WWW.NET.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Интернет ресурсы
 

«УДК 633.88 АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ ЭКСТРАКТОВ CALENDULA OFFICINALIS L. © П.Б. Лубсандоржиева Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, ул ...»

ХИМИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. 2009. №4. С. 123–126.

УДК 633.88

АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ ЭКСТРАКТОВ CALENDULA

OFFICINALIS L.

© П.Б. Лубсандоржиева

Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, ул Сахьяновой, 6,

Улан-Удэ, 670047 (Россия) E-mail: bpunsic@mail.ru

Определены содержание биологически активных веществ и антиоксидантная активность экстрактов из цветков

Calendula officinalis L. Экстракт из указанного сырья, содержащий липофильные и среднеполярные вещества, характеризуется большей антиоксидантной активностью, чем водный и 50% этанольный экстракты.

Ключевые слова: Calendula officinalis L., экстракт, биологически активные вещества, антиоксидантная активность.

Введение Многостороннее фармакологическое действие препаратов Calendula officinalis L. связано с содержанием в цветках различных классов вторичных метаболитов: каротиноидов, стеринов, моно-, сескви- и тритерпеноидов, фенольных соединений, полисахаридов [1, 2]. С. officinalis – доминирующий компонент антиязвенного средства «Вентрофит» и его исходного сбора [3].

Цель данной работы – определить вклад биологически активных веществ (БАВ) C. officinalis различной полярности в антиоксидантную активность (АОА) экстрактов.

Экспериментальная часть Из аптечных образцов сырья – цветков С. officinalis получены экстракты сухие: экстракт №1, содержащий липофильные вещества (экстрагент – 80 и 50% этанол) [3]; экстракт №2, содержащий гидрофильные вещества (экстрагент – вода очищенная); экстракт №3, содержащий среднеполярные вещества (экстрагент – 50% этанол).



Для изучения качественного состава экстракта С. officinalis использована тонкослойная хроматография на силикагеле (ТСХ) с подвижной фазой: этилацетат – муравьиная кислота – уксусная кислота – вода 100 : 11 : 11 : 26 (I); хлороформ – уксусная кислота – этанол – вода 60 : 32 : 14 : 6 (II); бензол – этилацетат (III). Для обнаружения флавоноидов брали 2% спиртовый раствор алюминия хлористого, пары аммиака;

тритерпеновых сапонинов – 1% раствор ванилина в концентрированной серной кислоте, 20% раствор фосфорновольфрамовой кислоты. Количественное определение биологически активных веществ проведено по известным методикам [3]. АОА растительных объектов обнаруживали по методу, основанному на способности биологической жидкости тормозить накопление продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой в суспензии желточных липопротеидов, взятой в качестве модельной системы окисления [4]. Величину АОА экстрактов и отваров оценивали по концентрации испытуемого раствора в (г/л)–1, необходимой для ингибирования образования продукта (ПОЛ) – малонового диальдегида (МДА) на 50%.

Обсуждение результатов На хроматограмме экстракта №1 доминирующими флавоноидами, реагирующими с алюминия хлоридом, являются вещества с Rf (I): 0,35–0,45 (нарциссин [5]); 0,28–0,40; 0,58–0,60; 0,1–0,2; 0,08–0,15. Наибольшее количество флавоноидов обнаружено в экстракте №1, среднеполярныефлавоноиды в экстракте №3 содержатся в меньшем количестве, чем в экстракте №2 (табл. 1). Таким образом, большая часть флавоноидов C.

officinalis имеет гидрофобную природу и извлекается спиртом высокой концентрации. Тритерпеновые сапонины, реагирующие с 1% раствором ванилина в концентрированной серной кислоте и 20% раствором фосП.Б. ЛУБСАНДОРЖИЕВА форновольфрамовой кислоты, имеют Rf (II): 0,22; 0,43; 0,65 и Rf в системе (III): 0,05; 0,22; 0,33; 0,68; 0,80.





Известно, что в C. officinalis L. содержатся свободные и связанные тритерпеновые спирты – 5%, олеаноловая кислота и ее гликозиды (календулозиды A, B, C, D, E, F, G, H) – 4–5% [1]. Тритерпеновые сапонины извлекаются спиртом разной концентрации равномерно, и различия в их количественном содержании в экстрактах незначительны (табл. 1). Основное фармакологическое свойство C. officinalis – противовоспалительное, оно обусловлено наличием тритерпеновых спиртов, сапонинов, тритерпеновых эфиров жирных кислот [6].

