации генома и экспрессия генов

3.3.5. Сборка вирионов

3.3.6. Созревание и выход вирионов из клетки

3.4. Система интерферона

3.4.1. Основные биологические свойства интерферонов

3.4.2. Механизмы действия интерферона

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

ГЛАВА 4.

ВИРУСОПОДОБНЫЕ

ИНФЕКЦИОННЫЕ АГЕНТЫ

4.1. Сателлиты и вироиды

4.2. Прионы

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

ГЛАВА 5.

ТЕРАПИЯ И ПРОФИЛАКТИКА

ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ

5.1. Вакцинотерапия и вакцинопрофилактика

5.1.1. Типы вакцин

5.1.2. Вакцины, находящиеся в употреблении в настоящее время.............. 79

5.2. Клиническое применение интерферона

5.3. Химиотерапия вирусных инфекций

5.3.1. Разработка и испытания противовирусных препаратов

5.3.2. Успехи химиотерапии

5.3.2.1. Вирулицидные препараты

5.3.2.2. Препараты, ингибирующие адсорбцию, проникновение и раздевание вирусов

5.3.2.3. Препараты, ингибирующие синтез вирусных нуклеиновых кислот

5.3.2.4. Ингибирование экспрессии вирусных генов

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

ГЛАВА 6.

ОСНОВНЫЕ СОЦИАЛЬНО-ЗНАЧИМЫЕ

ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ И БОРЬБА С НИМИ

6.1. Грипп (influenza)

6.1.1. Характеристика возбудителя

6.1.2. Патогенез

6.1.3. Лечение и профилактика гриппа

6.1.4. Угроза пандемии и перспективы создания противогриппозной вакцины

6.2. Вирусные гепатиты (hepatitis virosa)

6.2.1. Вирусный гепатит А

6.2.2. Вирусный гепатит Е

6.2.3. Вирусный гепатит В

6.2.4. Вирусный гепатит D

6.2.5. Вирусный гепатит С

6.3. Герпетическая инфекция (herpes simplex)

6.3.1. Характеристика возбудителя

6.3.2. Патогенез

6.3.3. Профилактика и лечение герпетической инфекции

6.4. ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ/СПИД

6.4.1. Общие вопросы

6.4.2. Эпидемиология

6.4.3. Патогенез

6.4.4. Химиотерапия ВИЧ-инфекции

6.4.5. Перспективы борьбы с ВИЧ-инфекцией

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

СПРАВОЧНИК ОСНОВНЫХ ТЕРМИНОВ

Предметный указатель



Pages:     | 1 | 2 ||
Похожие работы:

«Вып. 16. Саранск; Пушта, 2016 НОВЫЕ И ИНТЕРЕСНЫЕ НАХОДКИ ОС (INSECTA, HYMENOPTERA) В МОРДОВСКОМ ЗАПОВЕДНИКЕ А.Б. Ручин1, А.В. Антропов2 Мордовский государственный природный заповедник имени П.Г. Смидовича e-mail: sasha_ruchin@rambler.ru Зоологический музей Москогс...»

«Экономика и экология территориальных образований. №2, 2016 ISSN 2413-1474 УДК 501.643 НЕКОТОРЫЕ НОВАЦИИ В СИСТЕМЕ ГОСУДАРСТВЕННОЙ РЕГИСТРАЦИИ ПРАВ И ГОСУДАРСТВЕННОГО КАДАСТРОВОГО УЧЕТА Е.Н. Кадырова До...»

«УДК 576.8.07(597) К ИЗУЧЕНИЮ ПАРАЗИТОФАУНЫ РЫБ ОЗЕРА ТУРГОЯК В. А. Ткачев e-mail: valizer@imin.urc.ac.ru Ильменский государственный заповедник ЧНЦ УрО РАН, г. Миасс, Россия ВВЕДЕНИЕ Озеро Т...»

«"ПЕДАГОГИКО-ПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ И МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ ФИЗИЧЕСКОЙ КУЛЬТУРЫ И СПОРТА" Электронный журнал Камского государственного института физической культуры Рег.№ Эл №ФС77-27659 от 26 марта 2007г №6 (1/2008) Организация питания в скоростно-силовых и силовых видах спорта Заместитель генер...»

«2012.03.038 природой изучаемых феноменов. Исследователям разных специальностей есть что сказать не только друг другу, но и выразить коллективное мнение о социальных и культурных проблемах всему миру пол...»

«ХИМИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. 2011. №2. С. 57–64. УДК 661.185 ВЛИЯНИЕ ИОННОЙ СИЛЫ РАСТВОРА НА КОМЛЕКСООБРАЗОВАНИЕ СУЛЬФОПРОИЗВОДНЫХ БИОПОЛИМЕРА ЛИГНИНА И ХИТОЗАНА И.А. Паламарчук, О.С. Бровко*, Т.А. Бойцова, А.П. Вишнякова, Н.А. Макаревич © Институт экологических проблем Севера УрО РАН...»

«Казарьян Константин Александрович Биохимические и иммунологические свойства белков семейства Rpf – факторов роста Micrococcus luteus и Mycobacterium tuberculosis 03.00.04 – Биохимия Ав...»

«№ 1-2 (4) 2014 год Эколого-просветительская газета государственного природного заповедника "Полистовский" ПОЛИСТОВСКАЯ ПРАВДА Все, что вы хотели знать о Полистовском заповеднике "Летучие...»

«Моросанова Мария Александровна Механизмы повреждения клеток эпителия почечных канальцев при моделировании пиелонефрита in vitro 03.03.04 клеточная биология, цитология, гистология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук МОСКВА Работа выполнена на факультете биоинженерии и биоинф...»

«Сценарий урока "Планктонные организмы Черного моря". Учитель: Новоселова Ирина Анатольевна, учитель биологии МОУ СОШ №86. Класс: 6. Цель работы: знакомство с планктонными организмами Черного моря путем создания моделей и мик...»

«ФЕДЕРАЛЬНОЕ КОСМИЧЕСКОЕ АГЕНТСТВО РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИСПЫТАТЕЛЬНЫЙ ЦЕНТР ПОДГОТОВКИ КОСМОНАВТОВ имени Ю.А. ГАГАРИНА" УЧРЕЖДЕНИЕ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НА...»

«ГАЗОВАЯ ОТРАСЛЬ ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТИ, ЕЁ ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ Горягина А.С. Данилова А.В. Оренбургский государственный университет, г. Оренбург Газовая отрасль в Оренбургской области возникла не давно и за короткий срок стала одной из ведущих в её промышленности. Она во многом принесла массу экономических преимуществ,...»

«О. Н. Погорелая УДК 504:911.372.6 (470.324) О. Н. Погорелая О МЕТОДАХ И ПРИЕМАХ ЭКОЛОГИЧЕСКОГО ЗОНИРОВАНИЯ ГОРОДСКИХ ТЕРРИТОРИЙ Обсуждаются понятийно-терминологический аппарат, методы и кри...»

«ВОСТОЧНОЕВРОПЕЙСКИЙ БОТАНИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК. 2007. № 2. С.181-227. УДК 581.9 (471.56) РАСТИТЕЛЬНОСТЬ КАМЕНИСТОЙ СТЕПИ ЖИГУЛЕВСКИХ ГОР СИСТЕМАТИЧЕСКИЙ ПЕРЕЧЕНЬ ВИДОВ ФЛОРЫ Л.М. Черепнин * ПРЕДИСЛОВИЕ РЕДАКТОРА Начиная с этого номера, мы начинаем публиковать рукопись диссерт...»

«Румянцев Е. А. О некоторых эколого-фаунистических особенностях паразитов рыб крупных олиготрофных озер Карелии // Принципы экологии. 2014. № 2. С. 56–59. DOI: 10.15393/j1.art.2014.3581 научный электронный журнал ПРИНЦИПЫ ЭКОЛОГИИ http://ecopri.ru http://p...»

«Секция 1: Экологические основы прогрессивных технологий 6. Сеитбурханов А.Г. Научно-методические основы сохранения водных, земельных и биологических ресурсов Кыргызстана // Синергия. 2015. № 2. С. 53-62.7. Шароховская И.М. Система управления отходами // Рециклинг отходов. 2008. № 1 (13). С. 54...»

«Утверждаю: Директор МБУ ГДК _Зеленова Н.В. ПОЛОЖЕНИЕ о проведении I городского открытого экологического фестиваля "Под крышей дома голубой"1. Общие положения 1.1. Настоящее положение определяет условия, порядок организации и проведения I городского открытого эко...»