Олеаноловая кислота и ее производные не обладают антирадикальной активностью, но в разной степени ингибируют NO-продукцию в липополисахарид-активированных макрофагах [7].

Экстракты С. officinalis не отличаются высокими значениями АОА (табл. 2), что согласуется с литературными данными [7, 8]. Антирадикальная активность водного и метанольного экстракта C. officinalis в опыте с пероксильными радикалами была ниже, чем в опыте с гидроксильными радикалами, но выше, чем в опыте с DPPH-радикалами [2]. Авторы [2] предположили, что на подобные различия влияют следующие обстоятельства: кинетические константы реакции между гидроксильным радикалом и фенольными соединениями (ФС) выше, чем для реакции между пероксильными радикалами или радикалами DPPH и ФС; синергическое действие веществ с разной полярностью. В другом опыте водные и спиртовые извлечения из C. officinalis с разным содержанием фенольных антиоксидантов показали почти идентичную АОА [7]. Экстракт из C. officinalis, содержащий 3,4 мг/г флавоноидов и 6,6 мг/г ФС, проявлял незначительную антирадикальную активность [8].

Полученные данные свидетельствуют о том, что наиболее эффективен в ингибировании образования МДА полиэкстракт, содержащий липофильные и среднеполярные вещества (экстракт №1). Среднеполярные вещества С. officinalis, экстрагируемые 50% этанолом, наименее эффективны, но в комбинации с липофильными веществами (экстракт №1) показывают более высокую АОА. Водорастворимые вещества С. officinalis обладают большей АОА в диапазоне низких доз (0,05–0,40 мг/мл), чем среднеполярные вещества, экстрагируемые 50% этанолом. В водном экстракте присутствуют антиоксиданты (АО) – гликозиды флавоноидов [9], полифенолы, хлорогеновая, кофейная, р-кумаровая и ванилиновая кислоты [2] в комбинации с полисахаридами [1, 10], восстанавливающими фенольные АО до исходных концентраций.

Известно, что для АОА и радикалперехватывающей активности флавоноидов важны следующие структурные особенности: О-дифенольная группа в кольце В; 2–3-двойная связь, конъюгированная с 4-оксо функцией, и гидроксильные группы в положении 3 и 5 кольца С. Флавоноиды С. officinalis представлены производными флавона, флавонола с тремя (нарциссин – доминирующий флавоноид [5], календофлазид I, календофлавозид II), четырьмя (изорамнетин, календофлавобиозид III, изорамнетин-3-О--D-глюкопиранозид, изокверцитрин) и пятью (кверцетин) гидроксильными группами [9]. По своим структурным особенностям дигликозиды и монозиды флавоноидов С. officinalis, извлекаемые в водный экстракт, не могут считаться сильными АО: замещение 3-ОН группы в кольце С на углеводную часть, присутствие одиночной ОН-группы в кольце В даже в комбинации с сопряженной двойной связью снижают АОА [11, 12]. ОН-группы кольца А флавоноидов также имеют низкую реактивность по отношению к пероксильным радикалам [12].

Другие водорастворимые АО C. officinalis – фенолокислоты в тест-системах in vitro обладают достаточно высокой АОА, убывающей в ряду: хлорогеновая кофейная феруловая кумаровая кислоты [13]. В липофильной фазе с пероксильными радикалами дифенолы (хлорогеновая и кофейная) были более эффективны, чем монофенолы (протокатеховая и р-кумаровая кислоты). Присутствие —СНСН—СООН группы в коричной кислоте обеспечивает большую Н-донорскую способность и стабилизацию образованного радикала, чем присутствие карбоксилатной группы в бензойных кислотах. Так, кофейная, синаповая, феруловая и п-кумаровая кислоты более активны, чем протокатеховая, сиринговая, ванилиновая кислоты в липидной системе [11].