«УДК 528+550. 837+553.98 С.П. Левашов 1,2, Н.А. Якимчук 1,2, И.Н Корчагин 3, Ю.М. Пищаный 1, В.Г. Бахмутов 3, В.Д. Соловьев 3, Д.Н. Божежа 2 1 Институт прикладных проблем экологии, геофизики и геохимии, Киев. 2 Центр менеджмента и маркетинга в области наук о Зе...»

«НОВОСТИ РОССИЙСКОГО ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВА ВАЖНЫЕ СОБЫТИЯ, НОВЫЕ ДОКУМЕНТЫ, ЗАКОНОПРОЕКТЫ, ЗАКОНОДАТЕЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ по состоянию на 12 июля 2016 года ••••••••••••••••••••••••••••• НОВОСТИ ДЛЯ ЮРИС...»

«ФИЛОСОФСКИЕ НАУКИ УДК 172 Бородин Евгений Андреевич Borodin Evgeny Andreyevich аспирант кафедры философии PhD student, Philosophy Department, Ивановского государственного университета Ivanovo State University НООСФЕРНОЕ ПРАВО: ФИЛОСО...»

«Самарская Лука: проблемы региональной и глобальной экологии. 2015. – Т. 24, № 3. – С. 193-196. УДК 598. 2 НОВЫЙ ДЛЯ САМАРСКОЙ ОБЛАСТИ ВИД ОРНИТОФАУНЫ – КРЕЧЕТ (Falco rusticolus Linnaeus, 1758) © 2015 В.Г. Шве...»

«РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК БИОРАЗНООБРАЗИЕ И ЭКОЛОГИЯ ПАРАЗИТОВ НАЗЕМНЫХ И ВОДНЫХ ЦЕНОЗОВ Москва 2008 РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТ ПРОБЛЕМ ЭКОЛОГИИ И ЭВОЛЮЦИИ им. А.Н. СЕВЕРЦОВА РАН, ЦЕНТР ПАРАЗИТОЛОГИИ НАУЧНЫЙ СОВЕТ ПО ПРОБЛЕМАМ ПАР...»

«ISSN 0869-4362 Русский орнитологический журнал 2011, Том 20, Экспресс-выпуск 687: 1803-1811 Новый подвид серого журавля Grus grus korelovi ssp. n. (Aves: Gruidae) из Центрального и Восточного Тянь-Шаня В.Ю.Ильяшенко, О.В.Белялов Валентин Юрьевич Ильяшенко. Институт проблем экологи...»

«Несговорова Наталья Павловна ПОДГОТОВКА К ЭКОЛОГО-ПЕДАГОГИЧЕСКОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ В СИСТЕМЕ НЕПРЕРЫВНОГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ 13.00.02 – Теория и методика обучения и воспитания (естество...»

«Остроумов С.А. Концепции экологии экосистема, биогеоценоз, границы экосистем: поиск новых определений // Вестник МГУ. Серия 16. Биология. 2003. № 3. С.43-50. Табл. Рез. на англ. яз. Библиогр. 44 назв. [Нов. трактовка, нов. варианты определений. Перечисляются и обосновываются отличия новых опреде...»

«МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГБОУ Московский государственный университет технологий и управления имени К.Г. Разумовского Кафедра "Технология хлебопекарного, макаронного и кондитерского производств" НАУЧНАЯ ШКОЛА "Производство нового поколения экологически чистых продуктов функц...»

«2 ОГЛАВЛЕНИЕ Стр. ВВЕДЕНИЕ.. 4 Глава 1. ГЕОЭКОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ СЕЙСМИЧЕСКОЙ ОПАСНОСТИ И РИСКА. ПРОБЛЕМЫ И РЕШЕНИЯ. 11 1.1. Анализ литературных данных и постановка задачи. 11 1.2. Исходные материалы и методика исследований. 26 1.3. Основные выводы.. 35 Глава 2. РЕГИОНАЛЬНЫЕ И ЛОКАЛЬНЫЕ МОДЕЛИ И ОЦЕНКИ Д...»

«1. Вольф Бавария 2. Основы звукоизоляции 3. Инструкция по монтажу 4. PhoneStar на полу 5. PhoneStar на стене 6. PhoneStar на потолке Промышленная звукоизоляция 7. Материалы и комплектующие 8. Сертификаты 9. special Инструкция по монтажу Общая информация PhoneStar – инновационная звукоизоляционная...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное автономное учреждение высшего профессионального образования Казанский (Приволжский) федеральный университет Институт управления, экономики и финансов Центр магистратуры У...»








 
2017 www.net.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные матриалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.