Таблица 1. Содержание биологически активных веществ в сырье и экстрактах С.

officinalis Наименование Содержание биологически активных веществ Сырье Экстракт 1 Экстракт 2 Экстракт 3 Флавоноиды, в пересчете на рутин, % 2,35± 0,01 6,48 ± 0,02 2,74 ± 0,01 1,31 ± 0,01 Дубильные вещества, в пересчете на таннин, % 3,28± 0,01 7,09± 0,03 2,45 ± 0,01 1,74 ± 0,01 Каротиноиды, в пересчете на -каротин, мг % 2,32± 0,01 5,49± 0,01 - 0,32 ± 0,01 Аскорбиновая кислота, % 1,42± 0,01 8,3 ± 0,03 6,41 ± 0,03 7,05 ± 0,02 Тритерпеновые сапонины, в пересчете на олеа- 4,13± 0,01 6,08± 0,01 7,92 ± 0,01 8,37 ± 0,06 ноловую кислоту, % Водорастворимые полисахариды, % 12,85± 0,10 11,90± 0,10 20,17± 0,14 15,86 ± 0,12 Примечание: прочерк означает, что вещества не обнаружены.

АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ ЭКСТРАКТОВ … 125

Таблица 2. Антиоксидантная активность экстрактов С.
officinalis Концентрация экстрактов, мг/мл АОА, (г/л) -1 Наименование 0,05 0,1 0,2 0,4 0,6 1,0 2,0 Ингибирование образования МДА, % Экстракт №1 5,0 15 36 50 62 72 84 86 Экстракт №2 3,8 20 30 44 61 72 81 85 Экстракт №3 2,8 10 19 32 52 73 78 80 Примечание: МДА – малоновый диальдегид Агликоны флавоноидов – липофильные АО более эффективны, чем их гликозиды и фенолокислоты в тест-системах in vitro [14]. В молекуле кверцетина 3-ОН группа закрепляет положение кольца В в одной плоскости с кольцом А и С через водородную связь, и эта копланарность увеличивает стабильность в флавоноидном феноксильном радикале [12, 13]. Таким образом, высокая АОА кверцетина, содержащегося в С.

officinalis в количестве 0,011–0,046% [15], реализуется благодаря присутствию данной межмолекулярной водородной связи и 3',4'-катехола [14, 16].

Протективное действие флавоноидов при заболеваниях желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) связано не только с прямой АОА, но и с их способностью уменьшать дезаминирование ДНК, образование токсичного нитрозоамина и особенно хелатировать ионы переходных металлов. Неабсорбированное пищевое железо может вызывать прооксидантное действие в ЖКТ, и присутствие большого количества флавоноидов и других полифенолов С. officinalis способно уменьшить его негативное влияние [11].

Присутствие ионов железа также влияет на активность другого липофильного АО – -каротина, оказывающего прооксидантный эффект в высоких концентрациях, который может увеличиваться с уменьшением его окислительного потенциала [17]. Кроме -каротина, в С. officinalis содержатся - и -каротины, зеаксантин, ликопин, лютеин, рубиксантин, цитроксантин, виолаксантин, флавоксантин, хризантемаксантин [1].

Ликопин в настоящее время признан наиболее эффективным АО во многих тест-системах [18], а в смеси с лютеином показывал наилучший протективный эффект. АОА смесей каротиноидов более эффективна, чем индивидуальных соединений, и их синергический эффект может быть обусловлен специфичным положением различных каротиноидов в мембранах [19]. Гидрофобность каротиноидов способствует их встраиванию в мембранные фосфолипидно-белковые структуры и дальнейшему быстрому расходованию при индукции перекисного окисления. Так, удаление липофильных веществ (экстракция гексаном) из суммарного экстракта C. officinalis снижало АОА последнего с 5,0 до 3,1 (г/л)–1, и это влияние было значительным при низких дозах экстракта [20]. В данном опыте экстракт №3 с минимальным содержанием каротиноидов в диапазоне доз 0,05–0,2 мг/мл ингибировал образование МДА на 5–18 % меньше, чем экстракт №1 с высоким содержанием каротиноидов.

Выводы Таким образом, извлекаемые растворителями разной полярности БАВ C. officinalis характеризуются средними значениями АОА in vitro. Синергическое действие БАВ в экстракте №1 обусловлено оптимальной комбинацией эффективных АО – каротиноидов и среднеполярных фенольных соединений.

Список литературы

1. Коновалова О.В., Рыбалко К.С. Биологически активные вещества Calendula officinalis L. // Растительные ресурсы. 1990. Т. 26. Вып. 3. С. 448–463.

2. etkovi G.S., Djilas S.M., anadanovi-Brunet J.M., Tumbas V.T. Antioxidant properties of marigold extracts // Food Research International. 2004. V. 37. P. 643–650.

3. Лубсандоржиева П.Б., Ажунова Т.А., Шантанова Л.Н., Унагаева А.А., Муханова Л.Х. Биологически активные вещества антиязвенного растительного средства Вентрофит // Химия растительного сырья. 2006. №1. С. 59–64.

4. Клебанов Г.И., Бабенкова И.В., Теселкина Ю.О. и др. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных липопротеидов // Лабораторное дело. 1988. №5. С. 59–62.

5. Шарова О.В., Куркин В.А. Флавоноиды цветков календулы лекарственной // Химия растительного сырья. 2007.

№1. С. 65–68.

6. Hamburger M., Adler S., Baumann D., Frg A., Weinreich B. Preparative purification of the major anti-inflammatory triterpenoid esters from Marigold (Calendula officinalis) // Fitoterapia. 2003. V. 74. P. 328–338.

126 П.Б. ЛУБСАНДОРЖИЕВА

7. Yang Z.-G., Li H.-R., Wang L.-Y., Li Y.-H., Lu S.-G., Wen X.-F., Wang J., Daikonya A., Kutanaka S. Triterpenoids from Hippophae rhamnoides L. and their nitric oxide production-inhibitory and DPPH radical-scavenging activities // Chem. Pharm. Bull. 2007. V. 55. №1. P. 15–18.

8. Miliauskas G., Venskutonis P.R., Beek T.A. van Screening of radical scavenging activity of some medicinal and aromatic plant extracts // Food Chemistry. 2004. V. 85. P. 231–237.

9. Комиссаренко Н.Ф., Чернобай В.Т., Деркач А.И. Флавоноиды соцветий Calendula officinalis // Химия природных соединений. 1988. №6. С. 795–800.

10. Чушенко В.Н., Жуков Г.А., Карамова О.Е., Оболенцева Г.В., Дзюба Н.П. Углеводы соцветий Calendula officinalis // Химия природных соединений. 1988. №4. С. 585–586.

11. Rice-Evans C., Miller N.J., Paganga G. Structure-antioxidant activity relationships of flavonoids and phenolic acids // Free Rad. Biol. Med. 1996. V. 20. №7. P. 933–956.

12. Arora A., Nair M.G., Strasburg G.M. Structure-activity relationships for antioxidant activities of a series of flavonoids in a liposomal system // Free Radical Biology and Medicine. 1998. V. 24. №9. P. 1355–1363.

13. Soobrattee M.A., Neergheen V.S., Luximon-Ramma A., Aruoma O.I., Baborun T. Phenolics as potential antioxidant therapeutic agents: mechanism and actions // Mutation Research. 2005. V. 579. P. 200–213.

14. Lopez M., Martinez F., Del Valle C., Ferrit M., Lugue R. Study of phenolic compounds as natural antioxidants by a fluorescence method // Talanta. 2003. V. 60. P. 609–616.

15. Ивасенко С.А., Прибыткова Л.Н., Адекенов С.М., Ющенко Н.С., Бондарец В.Г. Содержание каротиноидов и флавоноидов в соцветиях некоторых сортов Calendula officinalis L. // Растительные ресурсы. 2000. Т. 36.

Вып. 2. С. 107–110.

16. Foti M., Piattelli M., Baratta M.T., Ruberto G. Flavonoids, coumarins, and cinnamic acids as antioxidants in a micellar system. Structure – activity relationship // J. Agric. Food Chem. 1996. V. 44. P. 497–501.

17. Polyakov N.E., Leshina V., Konovalova A., Kispert L.D. Carotenoids as scavengers of free radicals in Fenton reaction:

antioxidants or pro-oxidants? // Free Radic. Biol. Med. 2001. V. 31. №3. P. 398–404.

18. Rao A.V., Rao L.G. Carotenoids and human health // Pharmacological Research. 2007. V. 55. P. 207–216.

19. Stahl W. Junghans A., Boer B., Driomina E.S., Brivida K., Sies H. Carotenoid mixtures protect multilamellar liposomes against oxidative damage: synergistic effects of lycopene and lutein // FEBS Letters. 1998. V. 427. №2. P. 305–308.

20. Лубсандоржиева П.Б., Ажунова Т.А., Шантанова Л.Н., Николаев С.М., Чукаев С.А., Унагаева А.А., Муханова Л.Х. Вклад каротиноидов в суммарную антиоксидантную активность антиязвенного экстракта in vitro // Сибирский медицинский журнал. 2005. №8. С. 54–57.

Поступило в редакцию 5 июня 2008 г.



Похожие работы:

«Моросанова Мария Александровна Механизмы повреждения клеток эпителия почечных канальцев при моделировании пиелонефрита in vitro 03.03.04 клеточная биология, цитология, гистология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени канди...»

«КАРЕВ Вадим Евгеньевич КЛИНИЧЕСКИЕ И ИММУНО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПАТОГЕНЕЗА ХРОНИЧЕСКОЙ HBVИ HCV-ИНФЕКЦИИ 14.01.09 – инфекционные болезни 14.03.02 – патологическая анатомия Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научные консультанты – з.д.н. РФ, академик РАН, д.м.н., профессор Ю.В....»

«Остроумов С.А. Концепции экологии экосистема, биогеоценоз, границы экосистем: поиск новых определений // Вестник МГУ. Серия 16. Биология. 2003. № 3. С.43-50. Табл. Рез. на англ. яз. Библиогр. 44 назв. [Нов. трактовка, нов. варианты определений. П...»

«ВОСТОЧНОЕВРОПЕЙСКИЙ БОТАНИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК. 2007. № 2. С.181-227. УДК 581.9 (471.56) РАСТИТЕЛЬНОСТЬ КАМЕНИСТОЙ СТЕПИ ЖИГУЛЕВСКИХ ГОР СИСТЕМАТИЧЕСКИЙ ПЕРЕЧЕНЬ ВИДОВ ФЛОРЫ Л.М. Черепнин * ПРЕДИСЛОВИЕ РЕДАКТОРА Начиная с этого номера, мы начинаем публиковать рукопись диссертации Л.М. Черепнина (1...»

«формой устанавливали путем сравнения профилей амплифицированных ПЦРпродуктов. Синтезированные в процессе исследования Semi-RAPD праймеры могут быть рекомендованы для генотипирования выделенных и идентифицированных клонов. УДК 619:616.9-636.1 Шалгынбаев Э.К., Коспанова М. Н., Рябинникова А.И., Омарова З.Д., Орынбаев М.Б. РГП "Научно-исследовательс...»

«ФЕДЕРАЛЬНОЕ КОСМИЧЕСКОЕ АГЕНТСТВО РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИСПЫТАТЕЛЬНЫЙ ЦЕНТР ПОДГОТОВКИ КОСМОНАВТОВ имени Ю.А. ГАГАРИНА" УЧРЕЖДЕНИЕ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР...»

«1. Вольф Бавария 2. Основы звукоизоляции 3. Инструкция по монтажу 4. PhoneStar на полу 5. PhoneStar на стене 6. PhoneStar на потолке Промышленная звукоизоляция 7. Материалы и комплектующие 8. Сертификаты 9. special Инструкция по монтажу Общая информация PhoneStar – инновационная з...»

«ЕВРОПЕЙСКАЯ ЭКОНОМИЧЕСКАЯ КОМИССИЯ ОРГАНИЗАЦИИ ОБЪЕДИНЕННЫХ НАЦИЙ ОБЗОРЫ РЕЗУЛЬТАТИВНОСТИ ЭКОЛОГИЧЕСКОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ БЕЛАРУСЬ Третий обзор сокращенная версия ОРГАНИЗАЦИЯ ОБЪЕДИНЕННЫХ НАЦИЙ 2016 год СОДЕРЖАНИЕ Вступление Резюме Выводы и рекомендации Осуществление рекомендаций, содержащихся в первом ОРЭД Вступление Третий...»








 
2017 www.net.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные матриалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.